Способ приготовления вакцины против ящура

 

О П И С А Н И Е 352441

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Сокгз Советских

Социалистических

Республик

К ПАТЕНТУ

Зависимый от патента М

М. Кл. А 61k 2i3f00

Заявлено 21.VI.1968 (№ 1252439/30-15) Приоритет 22Х1.1967, ¹ 111546, Франция

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

УДК 619:616.988.43 (088,8) Опубликовано 21.IX.1972. Бюллетень М 28

Дата опубликования описания 6.Х.1972

Авторы изобретения

Иностранцы

Кзеслав Макковиак, лКан Фонтэн и Кристиан Дюбуклард (Франция) Иностранная фирма

«Энститю Мерье» (Фр анция) Заявитель

ЬСЕСОЮЗНЛЯ

ПЛТЕ :О- .: т 11пЧ(,КЛЮ а 14ЬА

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ЯЩУРА

Изобретение относится к способу пригоговления противовирусных вакцин.

Известны способы приготовления вакцины против ящура путем культивирования вируса ящура на переживающей ткани эпителия язы- 5 ка крупного рогатого скота со сменой питательной среды при непрерывной аэрации и перемешивании с использованием нескольких сборов вирусосодержащей культуральной жидкости и измельченной эпителиальной ткани. 10

Однако эти способы приготовления не ооеспечивают получения высокоиммуногенной вакцины.

С целью повышения иммуногенных свойств вакцины, ее готовят из смеси вирусосодержа- 15 щей культуральной жидкости без использования эпителиальной ткани.

Переживающую ткань эпителия языка крупного рогатого скота получают от животных не позднее чем через 1 — 2 час после забоя. 20

Эпителий обрабатывают общепринятым методом, предусмотренным в технологическом процессе изготовления противоящурной вакцины по методу Френкеля.

25 Культуру вируса ящура засевают пз расчета 10 — ЬГСРео на 30 языков.

Под термином DECP5с имеется в виду доза вируса, вызывающая цитопатогенный эффект в 50% случаев, на 1 лги одноклеточной культу30 ры клеток почки свиньи.

0,096

0,036

Среда Френкеля содержит (в г):

Пептон 3,0

Хлористоводородный цистеин

Гемин

Йнсулигг

Тироксин

Глюкоза

Глютатион

Хлористый натрий

Хлористый калий

Хлористый кальций

MgCI2 6H O

ХаН2РОч 2Г1 О гча 1-1РО< 21-1зО

NÌа ICO„XaOH(Х)

1-1иа ци н

Лизин

Аргинин

Метионин

Лейцин

Пантотсновая кислота

Фенилаланин

Треонин

Триптофан

Гистидин

Вода

0,9 лгежд, ед.

0,09 лгг

1,0

0,01

7,2

0,18

0,18

0,09

0,076

0,524

1,0

1,25 и.г

0,001

0,200

0,041

0,200

0,130

0,250 лгг

0,025

0,0425

0,05

0,0305

1000 тгл

352441

Составитель P. Махнюк

Техред Л. Евдонов

Редактор T. Шарганова

Корректор Л. Бадылама

Заказ 3224) IO Изд. № 1330 Тираж 406 Подписное

ЕТНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Первое культивирование вируса производят в течение 15 — 20 час при 37 С с непрерывным неремешиванием и аэрацией, Затем культуральную жидкость сливают, эпителиальную ткань заливают новой порцией питательной среды Френкеля в том же количестве при

37"С и проводят второе культивирование в течение 5 — 12 сас. По истечении этого времени культуру охлаждают и сливают. Для первой культуральной жидкости к концу первой стадии культивирования фиксация комплемента составляет 1/4; титр заражения 10"

РЕС1 во/мл; DVCpî 0,20 ил.

Для второй культуральной жидкости к концу второй стадии культивирования фиксация комплемента составляет 1/2; титр заражения

)10о РЕСРоо/мл; DVC.„p 0,11 мл.

Для смеси, полученной при объединении обеих порций культуральной жидкости, фиксация комплемента равна 1/4; титр заражения

10" DECP,-о/мл; РЧСоо 0,08 мл.

DVC представляет собой вакциннрующую дозу для 50 морских свинок.

Фиксация комплемента выражена предельным разбавлением, полученным прн полной фиксации комплемента по полуколичественному способу Кольмера. По данным авторов полезные свойства второй культуральной жидкости выше, чем первой, а смесь этих жидкостей дает лучшие результаты. Для сравнения разведение вируса «О фландр» проводят в указанных условиях в течение 8 час. Затем после измельчения эпителия языков крупного ро. гатого скота производят экстракцию в буферной жидкости.

Для культуральной жидкости только после разведения культуры фиксация комплемента составляет 1/8; титр заражения 10"

DECP„p/ìë; РЧС„О,З мл.

5 Для культуральной жидкости в смеси с жидкостью после экстрагирования эпителия фиксация комплемента составляет 1/8; титр заражен и я 10" Р ЕС Р оо/мл; РЪ С о 0,5 мл.

Опытами установлено, что введение в куль10 туральную жидкость экстракта эпителия языка вызывает ухудшение свойств вирусной взвеси, К вирулентной культуральной жидкости, полученной после ее охлаждения до 4 С, добав15 ляют хлороформ и оставляют на 12 — 24 «пс.

Осадок удаляют центрифугированием и фильтрованием на пластинах «S-5» и жидкость инактивируют для получения вакцины. Вакцину готовят общепринятым классическим мето20 дом, например путем адсорбции вируса на гидроокиси алюминия и инактивации совместным действием формалина и нагревания.

Предмет изобретения

25 ,Способ приготовления вакцины против ящура, включающий культивирование вируса ящура на переживающей ткани эпителия языка крупного рогатого скота со сменой питатель30 ной среды при непрерывной аэрации и перемешивании, отличаюи1ийся тем, что, с целью повышения иммуногенных свойств вакцины, ее готовят из смеси вирусосодержащей культуральной жидкости без использования эпите35 лиальной ткани.