Способ количественного определения моногалакто- зилдиглицерида, дигалактозилдиглицерида и сульфолипида в липидопигментной смеси
з есс:-);)
QA7Ky ° -и
ОПИСАН И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
За явлено 20.1V.1970 (№ 1429580/23-4) М. Кл. G 01п 7!04 с присоединением заявки %
Приоритет
Опубликовано 05.VI.1972. Б|оллетснь № 18
Дата опубликования описания 23Х1.1972
Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 543.853(088.8) Авторы изобретения
В. С. Родионов, К. А. Нюппиева и Л. С. Захарова
Институт биологии Карельского филиала АН СССР
Заявитель
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОНОГАЛАКТОЗИЛДИГЛИЦЕРИДА, ДИГАЛАКТОЗИЛДИГЛИЦЕРИДА
И СУЛЬФОЛИПИДА В ЛИПИДОПИГМЕНТНОЙ СМЕСИ
Изобретение относится к аналитической хи. мии природных веществ.
Известен способ количественного определения моногалактозилдиглицерида, дигалактозилдиглицерида и сульфолипида путем определения в них галактозы после очистки от примесей на колонках с адсорбентом и разделения на пластинка«с тонким слоем силикагеля с последующими проявлением хроматограмм опрыскиванием растворами р-нафтола и определением количества по площади пятен.
Однако известный метод обладает недостаточными специфичностью и точностью.
С целью повышения точности и избирательности анализа, предлагается способ количественного определения указанны«соединений в липидопигментной смеси путем пропускания их через колонки с адсорбентом, разделения на пластинках с тонким слоем силикагеля в токе растворителя и проявления хроматограмм опрыскиванием раствором реактива молибденовокислого аммония с последующим определением количества липидов по площади пятен.
Пример. Липиды экстрагпруют из листьев картофеля, отмывают от нелипидных загрязнений и фракционируют HB колонках
ДЭАЭ-,целлюлозы. Растворители выпаривают, липиды растворяют в хлороформе и 0,01—
0,05 мл раствора наносят на пластинки с тонким слоем спликагеля КСК. Липидпук сме«ь разделяют в системе «лороформ — мстанол ——
7 н. 1чН1ОН (б5: 30: 4 по объему) в вос«одящем токе растворителей при комнатной
5 температуре, пластинки опрыскивают реактивом, приготовленным следующихт образом, 16 г молибдена аммония растворяют в
120 мл воды (раствор 1), после чего к 80 ил раствора 1 добавляют 40 мл концентрирован10 ной НС1 и встряхивают 30 мин с 10 ил ртути.
Ртуть отделяют фильтрованием и к оставшейся части раствора 1 добавляют 200 м.т концентрированной H SO„. Фильтрат после отделения ртути и охлажденнуfo «месь доводяг
15 водой до 1 л. Обработанные реактивом «роматограммы оставляют на 20 — 30 мпн при комнатной температуре, В течение этого «рока белый фон пластинок превращается в «иний, на котором моногалактозплдиглицерпд, 20 дигалактозилдиглицерпд и сульфолиппд проявляются в виде белых пятен.
Количественное определение ведут, «троя предварительно калибровочные графики в
2S координатах площадь пятен — — количество лпппдов (в мпкромоля«) после разделения и обработки смесей с известным содергкапием липидов, Площадь пятен определяют планиметром
30 или весовым способом путем взвешивания
340937
Составитель В. Бодня
Коррскгор E. Зимина
Тскред 3. Тараненко
Рсдактор О. Кузнецова
Заказ 1844/15 Изд. № 823 Тираж 448 Подписное
ЦИИИПИ Комппста по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4, 5
Типография, пр. Сапунова, 2 вырезанных из кальки пятен на аналитических весах.
В пределах 0,1 — 1,5 дгк,ноль концентрация кахкдого глнколипнда пропорциональна площади пятен, чувствительность метода
0,05 ик,ио гь, точность +-4,2о о.
Предмет изобретения
Способ количественного определения моногалактозилдиглицерида, дигалактозилдиглицернда и сульфолипида в липидопигментной смеси путем пропускания их через колонки с адсорбентом с последующими разделением на пластинках с тонким слоем силикагеля в токе растворителя и проявлением полученных хро5 матограмм путем опрыскивания их проявителем с последующим измерением полученной при этом площади пятен, от гицающийся тем, что, с целью повышения точности и избирательности анализа, в качестве проявителя
10 хроматограмм используют раствор реактива молибденовокислого аммония.
