Патент ссср 299051

 

29905I

О П И СА Н И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ х

Союз Советских

Социалистических

Республин

Зависимый от патента №

Заявлено 22.1!.1967 (М 1136935/30-15)

Приоритет 22.И.1966, № 10285/66, Япония

Опубликовано 16.Ш.1971. Бюллетень № 11

МПК А Oln 23/00

Номитет по делам иаобретеиий и открытий при Совете йтиииотров

СССР

УДК 632.937.15:

:632.951 (088.8) Дата опубликования описания 10Л 1,1971

Авторы изобретения

Иностранцы

Томохиро Ибуки и Нобуо Фудзиеси (Япония) Иностранная фирма

«Сейбу Кагаку Когио Кабусики Каиша> (Япония) Заявитель

БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ИНСЕКТИЦИД ДЛЯ БОРЬБЫ С МУХАМИ

Изобретение относится к средствам борЬбы с насекомыми-вредителями.

Известны бактериальные инсектициды для борьбы с мухами, основанные на использовании в качестве активного ингредиента жизнеспособных спор или культур Bacillus thuringiensis var. thuringiensis Berliner или var. sotto.

Они не токсичны для теплокровных животных и человека, однако токсичны для тутового шелкопряда. Поэтому в районах развитого 10 шелководства их применение крайне нежелательно.

Предлагается 6актериальный инсектицид для борьбы с мухами, основанный на использовании в качестве биологически — активного 15 компонента жизнеспособных спор или субстанции с жизнеспособными спорами Bacillus moritai, штамм № 4, зарегистрированный в Научно-исследовательском институте ферментационных процессов Агенства промышленной нау- 20 ки и технологии (Япония).

Ниже дано описание этого штамма: а) Форма.

Подвижные палочки размером 0,8Х (2,8—

3,3) мк; спорангии с определенным набуха. 25 нием; споры эллипсовидные 1,7Х1,8 мк, подвижные.

6) Стадия роста.

Агаровые колонии: мокрые и серовато-белые, при четырехдневной культуре †диаметром 8 — 9 мм, конфигурация — круглая выпуклая, На глюкозном бульонном агаре: рост несколько лучше, чем на агаре.

В бульоне: образуются бактериальные колонии с большим количеством осадка.

В пептонной воде: образуются пленки с большим количеством осадка.

В бульоне с 10 хлористого натрия: рост отсутствует.

Условия температуры: от 20 до 37 С. рН роста 6 — 9 (при рН 6 споры образуются с трудом) . в) Патогенность.

Патогенен для мух, но не действует на тутового шелкопряда, кур, мышей и рыб. г) Физиологические свойства:

Окраска по Грамму (+)

Окраска метиловым красным (-+- )

Синтез индола (†)

Синтез аммиака (+)

Синтез каталазы (+)

Гидролиз крахмала (— )

Свертывание молока (— 7)

Восстановление лакмуса (†)

Нейтрализация кислот (+) 2990Я

Реакция с винилпирролидином (+)

Образование сероводорода (†)

Восстановление нитратов (†)

Разжижение желатины (-+- сл.)

Использование лимонной кислоты

Использование мочевины (†) (+) питания:

П р и м е ч а н и е: сл. — слабая реакция.

Цифра, стоящая рядом, обозначает число дней.

Bac. moritai отличается от Вас. thuringiensis тем, что у ней отсутствует образование кристаллического токсина; она медленно разжижает желатину, не гидролизует крахмал, не восстанавливает нитраты, медленно использует сахарозу в культуре и обладает более сильной патогенностью для мух.

Штамм № 4 Вас. moritai культивируют в обычных условиях. Ниже дан пример его культивирования.

500 л бульонной культуральной среды, рН

7,0, с содержанием 1,0% мясного экстракта, 1,0% пептона и 0,2% фтористого натрия инокулируют штаммом № 4 и культивируют в течение трех дней при 27 С. Затем центрифугируют в целях отделения культуральной среды.

Осадок (5,75 кг) сушат и измельчают. Получают 1,1 кг сухого порошка с содержанием

9)(10" бактерий на 1 г, который равномерно распределяют в 1020 кг наполнителя. Выход готового бактериального инсектицида составляет около 1 т с содержанием 10 жизнеспособных спор на 1 г.

Механизм действия бактериального инсектицида на мух заключается в следующем. При поедании личинками мух бактерий инсектицида процессы превращения личинок в куколки, а куколок во взрослых особей становятся аномальными. В результате этого личинки не окукливаются, а если и окукливаются, д) Источники углеродного

Арабиноза

Глюкоза

Фруктоза

Лактоза

Сахароза

Рафиноза

Инозит

Глицерин и-Метил глюкозид

Декстрин

Целлюлоза

Ксилоза

Манноза

Галактоза

Мальтоза

Трегалоза

Маннит

Сорбит

Салицин

И нулин

Крахмал (†) (+) (+) (†) (+2,3) (— ) (— ) (+) (†) (+) (†) (†) (†) (†) (+) (+) (— 7) (— ) (†) (†) (†) 5

Таблица 1

Количество

Отрастание крыльев у куколок, у вылупившихся взрослых мух образовавшихся куколок

Вариант

Необработанные мухи

Мухи, обработанные бактериями

4398

4991

88,1

50,0

25

55 и совершенно не действует на тутового шелко60 пряда. Это видно из табл. 4.

Предлагаемый бактериальный инсектицид

40 то куколки оказываются десрормированными, и скорость роста крыльев у них резко снижается. Если все же куколки превращаются во взрослых особей, то последние остаются без развитых крыльев и не дают следующей генерации.

Ниже приведены опытные данные по испытанию предлагаемого бактериального инсектицида. В качестве тест-объекта была взята комнатная муха.

В табл, 1 приведены результаты применения бактериального инсекцида на куколках комнатной мухи.

Как правило, бактерии рода бацилл образуют некоторое количество дипиколиновой кислоты, которая обладает инсектицидным действием. Действие Вас. thuringiensis также связано с кристаллическим токсином, вырабатываемым этой бактерией. Вас. moritai по синтезу дипиколиновой кислоты точно такая же.

Однако если учесть, что токсичность живых и мертвых бактерий Вас. moritai явно разная и что при применении живых бактерий обе эти бациллы ведут себя по-разному, то можно прийти к выводу, что инсектицидный эффект в данном случае не обусловлен дипиколиновой кислотой и что действие живых бактерий не обязательно вызывается кислотой, хотя происхождение токсина пока еще не ясно.

В табл. 2 показан характер действия Вас.

moritai и Вас. thuringiensis, тест-объект Musca

domestica L, Цитировано J. Invertebrate Pathol., 7, 263—

264 (1965) .

Зависимость между токсичностью и концентрацией штамма № 4 Вас. moritai показана в табл. 3.

Таким образом, желательно, чтобы концентрация бактерии на 1 г культуральной среды была порядка 6)(104.

Предлагаемый бактериальный инсектицид обладает избирательной токсичностью для мух особенно целесообразно использовать в районах развитого шелководства против мух М. domestica, 1 ucilia caesar, Barboridae, Stomaxys

calcitraus, Muscina stabulaus.

299051

Таблица 2

Количество

Смертность, % образовавшихся куколок

Вид бактерий, культура жизнеспособных спор отродившихся мух образцов

Вас, moritai

2 4Х105

4,8Х 104

Конечная цельная культура

100

28

Фильтрат автоклавированный

18

27

Вас. thuringiensis

8,0Х 10а

2,0Х10

Конечная цельная культура

47

Фильтрат автоклавироваииый

Таблица 3

Количество

Смертность, образовавшихся куколок отродившихся образцов мух

Таблица 4

Количество образцов

Штамм бактерий

Штамм тутового шелкопряда

Концентрация бактерий

Смертность, шт

Вас moritsi штамм Уо 4

124ХС 124 (первый день четвертого периода) 10>/,ил

Вас. thuringiensis; чаг. thuringien51$

10 (мл

10 /л л

var. sotto

Предмет изобретения типа эмульгирующего средства или присадки, отличающийся тем, что в качестве бактерии взят штамм Ко 4 Bacillus moritai, зарегистрированный в Научно-исследовательском институте ферментационных процессов Агентства промышленной науки и технологии (Япония).

Бактериальный инсектицид для борьбы с мухами, включающий биологически активный компонент на основе жизнеспособных спор бактерии или субстанции с жизнеспособными спорами этой бактерии, а также наполнитель

Составитель М. Дранишников

Техред Е. Борисова Корректор Е. Н. Мироисва

Редактор Юрчеикова

Заказ 1255!17 Изд.,Vs 558 Тираж 473 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий прп Совете Министров СССР

Москва, 3(-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Концентрация жизнеспособных спор на 1 г культурной среды

5Х 10

2Х 10

5Х10

ЗХ 10

6Х10

3Х104

1Х 104

0

0

14

22

0

0

0

18