Средства, обладающие антирадикальной активностью
Владельцы патента RU 2692124:
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) (RU)
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Новосибирский институт органической химии имени Н.Н. Ворожцова" Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) (RU)
Изобретение раскрывает применение 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида. Технический результат заключается в применении указанных соединений в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью. 1 ил., 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средств, обладающих антирадикальной активностью.
Известны средства, обладающие антирадикальной активностью: ионол (дибунол), аскорбиновая кислота, токоферола ацетат, эмоксипин, β-каротин [1, 2, 3, 4]. Наиболее близким к заявляемым в формуле патента веществам средством (прототипом) является 4-метил-2,6-диизобутилфенол (ионол), как соединение близкое по структуре, относящееся к пространственно-затрудненным фенолам и обладающее выраженной антирадикальной активностью [5, 6].
Задачей изобретения является расширение номенклатуры средств, обладающих антирадикальной активностью.
Поставленная задача достигается применением 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида (Ten-138-1), 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола (Ten-119-1), 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола (Ten-102-2) и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида (Sal-2b) в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью.
Использование 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью в литературе не описано.
Данный вид активности 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида явным образом не вытекает для специалиста из уровня техники.
2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксид, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ол, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ол и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксид могут быть использованы в качестве средств обладающих антирадикальной активностью при заболеваниях, характеризующихся активацией свободнорадикальных процессов и оксидативным стрессом.
Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "изобретательский уровень", "промышленная применимость".
Для оценки антирадикальной активности соединения была использована реакция со свободным стабильным радикалом 1,1-дифенил-2-пикрилгидразилом (ДФПГ) (Sigma, США). ДФПГ легко окисляет соединения, обладающие подвижным протоном, оставаясь при этом устойчивым к действию молекулярного кислорода. Активность соединения в отношении радикалов, возникающих в липидной фазе, оценивали, используя в качестве растворителя 95% этиловый спирт. Исходные концентрации растворов ДФПГ и исследуемых соединений составляли 0,25 мМ. Раствор ДФПГ и исследуемых соединений смешивали в объемном соотношении 1:1. Для контрольной пробы раствор ДФПГ смешивали в объемном соотношении 1:1 с 95% этиловым спиртом. Измерение оптической плотности проводили на спектрофотометре Cary 50 (Varian, Австралия) при длине волны 517 нМ в кювете из кварцевого стекла с длинной оптического пути 5 мм в течение 60 минут. Антирадикальную активность оценивали по показателю эффективного времени ЕТ50% - время, за которое оптическая плотность уменьшается на 50%.
Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием пакета статистических программ «Statistica 8.0». Данные представлены в виде М±m, где М - среднее значение, m - стандартная ошибка среднего значения. Различия считались достоверными при уровне значимости p<0,05. Для оценки достоверности межгрупповых различий использовали непараметрический критерий Манна-Уитни.
Изобретение будет понятно из следующего описания к приложенной к нему фигуре 1.
На фигуре 1 изображено изменение оптической плотности ДФПГ при λ=517 нм в ходе взаимодействия с ионолом и исследуемыми соединениями.
Результаты исследования антирадикальной активности соединений представлены в примерах 1-6.
Пример 1.
Для контрольной пробы раствор ДФПГ смешивали в объемном соотношении 1:1 с 95% этиловым спиртом. Исходная оптическая плотность раствора ДФПГ со спиртом составляла 99±1%. Оптическая плотность контрольной пробы не менялась со временем и через час составила 99±2% (табл., фиг. 1)
Пример 2.
При добавлении 0,25 мМ раствора ионола к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности по сравнению с контролем (фиг. 1). Через час ионол снижал оптическую плотность раствора до 42%. Показатель эффективного времени ЕТ50% ионола составил 12,66±0,70 с (табл.).
Примечание: * - достоверные различия по сравнению со значениями в контроле (p<0,05);
+ - достоверные различия по сравнению с ионолом (p<0,05).
Пример 3.
При добавлении 0,25 мМ раствора Ten-119-1 к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Ten-119-1 к 60-й минуте достигло 22±5% относительно исходного значения и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 1,21±0,28 мин и было в 10 раз ниже, чем у ионола (табл.).
Пример 4.
При добавлении 0,25 мМ раствора Ten-102-2 к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Ten-102-2 к 60-й минуте достигло 27±1%, относительно исходного значения, и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 1,52±0,08 мин и было в 8 раз ниже, чем у ионола (табл.).
Пример 5.
При добавлении 0,25 мМ раствора Ten-138-1 к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Ten-138-1 к 60-й минуте достигло 23±1% относительно исходного значения и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 4,97±0,22 мин и было в 2,6 раз ниже, чем у ионола (табл.).
Пример 6.
При добавлении 0,25 мМ раствора Sal-2b к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Sal-2b к 60-й минуте достигло 27±1% относительно исходного значения и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 4,78±0,26 мин и было в 2,5 раз ниже, чем у ионола (табл.).
Таким образом, соединения Ten-119-1, Ten-102-2, Ten-138-1, Sal-2b обладают антирадикальной активностью превышающей ионол.
Таким образом, соединения Ten-119-1, Ten-102-2, Ten-138-1, Sal-2b в модельной системе со свободным стабильным радикалом 1,1-дифенил-2-пикрилгидразилом проявляют большую антирадикальную активность, чем ионол.
Источники литературы, принятые во внимание
1. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А. и др. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. - М.: Фирма «Слово», 2006. - С. 193-196.
2. Пожилова Е.В., Новиков В.Е., Новикова А.В. Фармакодинамика и клиническое применение препаратов на основе гидроксипиридина // Вестник Смоленской государственной медицинской академии - 2013. - Т. 12, №3. - С. 56-66.
3. Теплый Д.Л., Кондратенко Е.И., Нестеров Ю.В., Курьянова Е.В., Ломтева Н.А. Влияние витамина Е на физиологические процессы: результаты и перспективные направления исследований // Фундаментальные исследования. - 2005. - №9. - С. 92-93.
4. Плотников М.Б., Иванов И.С., Смольякова В.И., Чернышева Г.А., Кучин А.В., Чукичева И.Ю., Краснов Е.А. Антиоксидантная активность производного О-изоборнилфенола при ишемии головного мозга у крыс // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2010. - Т. 8, №5. - С. 23-25.
5. Зарудий Ф.С., Гульмутдинов Г.З., Зарудий Р.Ф. и др. 2,6-Ди-трет-бутил-4-метилфенол (дибунол, ионол, тонарол) классический антиоксидант (обзор) // Хим.-фарм. журнал. - 2001. - Т. 35, №3. - С. 42-48.;
6. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Кандалинцева Н.В. Фенольные антиоксиданты в биологии и медицине. - LAP LAMBERT Academic Publishing, 2012. - 344-362 с.
Применение 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-3-оксида в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью.