Производные (тио)мочевины, ингибирующие фактор viia, способ их получения и фармацевтическая композиция
Изобретение относится к соединениям формулы I в виде отдельных тереизомеров и их смесей или их физиологически приемлемым солям, обладающим действием ингибитора фактора VIa. Соединения формулы I могут быть использованы для получения лекарственных средств, пригодных для ингибирования или снижения свертывания крови или воспалительной реакции либо для использования при лечении сердечно-сосудистых нарушений, тромбоэмболических заболеваний или рестенозов. В общей формуле соединений формулы I
m равно 0, 1, 2, 3 или 4; n равно 0, 1, 2 или 3; А представляет галоген; Х представляет кислород; R1 выбран из водорода, (С1-C6)-алкоксикарбонила и (С6-C14)-арилоксикарбонила, в которых все арильные группы незамещены или замещены (С1-C6)-алкокси; R2 выбран из водорода, (С1-C6)-алкила, (С6-C14)-арила, (С6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, R20-(C1-C6)-алкила, R20-(C6-C14)-арила и R20-(С6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, в котором R20 выбран из гидроксикарбонила, аминокарбонила; R3 выбран из водорода, циано, гидрокси и (C1-C6)-алкила; R4 выбран из (C1-C6)-алкила, (С6-C14)-арила, (С6-C14)-арил-(С1-C4)-алкила, Het и Het-(С1-C4)-алкила, в которых алкильные, арильные и Het группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10; R5 выбран из водорода, (С1-C6)-алкила, (С6-C14)-арила, (С6-C14)-арил-(С1-C4)-алкила, в которых алкильные и арильные группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10; либо R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют насыщенное или ненасыщенное 5-6-членное кольцо, которое представляет собой карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 одинаковых кольцевых гетероатома, выбранных из азота и кислорода, и которое может быть конденсировано с одной или двумя насыщенной или ненасыщенной карбоциклической кольцевой системой, содержащей от 5 до 10 кольцевых атомов, в которых получаемая R4(R5)C-группа незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10; R6 выбран из водорода, гидрокси. Изобретение также относится к способу получения соединений формулы I и фармацевтической композиции на их основе. 3 н. и 11 з. п. ф-лы.
Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I
в которой R1, R2, R3, R4, R5, R6, А, X, m и n имеют указанные ниже значения. Соединения формулы I представляют собой ценные, фармакологически активные соединения. Они проявляют сильное противотромботическое действие и подходят, например, для лечения и профилактики тромбоэмболических заболеваний и рестенозов. Они являются обратимо действующими ингибиторами фактора VIIa фермента свертывания крови и могут, в целом, применяться в таких условиях, в которых имеет место нежелательная активность фактора VIIa либо для лечения или предотвращения которых предполагается ингибирование фактора VIIa. Далее данное изобретение относится к способам получения соединений формулы I, их применению, в частности, в качестве активных ингредиентов в фармацевтических композициях, а также к содержащим их фармацевтическим композициям.
Способность образовывать сгустки крови жизненно необходима. Образование сгустка крови или тромба обычно является результатом повреждения тканей, которое инициирует каскад коагуляции и замедляет или предотвращает вытекание крови при заживлении раны. Другие факторы, не связанные непосредственно с повреждением тканей, такие как атеросклероз и воспаление, также могут инициировать каскад коагуляции. В целом, существует взаимосвязь между воспалением и каскадом коагуляции. Медиаторы воспаления регулируют каскад коагуляции, а компоненты коагуляции влияют на продуцирование и активность медиаторов воспаления. Однако при некоторых болезненных состояниях образование сгустков крови в системе кровообращения достигает нежелательного уровня и само по себе является источником заболевания, потенциально ведущего к патологическим последствиям.
Тем не менее, полное ингибирование системы свертывания крови при таких болезненных состояниях нежелательно, потому что оно может вызвать угрожающее жизни кровоизлияние. При лечении таких состояний требуется хорошо сбалансированное вмешательство в систему свертывания крови, и по-прежнему существует потребность в веществах, проявляющих подходящую фармакологическую активность для достижения такого результата.
Коагуляция крови представляет собой сложный процесс, включающий постепенно усиливающуюся серию реакций по активации ферментов, в которых зимогены плазмы последовательно активируются ограниченным протеолизом. Каскад коагуляции крови механистически разделяют на внутренние и внешние пути, которые сходятся при активации фактора X; последующая выработка тромбина происходит по единому общему пути (см. Схему 1). Полученные в настоящее время данные дают возможность предположить, что внутренний путь играет важную роль для поддержания и роста образования фибрина, в то время как внешний путь важен для фазы инициации коагуляции крови (Н.Cole, Aust. J. Med. Sci. 16 (1995) 87; G.J.Broze, Blood Coagulation and Fibrinolysis 6, Suppi. 1 (1995)S7). Принято считать, что коагуляция крови физически инициируется после образования комплекса фактор VIIa/тканевой фактор (TF). После образования данный комплекс быстро инициирует коагуляцию, активируя факторы IX и X. Получаемый в результате активированный фактор X, т.е. фактор Ха, затем образует при соотношении один к одному комплекс с фактором Va и фосфолипидами, образуя комплекс протромбиназы, который отвечает за превращение растворимого фибриногена в нерастворимый фибрин в результате активирования тромбина из его предшественника протромбина. Со временем, активность комплекса фактор VIIa/тканевой фактор (внешний путь) подавляется белком, ингибирующим протеазу типа Kunitz, TFPI, которая после образования комплекса с фактором Ха способна непосредственно ингибировать протеолитическую активность комплекса фактор VIIa/тканевый фактор. Для поддержания процесса коагуляции в присутствии ингибированной внешней системы в результате тромбин-опосредованной активности внутреннего пути продуцируется дополнительный фактор Ха. Таким образом, тромбин играет двойную автокаталитическую роль, опосредуя свое собственное продуцирование и превращение фибриногена в фибрин. Автокаталитическая природа выработки тромбина является важным препятствием для неконтролируемого кровотечения, гарантирующим, что при наличии определенного порогового уровня протромбиназы коагуляция крови будет протекать до завершения. Таким образом, в высшей степени желательной является разработка агентов, ингибирующих коагуляцию, без непосредственного ингибирования тромбина, но ингибируя другие стадии каскада коагуляции, такие как активность фактора VIIa.
Схема 1: Каскад коагуляции крови
Во многих случаях клинического применения существует необходимость предотвращения образования сгустков крови внутри сосудов или в каком-либо антикоагулянтном лечении. Например, почти у 50% пациентов, перенесших полную замену бедра, развивается тромбоз глубоких вен (DVT). Применяемые в настоящее время лекарственные препараты, такие как гепарин и его производные, не дают желаемого результата во многих специфических случаях клинического применения. Одобренные в настоящее время схемы лечения включают введение фиксированных доз гепарина с низкой молекулярной массой (LMWH), а также гепарина в различных дозах. Даже при таких режимах лечения у 10-20% пациентов развивается тромбоз глубоких вен, а у 5-10% возникают осложнения, связанные с кровотечением.
Другая клиническая ситуация, требующая применения лучших антикоагулянтов, включает пациентов, подвергаемых внутрипросветной коронарной ангиопластике, и людей с риском инфаркта миокарда или страдающих от нарастающей стенокардии. Обычно принятое в настоящее время лечение, включающее введение гепарина и аспирина, связано с резким слипанием 6-8% сосудов в течение 24 часов после процедуры. Уровень осложнений в виде кровотечения, требующий переливания крови в результате применения гепарина, также составляет приблизительно 7%. Более того, даже, несмотря на то, что отсроченное слипание является значительным, введение гепарина после окончания процедур оказывает слабое действие и может оказаться вредным.
Широко применяемые ингибиторы свертывания крови, такие как гепарин, а также родственные ему сульфатированные полисахариды, такие как LMWH и сульфат гепарина, оказывают препятствующее свертыванию крови действие, способствуя связыванию природного регулятора процесса свертывания, антитромбина III, с тромбином и фактором Ха. Ингибирующая активность гепарина направлена, прежде всего, на тромбин, который инактивируется приблизительно в 100 раз быстрее, чем фактор Ха. Гирудин и гирулог представляют собой два дополнительных тромбин-специфических антикоагулянта, проходящих в настоящее время клинические испытания. Однако данные антикоагулянты, ингибирующие тромбин, также связаны с осложняющими кровотечениями. Доклинические исследования на павианах и собаках показали, что нацеливание на ферменты, принимающие участие на более ранних стадиях каскада коагуляции, такие как фактор Ха или фактор VIIa, предотвращает образование сгустков крови, не вызывая в качестве побочного эффекта кровотечение, наблюдаемое при непосредственном применении ингибиторов тромбина (L.A.Harker et al., Thromb. Haemostas. 74 (1995) 464).
Специфическое ингибирование каталитического комплекса фактор "VIIa/тканевый фактор с применением моноклональных антител (ср. WO-A-92/06711) или белка, такого как инактивированный хлорметилкетоном фактор VIIa (ср. WO-A-96/12800 или WO-A-97/47651), является чрезвычайно эффективным средством контролирования образования тромбов, вызванного острым артериальным повреждением или тромботическими осложнениями, связанными с бактериальной септицемией. Существуют также экспериментальные данные, позволяющие предположить, что ингибирование активности комплекса фактор VIIa/тканевый фактор ингибирует рестеноз после баллонной ангиопластики (L.A.Harker et al., Haemostasis 26 (1996) S1:76). Проведенные на павианах исследования по кровотечению показали, что ингибирование комплекса фактор VIIa/тканевый фактор имеет самое широкое "окно безопасности" относительно терапевтической эффективности и риска кровотечения любого исследованного антикоагулянтного подхода, включая ингибирование тромбина, тромбоцитов и фактора Ха (L.A.Harker et al., Thromb. Haemostas. 74 (1995) 464).
Специфический ингибитор фактора VIIa, обладающий благоприятным профилем свойств, имеет существенную практическую значимость в практической медицине. В частности, ингибитор фактора VIIa эффективен в таких случаях, когда имеющиеся в настоящее время лекарственные препараты, такие как гепарин и родственные ему сульфатированные полисахариды, неэффективны или эффективны лишь частично. Некоторые ингибиторы фактора VIIa уже были описаны. ЕР-А-987274 описывает, например, содержащие трипептидную единицу соединения, ингибирующие фактор VIIa. Однако профиль свойств данных соединений все еще далек от идеального, поэтому сохраняется потребность в других, VIIa-специфических ингибиторах свертывания крови с низкой молекулярной массой, которые являются эффективными и не вызывают нежелательного побочного действия. Настоящее изобретение удовлетворяет данную потребность, предлагая новые производные мочевины или тиомочевины формулы I, ингибирующие активность фактора VIIa. Также были описаны другие производные (тио)мочевины, например, в US-A-5314902 (соответствующем WO-A-94/17041) и US-A-5703050 (соответствующем WO-A-94/2297), однако описанные соединения являются антагонистами рецепторов интегрина, таких как рецептор фибриногена GPIIb/IIIa.
Таким образом, предметом настоящего изобретения являются соединения формулы I
в которой
m равно 0, 1, 2, 3 или 4;
n равно 0, 1, 2 или 3;
А представляет галоген;
Х представляет серу или кислород;
R1 выбран из водорода, гидрокси, (C1-C12)-алкоксикарбонила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкоксикарбонила и (С6-С14)-арилоксикарбонила, в которых все арильные группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (C1-C12)-алкила, галогена или (C1-C12)-алкокси;
R2 выбран из водорода, (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, R20-(C1-C12)-алкила, R20-(C6-C14)-арила и R20-(C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, где R20 выбран из гидроксикарбонила, аминокарбонила, (C1-C12)-алкоксикарбонила и (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкоксикарбонила;
R3 выбран из водорода, циано, гидрокси и (C1-C12)-алкила;
R4 выбран из (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арила, (С6-С14)-арил-(C1-C4)-алкила, Het и Het-(C1-C4)-алкила, в которых алкил, арил и Het группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R5 выбран из водорода, (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арила, (С6-С14)-арил-(C1-C4)-алкила, Het, Het-(C1-C4)-алкила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкиламинокарбонила и Het-(C1-C4)-алкиламинокарбонила, в которых алкил, арил и Het группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
либо
R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют насыщенное или ненасыщенное 3-8-членное кольцо., которое представляет собой карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1, 2 или 3 одинаковых или различных кольцевых гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы, и которое может быть конденсировано до одной или двух насыщенных или ненасыщенных карбоциклических или гетероциклических кольцевых систем, содержащих от 5 до 10 кольцевых атомов, из которых 1, 2 или 3 могут представлять собой одинаковые или различные кольцевые гетероатомы, выбранные из азота, кислорода и серы, в которых получаемая R4(R5)С-группа незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R6 выбран из водорода, гидрокси, (C1-C8)-алкокси и (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкокси;
R10 выбран из (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, (C1-C8)-алкокси, (C1-C4)-алкокси-(С2-С4)-алкокси, (С6-С14)-арил-(C1-C4)-алкокси, (C6-C14)-арилокси, Het-окси, Het-(C1-C4)-алкокси, (C6-C14)-арила, Het, Het-(C1-C4)-алкила, трифторметокси, трифторметила, галогена, оксо, гидрокси, амино, (C1-C12)-алкилкарбониламино, аминокарбониламино, (C6-C14)-арилкарбониламино, Het-карбониламино, (С6-С14)-арил-(C1-C4)-алкилкарбониламино, Het-(C1-C4)-алкилкарбониламино, (C1-C8)-алкилкарбонила, (C6-C14)-арилкарбонила, (C1-C8)-алкиламинокарбонила, (C6-C14)-ариламинокарбонила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкиламинокарбонила, Het-аминокарбонила, Het-(C1-C4)-алкиламинокарбонила, аминокарбонила, (C1-C8)-алкоксикарбонила, гидроксикарбонила, циано, нитро, амидино, ацетимино, три-((C1-C4)-алкил)аммонио, (C1-C8)-алкиламино, ди-((C1-C8)-алкил) амино, гидроксикарбонилметокси, (C1-C8)-алкилсульфонила, (C6-C14)-арилсульфонила, (C1-C8)-алкиламиносульфонила, (C6-C14)-ариламиносульфонила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкиламиносульфонила, Het-аминосульфонила, Het-(C1-C4)-алкиламиносульфонила, (С1-C8)-алкилсульфониламино, (C6-C14)-арилсульфониламино, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкилсульфониламино, Het-сульфониламино и Het-(C1-C4)-алкилсульфониламино, в которых (C1-C12)-алкилкарбониламино, представляющий R10, незамещен или замещен в алкильной группе заместителем, выбранным из амино, гидрокси и (C1-C4)-алкокси, и в которых (C1-C12)-алкил и (C1-C8)-алкокси, представляющие R10, незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (C1-C8)-алкоксикарбонила, гидроксикарбонила и аминокарбонила,
в которых все арильные и Het группы в группе R10 незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми заместителями, выбранными из галогена, нитро, оксо, гидрокси, (C1-C8)-алкила, (C1-C8)-алкокси, (C1-C4)-алкокси-(С2-C4)-алкокси, (C6-C14)-арилокси, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкокси, Het-окси, Het-(C1-C4)-алкокси, (C6-C14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, Het, Het-(C1-C4)-алкила, трифторметила, циано, три-фторметокси, (C1-C8)-алкилсульфонила, (C1-C8)-алкоксикарбонила, гидроксикарбонила, аминокарбонила, амино, (C1-C8)-алкиламино, ди-((C1-C8)-алкил) амино, (C1-C8)-алкилкарбониламино, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкилкарбониламино, (C6-C14)-арилкарбониламино, Het-карбониламино, Het-(C1-C4)-алкилкарбониламино и (C1-C8)-алкилкарбонила, в которых (C1-C8)-алкил и (C1-C8)-алкокси, представляющие заместитель в арильной или Het группе в группе R10, незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (C1-C8)-алкоксикарбонила, гидроксикарбонила и аминокарбонила,
при условии, что когда заместитель R10 связан с алкильной группой, он не может представлять (C1-C8)-алкоксикарбонил, гидроксикарбонил, аминокарбонил, (C1-C8)-алкиламинокарбонил или (C1-C8)-алкиламиносульфонил, и что когда заместитель R10 связан с алкильной группой, он не может представлять (C1-C8)-алкил, замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (C1-C8)-алкоксикарбонила, гидроксикарбонила и аминокарбонила;
Het представляет остаток насыщенной или ненасыщенной, моноциклической или бициклической, 3-10-членной гетероциклической кольцевой системы, содержащей 1, 2 или 3 одинаковых или различных кольцевых гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы;
во всех стереоизомерных формах и их смесях в любом соотношении и его физиологически переносимые соли.
Каждая из групп, заместителей, остатков и т.д., которые могут встречаться несколько раз в соединениях формулы I, например, A, R10 или Het, независимо друг от друга может иметь указанные значения и в каждом случае может быть одинаковой или различной.
В данном описании термин "алкил" имеет самый широкий смысл и означает углеводородные остатки, которые могут быть линейными, т.е. неразветвленными, или разветвленными и которые могут представлять собой ациклические или циклические группы либо включать любое сочетание ациклических и циклических подгрупп. Далее, используемый в данном описании термин "алкил" включает насыщенные группы, а также ненасыщенные группы, содержащие одну и более, например одну, две или три, двойные и/или тройные связи, при условии, что двойные связи не расположены в циклической алкильной группе таким образом, чтобы образовывать ароматическую систему. Все данные определения также действительны, если алкильная группа встречается в качестве заместителя в другой группе или замещена, например, в алкоксигруппе (алкил-O), алкоксикарбонильной группе или арилалкильной группе. Примерами алкильных групп, содержащих 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 атомов углерода, являются метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецил, н-изомеры всех перечисленных групп, изопропил, изобутил, 1-метилбутил, изопентил, неопентил, 2,2-диметилбутил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, изогексил, втор-бутил, трет-бутил, трет-пентил, 2,3,4-триметилгексил, изодецил.
Ненасыщенными алкильными группами являются, например, алкенильные группы, такие как винил, 1-пропенил, 2-пропенил (аллил), 2-бутенил, 3-бутенил, 2-метил-2-бутенил, 3-метил-2-бутенил, 5-гексенил или 1,3-пентадиенил, либо алкинильные группы, такие как этинил, 1-пропинил, 2-пропинил (пропаргил) или 2-бутинил. Алкильные группы также могут быть ненасыщенными, когда они замещены.
Примерами циклических алкильных групп являются циклоалкильные группы, содержащие 3, 4, 5, 6, 7 или 8 кольцевых атомов углерода, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил, которые также могут быть замещенными и/или ненасыщенными. Ненасыщенные циклические алкильные группы и ненасыщенные циклоалкильные группы, такие как, например, циклопентил или циклогексил, могут быть связаны через любой атом углерода. Термин "алкил" в данном описании также относится к циклоалкилзамещенным алкильным группам, таким как циклопропилметил, циклобутилметил, циклопентилметил, циклогексилметил, циклогептилметил, 1-циклоропилэтил,
1-циклобутилэтил, 1-циклопентилэтил, 1-циклогексилэтил,
2-циклопропилэтил, 2-циклобутилэтил, 2-циклопентилэтил,
2-циклогексилэтил, 3-циклопропилпропил, 3-циклобутилпропил,
3-циклопентилпропил и т.д., в которых циклоалкильная подгруппа, а также ациклическая подгруппа могут быть ненасыщенными и/или замещенными.
Безусловно, циклическая алкильная группа должна содержать по меньшей мере три атома углерода, а ненасыщенная алкильная группа - по меньшей мере два атома углерода. Таким образом, подразумевается, что такая группа, как (C1-C8)-алкил, включает, среди прочих, насыщенные ациклические (C1-C8)-алкильные, (С3-C8)-циклоалкильные, циклоалкилалкильные группы, такие как (С3-С7)-циклоалкил-(C1-С3)-алкил, в которых общее количество атомов углерода может изменяться от 4 до 8, и ненасыщенный (С2-С8)-алкил, такой как (С3-С8)-алкенил или (С2-С8)-алкинил. Подобным образом подразумевается, что такая группа, как (C1-C4)-алкил, включает, среди прочих, насыщенный ациклический (C1-C4)-алкил, (С3-C4)-циклоалкил, циклопропилметил и ненасыщенный (С2-С4)-алкил, такой как (С2-С4)-алкенил или (С2-С4)-алкинил.
Если не указано иначе, в соответствии с одним из вариантов данного изобретения термин "алкил" относится к ациклическим, насыщенным углеводородным остаткам, которые имеют от одного до шести атомов углерода и могут быть линейными или разветвленными. (C1-C4)-алкильные группы образуют особую группу насыщенных, ациклических алкильных групп, таких как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил.
Приведенные выше определения относительно алкильных групп не касаются одновалентных остатков, но, соответственно, касаются двухвалентных и многовалентных остатков, таких как алкандиильные группы, алкиленовые группы или полиметиленовые группы, примерами которых являются метилен, 1,2-этилен (этан-1,2-диил), 1,1-этилен (1-метилметилен), 1-изобутилметилен, 1,3-пропилен, 2,2-диметил-1,3-пропилен, 1,4-бутилен, бут-2-ен-1,4-диил, 1,2-циклопропилен, 1,2-циклогексилен, 1,3-циклогексилен или 1,4-циклогексилен.
Примерами (C1-C4)-алкокси-(С2-С4)-алкоксигрупп являются
2-метоксиэтокси, 2-этоксиэтокси, 2-изопропоксиэтокси,
3-метоксипропокси или 4-этоксибутокси.
Термин "арил" относится к моноциклическому или полициклическому углеводородному остатку, в котором присутствует по меньшей мере одно карбоциклическое кольцо, имеющее конъюгированную pi-электронную систему, т.е. представляющее собой ароматическое кольцо, при этом остаток присоединен через углеродный атом, содержащийся в кольце, имеющем конъюгированную pi-электронную систему. В (С6-С14)-арильной группе присутствует от 6 до 14 атомов углерода. Примерами (С6-С14)-арильных групп являются фенил, нафтил, бифенил, флуоренил, антраценил, инденил, инданил, 1,2,3,4,5-тетрагидро-1Н-бензоциклогептенил. Примерами (С6-С10)-арильных групп являются фенил, нафтил, инденил, инданил или 1,2,3,4-тетрагидронафтил. Если не указано иначе и независимо от любых специфических заместителей, связанных с арильными группами, указанными в определении соединений формулы I, арильные группы, например фенил, нафтил или флуоренил, могут, в целом, быть незамещенными или замещенными одним или несколькими, например одним, двумя, тремя или четырьмя, одинаковыми или различными заместителями, например, перечисленными ниже заместителями.
Арильные группы могут быть связаны через любое желаемое положение в ароматическом кольце. В замещенных арильных группах заместители могут быть расположены в любом желаемом положении. В монозамещенных фенильных группах заместитель может быть расположен в положении 2, 3 или 4, при этом предпочтительными являются положения 3 и 4. В том случае, если фенильная группа несет два заместителя, они могут быть расположены в положении 2,3; 2,4; 2,5; 2,6; 3,4 или 3,5. В фенильных группах, несущих три заместителя, заместители могут быть расположены в положении 2,3,4; 2,3,5; 2,3,6; 2,4,5; 2,4,6 или 3,4,5. Нафтильными группами могут быть 1-нафтил (нафтален-1-ил) и 2-нафтил (нафтален-2-ил). В замещенных нафтильных группах заместители могут быть расположены в любых положениях, например, в монозамещенных 1-нафтильных группах - в положении 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8, а в монозамещенных 2-нафтильных группах - в положении 1, 3, 4, 5, 6, 7 или 8. Будучи присоединенным через атом углерода в ароматическом кольце и обозначенным термином "арил", 1,2,3,4-тетрагидронафтил может представлять собой 1,2,3,4-тетрагидронафтален-5-ил или 1,2,3,4-тетрагидронафтален-6-ил, Бифенилильные группы могут представлять собой бифенил-2-ил, бифенил-3-ил или бифенил-4-ил. Флуоренильные группы, обозначенные термином "алкил", могут быть связаны через положение 1, 2, 3 или 4 либо через положение 1, 2, 3, 4 или 9. В монозамещенных флуоренильных группах, связанных через положение 9, заместитель предпочтительно присутствует в положении 1, 2, 3 или 4.
Приведенные выше определения, касающиеся арильных групп, соответственно касаются двухвалентных и многовалентных групп, полученных из арильных групп, например ариленильных групп, таких как фенилен, который может быть незамещенным или замещенным 1,2-фениленом, 1,3-фениленом или 1,4-фениленом, либо нафтилен, который может быть незамещенным или замещенным 1,2-нафталиндиилом, 1,3-нафталиндиилом, 1,4-нафталиндиилом, 1,5-нафталиндиилом, 1,6-нафталиндиилом, 1,7-нафталиндииолом, 1,8-нафталиндиилом, 2,3-нафталиндиилом, 2,6-нафталиндиилом или 2,7-нафталиндиилом. Приведенные выше определения также соответственно касаются арильных подгрупп в арилалкильных группах. Примерами арилалкильных групп, которые также могут быть незамещенными или замещенными в арильных подгруппах, а также в алкильных подгруппах, являются бензил, 1-фенилэтил, 2-фенилэтил, 1-фенилпропил, 2-фенилпропил, 3-фенилпропил, 1-фенилбутил, 4-фенилбутил, 1-метил-З-фенилпропил, 1-нафтилметил, 2-нафтилметил, 1-(1-нафтил)этил, 1-(2-нафтил)этил, 2-(1-нафтил)этил, 2-(2-нафтил)этил или 9-флуоренилметил. Все приведенные выше пояснения также соответственно касаются ароматических колец, которые могут быть подвергнуты конденсации до кольца, образованного группами R4 и R5 и атомом углерода, к которому присоединены данные группы.
Het группа включает группы, содержащие 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 кольцевых атомов в "родительской" моноциклической или бициклической, гетероциклической кольцевой системе. В моноциклических Het группах гетероциклическое кольцо предпочтительно представляет собой 3-, 4-, 5-, 6- или 7-членное кольцо, особенно предпочтительно 5- или 6-членное кольцо. В бициклических Het группах предпочтительно присутствуют два конденсированных кольца, одним из которых является 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, а другим из которых является 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо. Т.е. Het бициклическое кольцо предпочтительно содержит 8, 9 или 10 кольцевых атомов, особенно предпочтительно 9 или 10 кольцевых атомов.
Het включает насыщенные, гетероциклические, кольцевые системы, не содержащие в кольце каких-либо двойных связей, а также ненасыщенные, гетероциклические, кольцевые системы, включающие мононенасыщенные и полиненасыщенные, гетероциклические, кольцевые системы, содержащие в кольце одну или несколько, например одну, две, три, четыре или пять, двойных связей, при условии, что получаемая система является устойчивой. Ненасыщенные кольца могут быть частично ненасыщенными или неароматическими, либо они могут быть ароматическими, т.е. двойные связи в кольцах в Het группе могут быть расположены таким образом, чтобы получилась конъюгированная, pi-электронная система. Ароматические кольца в Het группе могут быть 5- или 6-членными, т.е. ароматические группы в Het группе содержат от 5 до 10 кольцевых атомов. Таким образом, ароматические кольца в Het группе включают 5- и 6-членные, моноциклические, гетероциклические и бициклические гетероциклы, состоящие из двух 5-членных - колец, одного 5-членного кольца и одного 6-членного кольца либо двух 6-членных колец. В бициклических, ароматических группах в Het группе одно или оба кольца могут содержать гетероатомы. Ароматические Het группы могут быть также названы привычным термином "гетероарил", к которому соответственно относятся все приведенные выше и ниже определения и объяснения, касающиеся Het. Данные объяснения, касающиеся насыщения/ненасыщения в гетероциклической кольцевой системе, представляющей Het группу, соответственно относятся к любой другой гетероциклической, кольцевой системе, которая может присутствовать в соединении формулы I, например, к кольцу, образованному R4 и R5, с которым связаны данные группы, и кольцевым системам, которые могут быть конденсированы с образованием такого кольца.
В Het группе и любой другой гетероциклической группе предпочтительно присутствуют один или два одинаковых или различных кольцевых гетероатома, выбранных из атомов азота, кислорода и серы. В целом, кольцевые гетероатомы могут присутствовать в любом желательном сочетании и в любом желательном положении по отношению друг к другу при условии, что получаемая гетероциклическая система известна в данной области и применима в качестве подгруппы в лекарственном веществе. Примерами "родительских" структур гетероциклов, из которых может быть получена Het группа и другие гетероциклические группы, являются азиридин, оксиран, азетидин, пиррол, фуран, тиофен, диоксол, имидазол, пиразол, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, 1,2,3-триазол, 1,2,4-триазол, пириридин, пиран, тиопиран, пиридазин, пиримидин, пиразин, 1,4-диоксин, 1,2-оксазин, 1,3-оксазин, 1,4-оксазин, 1,2-тиазин, 1,3-тиазин, 1,4-тиазин, 1,2,3-триазин, 1,2,4-триазин, 1,3,5-триазин, азепин, 1,2-диазепин, 1,3-диазепин, 1,4-диазепин, индол, изоиндол, бензофуран, бензотиофен, 1,3-бензодиоксол, бензо[1,4]диоксин, 4Н-бензо[1,4]оксазин, индазол, бензимидазол, бензоксазол, бензотиазол, хинолин, изохинолин, хроман, изохроман, циннолин, хиназолин, хиноксалин, фталазин, пиридоимидазолы, пиридопиридины, пиридопиримидины и т.д., а также кольцевые системы, получаемые из перечисленных гетероциклов путем конденсирования карбоциклического кольца, например, бензо-, циклопента-, циклогекса- или циклогептаконденсированные производные данных гетероциклов.
Тот факт, что многие из перечисленных выше названий гетероциклов являются химическими названиями ненасыщенных или ароматических кольцевых систем, не подразумевает, что Het группы и другие гетероциклические группы могут быть получены только из соответствующей ненасыщенной кольцевой системы. Названия в данном описании служат только для описания кольцевой системы относительно размера колец, количества гетероатомов и их относительных положений. Как указано выше, Het группа может быть насыщенной или частично насыщенной либо ароматической, таким образом, она может быть получена не только из самих перечисленных выше гетероциклов, но также из всех их частично или полностью гидрированных аналогов и, по мере возможности, также из их более высоконенасыщенных аналогов. В качестве примеров полностью или частично гидрированных аналогов перечисленных выше гетероциклов, из которых может быть получена Het группа и любая другая гетероциклическая группа, могут быть приведены следующие аналоги: пирролин, пирролидин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, дигидропиридин, тетрагидропиридин, пиперидин, 1,3-диоксолан, 2-имидазолин, имидазолидин, 4,5-дигидро-1,3-оксазол, 1,3-оксазолидин, 4,5дигидро-1,3-тиазол, 1,3-тиазолидин, пергидро-1,4-диоксин (1,4-диоксан), пиперазин, пергидро-1,4-оксазин(морфолин), 2,3-дигидробензо[1,4]диоксин (1,4-бензодиоксан), 3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин, пергидро-1,4-тиазин(тиоморфолин), пергидроазепин, индолин, изоиндолин, 1,1, 3,4-тетрагидрохинолин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин и т.д.
Het группа и любая другая гетероциклическая группа может быть связана через любой кольцевой атом углерода, а при наличии азотных гетероциклов, по мере возможности, через любой подходящий кольцевой атом азота. Таким образом, например, пирролильная группа может представлять собой пиррол-1-ил, пиррол-2-ил или пиррол-3-ил, пирролидинильная группа может представлять собой пирролидин-1-ил (пирролидино), пирролидин-2-ил или пирролидин-3-ил, пиридинильная группа может представлять собой пиридин-2-ил, пиридин-3-ил или пидин-4-ил, пиперидинильная группа может представлять собой пиперидин-1-ил(пиперидино), пиперидин-2-ил, пиперидин-3-ил или пиперидин-4-ил. Фурил может представлять собой фуран-2-ил или фур-3-ил, тиенил может представлять собой тиофен-2-ил или тиофен-3-ил, имидазолил может представлять собой имидазол-1-ил, имидазол-2-ил, имидазол-4-ил или имидазол-5-ил, 1,3-оксазолил может представлять собой 1,3-оксазол-2-ил, 1,3-оксазол-4-ил или 1,3-оксазол-5-ил, 1,3-тиазолил может представлять собой 1,3-тиазол-2-ил, 1,3-тиазол-4-ил или 1,3-тиазол-5-ил, пиримидинил может представлять собой пиримидин-2-ил, пиримидин-4-ил(пиримидин-6-ил) или пиримидин-5-ил, пиперазинил может представлять собой пиперазин-1-ил(пиперазин-4-ил = пиперазино) или пиперазин-2-ил. Индолил может представлять собой индол-1-ил, индол-2-ил, индол-3-ил, индол-4-ил, индол-5-ил, индол-6-ил или индол-7-ил.
Подобным образом бензимидазолильные, бензоксазолильные и бензотиазолильные группы могут быть связаны через положение 2 и через любое из положений 4, 5, 6 и 7, а при наличии бензимидазолила также через положение 1. Хинолинил может представлять собой хинолин-2-ил, хинолин-3-ил, хинолин-4-ил, хинолин-5-ил, хинолин-6-ил, хинолин-7-ил или хинолин-8-ил, изохинолил может представлять собой изохинолин-1-ил, изохинолин-3-ил, изохинолил-4-ил, изохинолин-5-ил, изохинолин-6-ил, изохинолин-7-ил или изохинолин-8-ил. Помимо связывания через любые из позиций, указанных для хинолинила и изохинолинила, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил также могут быть связаны через атомы азота в положениях 1 и 2 соответственно.
Если не указано иначе и независимо от любых конкретных заместителей в арильных группах, Het группы или любые иные гетероциклические группы, указанные в определении соединений формулы I, арильные группы, Het группы и другие гетероциклические группы могут быть незамещены или замещены на кольцевом атоме углерода одним или несколькими, например одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью, одинаковыми или различными заместителями, такими как (C1-C4)-алкил, (C1-C4)-алкокси, (C1-C4)-алкилтио, галоген, нитро, амино, (C1-C4)-алкиламино, ди-((C1-C4)-алкил)амино, ((C1-C4)-алкил)карбониламино, таким как, например, ацетиламино, трифторметил, трифторметокси, гидрокси, оксо, гидроксиметил, метилендиокси, этилендиокси, формил, ацетил, циано, метилсульфонил, необязательно замещенный фенил, необязательно замещенный фенокси, бензил, необязательно замещенный в фенильной группе, бензилокси, необязательно замещенный в фенильной группе и т.д. Заместители могут занимать любое желательное положение при условии получения стабильной молекулы. Конечно, заместитель оксо(=О) может отсутствовать в ароматическом кольце, но может присутствовать в том случае, если Het группа или любая другая гетероциклическая или карбоциклическая группа насыщена или частично ненасыщена. Примерами оксозамещенных гетероциклических групп являются 4Н-бензо[1,4]оксазин-3-он, 3Н-изобензофуран-1-он, бензо[1,4]диоксин-2-он, хроман-2-он и т.д. Примерами группы Het-окси, т.е. группы Het-O-, являются пиридинилокси, включая пиридин-3-илокси и пиридин-4-илокси, пиримидинилокси, включая пиримидин-2-илокси, пиперидинилокси, включая пиперидин-3-илокси и пиперидин-4-илокси, или пирролидин-3-илокси. В соединениях формулы I предпочтительно присутствует не более двух нитрогрупп.
Далее, если не указано иначе и независимо от любых конкретных заместителей в Het группах или каких-либо иных гетероциклических группах, указанных в определении формулы I, Het группы независимо друг от друга могут быть замещены в каждом подходящем кольцевом атоме азота, т.е. иметь атом водорода, либо быть замещены, например, (C1-C8)-алкилом, например (C1-C4)-алкилом, таким как метил или этил, необязательно замещенным фенилом, фенил-(C1-C4)-алкилом, например бензилом, необязательно замещенным в фенильной группе, гидрокси-(С2-С4)-алкилом, таким как, например, 2-гидроксиэтил, ацетил или другая ацилгрупла, метилсульфонилом или другой сульфонильной группой и т.д. Другой группой, которая может служить заместителем на подходящем кольцевом атоме азота, является ацетиминогруппа СН3-С(=NH)-. Подходящие гетероциклы, содержащие азот, также могут присутствовать в виде N-оксидов или в виде четвертичных солей. Кольцевые атомы серы могут быть окислены до сульфоксида или до сульфона. Таким образом, например, тетрагидротиенильный остаток может присутствовать в виде S,S-диоксотетрагидротиенильного остатка или тиоморфолинильного остатка, подобного тиоморфолин-4-илу, может присутствовать в виде 1-оксотиоморфолин-4-ила или 1,1-диоксотиоморфолин-4-ила.
Объяснения, касающиеся Het группы, соответственно относятся к двухвалентным и многовалентным Het группам, включая двухвалентные и многовалентные гетероароматические группы, которые могут быть связаны через любые кольцевые атомы углерода, а при наличии гетероциклов, содержащих азот, через любые атомы углерода и любые подходящие кольцевые атомы азота либо через любые подходящие кольцевые атомы азота. Например, пиридиндиильная группа может представлять собой пиридин-2,3-диил, пиридин-2,4-диил, пиридин-2,5-диил, пиридин-2,6-диил, пиридин-3,4-диил или пиридин-3,5-диил, пиперидиндиильная группа может представлять собой, среди прочих, пиперидин-1,2-диил, пиперидин-1,3-диил, пиперидин-1,4-диил, пиперидин-2,3-диил, пиперидин-2,4-диил или пиперидин-3,5-диил, пиперазиндиильная группа может представлять собой, среди прочих, пиперазин 1,3-диил, пиперазин-1,4-диил, пиперазин-2,3-диил, пиперазин-2,5-диил и т.д. Приведенные выше определения также соответственно касаются Het подгруппы в Het-алкильных группах. Примерами таких Het-алкильных групп, которые также могут быть незамещенными или замещенными в Het подгруппе, а также в алкильной подгруппе, являются (пиридин-2-ил)метил, (пиридин-3-ил)метил, (пиридин-4-ил)метил, 2-(пиридин-2-ил)этил, 2-(пиридин-3-ил)этил или 2-(пиридин-4-ил)этил.
Галоген представляет собой фтор, хлор, фтор или йод, предпочтительно фтор, хлор или бром.
Оптически активные атомы углерода, присутствующие в соединениях формулы I, независимо друг от друга могут иметь R- или S-конфигурацию. Соединения формулы I могут присутствовать в виде чистых энантиомеров или чистых диастереомеров либо в виде смесей энантиомеров и/или диастереомеров, например, в виде рацематов. Настоящее изобретение включает чистые энантиомеры и смеси энантиомеров, а также чистые диастереомеры и смеси диастереомеров. Данное изобретение включает смеси двух и более стереоизомеров формулы I, оно также включает все соотношения стереоизомеров в смесях. В том случае, когда соединения формулы I присутствуют в виде Е- или Z-изомеров (либо цис- или трансизомеров), данное изобретение включает как чистые Е-изомеры, так и чистые Z-изомеры, а также смеси E/Z во всех соотношениях. Данное изобретение также включает все таутомерные формы соединений формулы I, например форму, в которой вместо группы R1-NH-C(=NH)-, указанной в формуле I, присутствует таутомерная группа R1-N=C(-NH2)-.
Диастереоизомеры, включая изомеры E/Z, могут быть разделены на отдельные изомеры, например, хроматографией. Рацематы могут быть разделены на два энантиомера обычными способами, например хроматографией на хиральных фазах, либо разделением, например кристаллизацией диастереомерных солей, полученных с оптически активными кислотами или основаниями. Стереохимически однородные соединения формулы I также могут быть получены с применением стереохимически однородных исходных материалов либо с использованием стереоселективных реакций.
Выбор введения в соединение формулы I элементарного звена, имеющего R- или S-конфигурацию, либо, при наличии в соединении формулы I аминокислоты, введения элементарного звена, обозначенного как D- или L-аминокислота, может зависеть, например, от желаемых характеристик соединения формулы I. Например, введение элементарного звена L-аминокислоты может придать повышенную устойчивость in vitro или in vivo. Введение элементарного звена D-аминокислоты также может обеспечивать желаемое снижение или повышение фармакологической активности соединения. В некоторых случаях может возникнуть необходимость сохранения активности соединения всего лишь на короткий период времени. В таких случаях введение элементарного звена D-аминокислоты в соединение может вызвать образование эндогенных пептидаз в организме пациента для того, чтобы гидролизовать соединение in vivo, тем самым ограничивая воздействие активного соединения на пациента. Подобный эффект также можно наблюдать в соединениях в соответствии с данным изобретением, изменяя конфигурацию в другом элементарном звене с S-конфигурации на R-конфигурацию либо наоборот. Учитывая медицинские показания, специалист в данной области может определить желаемые характеристики, например благоприятную стереохимию нужного соединения в соответствии с данным изобретением.
Физиологически переносимые соли соединений формулы I представляют собой нетоксичные, физиологически приемлемые соли, в частности фармацевтически применимые соли. Такие соли соединений формулы I, содержащие кислотные группы, например карбоксильную группу СООН, включают, например, соли щелочных или щелочноземельных металлов, такие как соли натрия, калия, магния и кальция, а также соли с физиологически переносимыми четвертичными ионами аммония, такими как тетраметиламмоний или тетраэтиламмоний, и кислотно-аддитивные соли с аммиаком и физиологически переносимыми органическими аминами, такими как метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, триэтиламин, этаноламин или трис-(2-гидроксиэтил)амин. Основные группы, содержащиеся в соединениях формулы I, например амино или амидиногруппы, образуют кислотно-аддитивные соли, например, с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, азотная или фосфорная кислота, либо с органическими карбоновыми кислотами и сульфоновыми кислотами, такими как муравьиная, уксусная, щавелевая, лимонная, молочная, яблочная, янтарная, малоновая, бензойная, малеиновая, фумаровая, винная, метансульфоновая или п-толуолсульфоновая кислота.
Настоящее изобретение также включает кислотно-аддитивные соли соединений формулы I, содержащих, например, две основные группы с одним эквивалентом кислоты или с двумя эквивалентами кислоты.
Соли соединений формулы I могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области, например, реакцией соединения формулы I с неорганической или органической кислотой либо основанием в растворителе или разбавителе, либо из других солей путем катионного или анионного обмена. Настоящее изобретение также включает все соли соединений формулы I, которые из-за низкой физиологической переносимости как таковые не подходят для использования в фармацевтических препаратах, но подходят, например, в качестве промежуточных соединений для осуществления дополнительных химических модификаций соединений формулы I либо в качестве исходных веществ для получения физиологически переносимых солей.
Анионы перечисленных кислот, которые могут присутствовать в кислотно-аддитивных солях соединений формулы I, также являются примерами анионов, которые могут присутствовать в соединениях формулы I, если они содержат одну или несколько положительно заряженных групп, таких как заместители триалкиламмония, т.е. групп формулы (алкил)3N+, связанных через положительно заряженный атом азота, которые могут представлять R10, либо кватернизированные, кольцевые атомы азота в гетероциклических группах. В целом, соединение формулы I содержит один или несколько физиологически переносимых анионов или анионных эквивалентов в качестве противоионов, если оно содержит одно или несколько постоянно положительно заряженных групп, таких как триалкиламмониевая группа.
Соединения формулы I, которые одновременно содержат основную группу или положительно заряженную группу и кислотную группу, например амидиногруппу и карбоксигруппу, могут также присутствовать в виде цвиттерионов (либо бетаинов или внутренних солей), которые также входят в объем настоящего изобретения.
Настоящее изобретение также включает все сольваты соединений формулы I, например гидраты или аддукты со спиртами. Данное изобретение также включает производные и модификации соединений формулы I, например защищенные формы, пролекарства, т.е. соединения, которые in vitro необязательно проявляют фармакологическую активность, но которые in vivo превращаются в активные соединения, и другие физиологически переносимые производные, включая сложные эфиры и амиды кислотных групп, а также активные метаболиты соединений формулы I.
Структурные элементы в соединениях формулы I имеют следующие предпочтительные обозначения, которые они могут иметь независимо от обозначений других элементов.
Число m, т.е. количество атомов галогена, присутствующих в качестве заместителей в фениленовой группе в формуле I, предпочтительно равно 0, 1 или 2, более предпочтительно 0 или 1, особенно предпочтительно 0. Те положения фениленовой группы в формуле I, которые не имеют заместителя А, имеют атомы водорода. Таким образом, если m равно нулю и, соответственно, заместитель А отсутствует, то указанная фениленовая группа имеет четыре атома водорода. Если присутствуют 1, 2, 3 или 4 заместителя А, то указанная фениленовая группа имеет 3, 2, 1 или 0 атомов водорода соответственно.
Число n, т.е. количество групп СН2 в полиметиленовой цепи, связывающей азот амидогруппы C(=O)-NH в формуле I, и группу -CR3R4R5, предпочтительно равно 0 или 1, более предпочтительно 0. Таким образом, группа -(СН2)n- предпочтительно представляет собой прямую связь группы -СН2-. Более предпочтительно, группа -(СН2)n-представляет собой прямую связь, т.е. атом азота амидогруппы -C(=O)-NH- непосредственно связан с группой -CR3R4R5.
Заместители А, которые, в целом, могут быть одинаковыми или различными, предпочтительно выбраны из фтора, хлора и брома, более предпочтительно из фтора и хлора. Как указано выше относительно арильных групп и фенильных групп в целом, заместители А могут присутствовать в любом желаемом положении в фенильном кольце, с которым они связаны. Если присутствует только один заместитель А, он может быть расположен в положении 2 или 3 относительно группы (тио)мочевины, если присутствуют два заместителя А, они могут быть расположены в положениях 2,3, 2,5, 2,6 и 3,5 относительно группы (тио)мочевины.
X предпочтительно представляет кислород.
R1 предпочтительно представляет водород, гидрокси или (C1-C12)-алкоксикарбонил, более предпочтительно водород, гидрокси или (C1-C4)-алкоксикарбонил, более предпочтительно водород или гидрокси и наиболее предпочтительно водород.
Если арильная группа, присутствующая в группе R1, замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (C1-C12)-алкила, галогена и (C1-C12)-алкокси, то она предпочтительно замещена 1, 2 или 3, более предпочтительно 1 или 2, одинаковыми или различными заместителями, особенно предпочтительно одним заместителем. Алкильная группа или алкоксигруппа, присутствующая в группе R1, предпочтительно представляет собой (C1-C4)-алкильную группу или (C1-C4)-алкоксигруппу соответственно.
R2 предпочтительно выбран из водорода, (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арила и (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, более предпочтительно из водорода, (C1-C8)алкила, (C6-C10)-арила и (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкила. Особенно предпочтительно R2 представляет водород.
R3 предпочтительно представляет водород.
Если группа R4 или R5 либо циклическая группа, образованная R4 и R5 вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, замещена одним или несколькими заместителями R10, то она может иметь, например, 1, 2, 3, 4 или 5 одинаковых или различных заместителей R10, предпочтительно 1, 2, 3 или 4, более предпочтительно 1, 2 или 3, особенно предпочтительно 1 или 2, одинаковых или различных заместителей R10.
R4 предпочтительно выбран из (C1-C8)-алкила, (C6-C10)-арила, (С6-С10)-арила-(C1-C4)-алкила, Het и Het-(C1-C4)-алкила, в которых алкильная, арильная и Het группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10. Более предпочтительно, R4 представляет (С6-С10)-арил или Het, особенно предпочтительно (С6-С10)-арил, например фенил, где арильная, Het и фенильная группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10.
R5 предпочтительно выбран из водорода, (C1-C12)-алкила, (С6-С14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, Het и Het-(C1-C4)-алкила, более предпочтительно из водорода, (C1-C8)-алкила, (С6-С10)-арила, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкила, Het и Het-(C1-C4)-алкила, в частности, предпочтительно из водорода, (C1-C8)-алкила, (C6-C10)-арила и (C6-C10)-арил-(C1-C4)-алкила, особенно предпочтительно из водорода, (C1-C4)-алкила и фенила, в частности, особенно предпочтительно из (C1-C4)-алкила и фенила, например из метила, этила и фенила, в которых алкильная, арильная, фенильная и Het группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10. Еще более предпочтительно, R5 представляет (C1-C4)-алкил, например метил или этил.
Насыщенное или ненасыщенное, карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, которое может быть образовано R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, может содержать 3, 4, 5, 6, 7 или 8 кольцевых атомов. Такое кольцо предпочтительно является насыщенным или ненасыщенным, 5- или 6-членным, карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Одно- или двухкольцевые системы, которые могут быть конденсированы до связывания с кольцом, образованным R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, предпочтительно являются одинаковыми или различными моноциклическими или бициклическими, насыщенными или ненасыщенными кольцевыми системами, состоящими из 5- и 6-членных колец. Более предпочтительно, кольца, конденсированные с кольцом, образованным R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, являются одинаковыми или различными карбоциклическими или гетероциклическими, ароматическими кольцевыми системами, особенно предпочтительно ароматическими кольцевыми системами, выбранными из бензола и нафталина. Особенно предпочтительным ароматическим кольцом, которое может быть конденсировано с кольцом, образованным R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, является бензольное кольцо. Примерами кольцевых систем, образованных R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, являются циклопропан, циклопентан, циклогексан, циклогептан, тетрагидрофуран, татрагидропиран, пирролидин, пиперидин, пергидроазепин, индан, инден, дигидронафталин, тетрагидронафталин, октагидронафталин, декагидронафталин, флуорен, бензоиндан, аценафтен, 9,10-дигидроантрацен, хроман, хромен, изохроман, тетрагидрохинолин, тетрагидроизохинолин и т.д., каждый из которых может быть незамещенным или замещенным одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10.
R6 предпочтительно представляет водород или гидрокси, более предпочтительно водород.
В одном из вариантов осуществления данного изобретения арильная группа или Het группа, в частности арильная группа, представляющая R4 или R5 либо присутствующая в арильной или Het-части арилалкильной или Het-алкильной группы, представляющей R4 или R5, в частности, такая группа представляет R4, замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10. В соответствии с указанным вариантом осуществления данного изобретения подгруппа соединений образована соединениями, в которых заместитель R10 или заместители R10 в арильных группах или Het группах, представляющих R4 или R5 или присутствующих в арильной или Het-части арилалкильной или Het-алкильной группы, представляющей R4 или R5, выбраны из галогена, в частности фтора, хлора и брома, (C1-C6)-алкила, (C1-C8)-алкокси, (C6-C10)-арилокси и (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкокси, в которых каждая из арильных групп в группе R10 незамещена или замещена, как описано выше. Другая подгруппа соединений в соответствии с указанным вариантом осуществления данного изобретения образована соединениями, в которых в арильных группах или Het группах, представляющих R4 или R5 либо присутствующих в арильной или Het-части арилалкильной или Het-алкильной группы, представляющей R4 или R5, присутствует один заместитель R10, выбранный из (C1-C8)-алкилкарбониламино, (С6-С10)-арилкарбониламино, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкилкарбониламино, Het-карбониламино, Het-(C1-C4)-алкилкарбониламино, (C1-C8)-алкиламинокарбонил, (С6-С10)-ариламинокарбонил, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкиламинокарбонил, Het-аминокарбонил, Het-(C1-C4)-алкиламинокарбонил, (C1-C8)-алкиламиносульфонил, (С6-С10)-ариламиносульфонил, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкиламиносульфонил, Het-аминосульфонил, Het-(C1-C4)-алкиламиносульфонил, (C1-C8)-алкилсульфониламино, (С6-С10)-арилсульфониламино, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкилсульфониламино, Het-сульфониламино и Het-(C1-C4)-алкилсульфониламино, а также отсутствуют либо присутствуют один или два одинаковых или различных заместителей R10, которые выбраны из галогена, в частности фтора, хлора и брома, (C1-C8)-алкила, (C1-C8)-алкокси, (С6-С10)-арилокси и (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкокси, в которых каждая из арильных и Het групп в группе R10 незамещена или замещена, как указано выше. Дополнительные подгруппы соединений в соответствии с указанным вариантом данного изобретения образованы соединениями, в которых в арильных группах или Het группах, представляющих R4 или R5 либо присутствующих в арильной или Het части арилалкильной или Het-алкильной группы, представляющей R4 или R5, присутствует один заместитель R10, выбранный из (C1-C8)-алкилкарбониламино, (С6-С10)-арилкарбониламино, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкилкарбониламино, Het-карбониламино и Het-(C1-C4)-алкилкарбониламино, либо из (C1-C8)-алкиламинокарбонила, (С6-С10)-ариламинокарбонила, (C6-C10)-арил-(C1-C4)-алкиламинокарбонила, Het-аминокарбонила и Het-(C1-C4)-алкиламинокарбонила, либо из (C1-C8)-алкиламиносульфонила, (С6-С10)-ариламиносульфонила, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкиламиносульфонила, Het-аминосульфонила и Het-(C1-C4)-алкиламиносульфонила, либо из (C1-C8)-алкилсульфониламино, (С6-С10)-арилсульфониламино, (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкилсульфониламино, Het-сульфониламино и Het-(C1-C4)-алкилсульфониламино, при этом в каждом из указанных случаев нуля отсутствует либо присутствует один или два одинаковых или различных заместителя R10, выбранных из галогена, в частности фтора, хлора и брома, (C1-C8)-алкила, (C1-C8)-алкокси, (C6-C10)-арилокси и (С6-С10)-арил-(C1-C4)-алкокси, в которых каждая из арильных и Het групп в группе R10 незамещена или замещена, как указано выше.
Предпочтительными соединениями формулы I являются такие соединения, в которых одна или несколько групп имеют предпочтительные значения либо имеют одно или несколько конкретных обозначений, указанных в их соответствующих определениях либо в общих обозначениях по соответствующим группам, при этом все сочетания таких предпочтительных значений и конкретных обозначений составляют предмет настоящего изобретения. Все предпочтительные соединения формулы I также составляют предмет настоящего изобретения во всех стереоизомерных формах и их смесях в любом соотношении, а также в виде их физиологически переносимых солей. Например, группа предпочтительных соединений образована соединениями формулы I, в которых
n равно 0;
R3 представляет водород;
R5 представляет метил, этил или фенил, в которых фенильная группа незамещена либо замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10; a
m, А, X, R1, R2, R4, R6 и R10 имеют значения, указанные в их общих или предпочтительных определениях, во всех стереоизомерных формах и их смесях в любом соотношении, а также их физиологически переносимые соли.
Группа более предпочтительных соединений образована соединениями формулы I, в которых
n равно 0;
m равно 0 или 1;
R2 представляет водород;
R3 представляет водород;
R5 представляет метил, этил или фенил, в которых фенильная группа незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R6 представляет водород или гидрокси;
Х представляет кислород; а
A, R1, R4 и R10 имеют значения, указанные в их общих или предпочтительных определениях, во всех стереоизомерных формах и их смесях в любом соотношении, а также их физиологически переносимые соли.
Подгруппа соединений в соответствии с данным изобретением образована соединениями формулы I, в которых
m равно 0, 1, 2, 3 или 4;
n равно 0, 1, 2 или 3;
А представляет галоген;
Х представляет серу или кислород;
R1 выбран из водорода, гидрокси, (C1-C12)-алкоксикарбонила, (С6-С14)-арил-(C1-C4)-алкоксикарбонила и (C6-C14)-арилоксикарбонила, в которых каждая из арильных групп незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (C1-C12)-алкила, галогена и (C1-C12)-алкокси;
R2 выбран из водорода, (C1-C12)-алкила, (С6-С14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, R20- (C1-C12)-алкила, R20- (C6-C14)-арила и R20-(C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, в которых R20 выбран из гидроксикарбонила, (C1-C12)-алкоксикарбонила и (С6-С14)-арил-(C1-C4)-алкоксикарбонила;
R3 выбран из водорода, циано, гидрокси и (C1-C12)-алкила;
R4 выбран из (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, Het и Het-(C1-C4)-алкила, в которых алкильная, арильная и Het группы незамещены либо замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R5 выбран из водорода, (C1-C12)-алкила, (C6-C14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, Het, Het-(C1-C4)-алкила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкиламинокарбонила и Het-(C1-C4)-алкиламинокарбонила, в которых алкильная, арильная и Het группы незамещены либо замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
либо
R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют насыщенное или ненасыщенное 3-8-членное кольцо, которое представляет собой карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, содержащее 1, 2 или 3 одинаковых или различных кольцевых гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы, и которое может быть конденсировано до одной или двух насыщенных или ненасыщенных, карбоциклических или гетероциклических кольцевых систем, содержащих 5-10 кольцевых атомов, из которых 1, 2 или 3 могут быть одинаковыми или различными кольцевыми гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы, в которых получаемая группа R4(R5)C незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R6 выбран из водорода, гидрокси, (C1-C8)-алкокси и (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкокси;
R10 выбран из (С1-С12)-алкила, фенил-(C1-C4)-алкила, (C1-C8)-алкокси, фенил-(C1-C4)-алкокси, фенокси, фенила, Het, трифторметокси, трифторметила, галогена, оксо, гидрокси, амино, (C1-C12)-алкилкарбониламино, (C1-C8)-алкилкарбонила, циано, нитро, амидино, ацетимино, три-((C1-C4)-алкил)аммонио, (C1-C8)-алкиламино, ди-((C1-C8)-алкил) амино, гидроксикарбонилметокси, (C1-C8)-алкилсульфонила, (C1-C8)-алкилсульфониламино, фенилсульфониламино и фенилсульфонила, в которых группа Het и каждая из фенильных групп, содержащихся в R10, незамещена либо замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из галогена, нитро, оксо, гидрокси, (C1-C8)-алкила, (C1-C8)-алкокси, трифторметила, циано, трифторметокси, (C1-C8)-алкилсульфонила, амино, (C1-C8)-алкиламино, ди-((C1-C8)-алкил)амино), (C1-C8)-алкилкарбониламино и (C1-C8)-алкилкарбонила;
Het представляет собой остаток насыщенной или ненасыщенной, моноциклической или бициклической, 3-10-членной, гетероциклической кольцевой системы, содержащей 1, 2 или 3 одинаковых или различных кольцевых гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы;
во всех стереоизомерных формах и их смесях в любом соотношении, а также их физиологически переносимые соли.
Далее, предпочтительные соединения формулы I представляют собой соединения, в которых хиральные центры независимо друг от друга присутствуют в однородной или по существу однородной конфигурации.
Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений формулы I. Соединения формулы I в общем могут быть получены связыванием двух и более фрагментов (или структурных звеньев), которые могут быть получены ретросинтетическим способом из соединений формулы I. При получении соединений формулы I в ходе синтеза в целом может оказаться целесообразным или необходимым введение функциональных групп, которые могут вызвать на стадии синтеза нежелательные или побочные реакции в виде предшественников, которые затем превращаются в желаемые функциональные группы. В качестве примеров групп-предшественников могут быть приведены цианогруппы, которые затем могут быть превращены в амидиногруппы, либо нитрогруппы, которые могут быть превращены в аминогруппы. Защитные группы (или блокирующие группы), которые могут присутствовать в функциональных группах, включают аллил, трет-бутил, бензил, аллилоксикарбонил (Alloc), трет-бутоксикарбонил (Вос), бензилоксикарбонил (Z) и 9-флуоренилметоксикарбонил (Fmoc) в качестве защитных групп для гидроксигруппы, группы карбоновой кислоты, амино и амидиногрупп.
В частности, при получении соединений формулы I структурные звенья могут быть связаны в результате осуществления одной или нескольких реакций конденсации и/или реакций присоединения, таких как сочетание амидов и образование (тио)мочевины, т.е. в результате образования амидной связи между группой карбоновой кислоты одного структурного звена и аминогруппой другого структурного звена, либо в результате образования такой связи, как (тио)мочевина, между двумя аминогруппами двух структурных звеньев. Например, соединения формулы I могут быть получены связыванием структурных звеньев формул II, III и IV
в результате образования способом, известным per se, мостика (тио)мочевины между группой G1 в формуле II, и группой G2 в формуле III, а также путем образования способом, известным per se, амидной связи между производной группой карбоновой кислоты COZ, изображенной на формуле III, и группой NH2 в формуле IV.
В соединениях формул II, III и IV группы и m, n, A, R2, R3, R4 и R5 такие же, как указано выше. R0 представляет амидиногруппу R1NH-C(=NH)-, в которой R1 имеет указанные выше значения, или его защищенную форму, или его группу-предшественник, например цианогруппу, которую затем превращают в группу R1-NHC(=NH)-, присутствующую в конечном соединении формулы I. В целом, помимо приведенных выше обозначений групп и заместителей, в соединениях формул II, III и IV функциональные группы также могут присутствовать в виде групп-предшественников, которые затем превращают в группы, присутствующие в соединениях формулы I, либо могут присутствовать в защищенном виде.
Одна из групп G1 и G2 представляет собой свободную аминогруппу, т.е. группу NH2 при наличии G1, и группу NHR6 при наличии G2, а другая представляет собой аминогруппу, подходящим образом функционализированную для образования мостика (тио)мочевины либо превращенную в такую функционализированную группу, например (C1-C6)-алкоксикарбониламиногруппу или трихлорметилкарбониламиногруппу, или азолил-N-(тио)карбонил аминогруппу, такую как имидазол-1-ил(тио)карбониламиногруппа, в которой функционализированная группа G2 содержит группу R6 или защищенную форму, или группу-предшественник группы R6. Группа Z в соединениях формулы III представляет собой гидрокси или нуклеофильнозаместимую уходящую группу, т.е. группа COZ в соединениях формулы III представляет собой группу СООН карбоновой кислоты или активированное производное карбоновой кислоты, такое как, например, хлорангидрид кислоты, сложный эфир, такой как сложный (C1-C4)-алкиловый эфир или активированный сложный эфир, или смешанный ангидрид.
Исходные соединения формул II, III и IV, а также другие соединения, используемые при синтезе соединений формулы I для введения определенных структурных единиц, коммерчески доступны или могут быть легко получены из коммерчески доступных соединений описываемыми ниже или в литературе способами, легко доступными специалистам в данной области.
Для получения соединений формулы I вначале соединения формул II и III могут быть связаны, а полученный промежуточный продукт затем может быть подвергнут конденсации с соединением формулы IV для получения соединения формулы I. Итак, вначале соединения формул III и IV могут быть подвергнуты конденсации, а затем полученный промежуточный продукт может быть связан с соединением формулы II с получением соединения формулы I. После любой из указанных стадий реакции в ходе таких синтезов могут быть осуществлены стадии защиты и снятия защиты и превращения групп-предшественников в желаемые конечные группы, а также дальнейшие модификации.
Мостик (тио)мочевины между структурными звеньями соединений формул II и III может быть создан, например, вначале превращением в соединении формулы II аминогруппы (группа NH2), представляющей G1, в функционализированную аминогруппу, такую как изо(тио)цианатогруппа, с использованием эквивалента (тио)фосгена или фосгена, подобного трифосгену, либо (C1-C6)-алкоксикарбониламиногруппу с использованием (C1-C6)-алкилхлорформиата, такого как этилхлорформиат или изобутилхлорформиат, либо имидазол-1-ил(тио)карбониламиногруппу с использованием N, N'-(тио)карбонилдиимидазола, либо трихлорметилкарбониламиногруппу с использованием трихлорацетилхлорида. Полученное промежуточное соединение затем подвергают взаимодействию с соединением формулы III, в котором G2 представляет свободную группу NHR6, которая к изо(тио)цианатогруппе добавляет или замещает имидазолильную группу, алкоксигруппу или трихлорметильную группу соответственно. Альтернативно, вначале в соединении формулы III аминогруппа (группа NHR6), представляющая G2, может быть функционализирована с получением изо(тио)цианатогруппы, (C1-C6)-алкоксикарбониламиногруппы, имидазол-1-ил(тио)карбонильной группы или трихлорметилкарбониламиногруппы, а затем полученное промежуточное соединение подвергнуто взаимодействию с соединением формулы II, в котором G1 представляет свободную группу NH2. Превращение аминогруппы в изо(тио)цианатогруппу, (C1-C6)-алкоксикарбониламиногруппу, имидазол-1-ил(тио)карбонильную группу или трихлометилкарбониламиногруппу, а также последующее взаимодействие промежуточного соединения с амином могут быть осуществлены в соответствии с известными способами, хорошо известными специалистам в данной области.
Различные общие способы образования амидной связи, которые могут быть использованы при синтезе соединений формулы I, хорошо известны специалистам в данной области, например, из химии пептидов. Стадия сочетания амида может быть успешно осуществлена с использованием свободной карбоновой кислоты, т.е. соединения формулы III или промежуточного продукта сочетания, в котором группа, такая как COZ, подвергаемая взаимодействию на данной стадии, представляет собой группу СООН, активированием указанной группы карбоновой кислоты, предпочтительно in situ, с помощью обычного реагента сочетания, такого как карбодиимид, подобный дициклогексилкарбодиимиду (DCC) или диизопропилкарбодиимиду (DIC), либо N,N'-карбонилдиазол, подобный N,N'-карбонилдиимидазолу, либо соль урония, подобная тетрафторборату О-((циано)этоксикарбонил)метилен)амино)-1,1,3,3-тетраметилурония (TOTU) или гексафторфосфату О-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (HATU), либо сложный эфир хлоругольной кислоты, подобный этилхлорформиату или изобутилхлорформиату, либо тозилхлорид, либо ангидрид пропилфосфоновой кислоты и другие, а затем взаимодействием активированного производного карбоновой кислоты с аминосоединением формулы IV. Амидная связь также может быть образована взаимодействием аминосоединения с галогенангидридом карбоновой кислоты, в частности с хлорангидридом карбоновой кислоты, который может быть получен на отдельной стадии либо in situ из карбоновой кислоты и, например, тионилхлорида, либо со сложным эфиром или тиоэфиром карбоновой кислоты, например сложным метиловым эфиром, сложным этиловым эфира, сложным фениловым эфира, сложным нитрофениловым эфира, сложным пентафторфениловым эфира, сложным метилтиоэфиром, сложным фенилтиоэфиром или сложным пиридин-2-ом, т.е. с соединением формулы III, либо с промежуточным продуктом сочетания, в котором такая группа, как Z, представляет хлор, метокси, этокси, необязательно замещенный, фенокси, метилтио, фенилтио или пиридин-2-илтио.
Реакции активации и сочетания обычно осуществляют в присутствии инертного растворителя (или разбавителя), например в присутствии апротонного растворителя, такого как диметилформамид (ДМФ), тетрагидрофуран (ТГФ), диметилсульфоксид (ДМСО), гексаметилфосфорный триамид (НМРТ), 1,2-диметоксиэтан (DME), диоксан и другие, либо в смеси таких растворителей. В зависимости от конкретного способа температура реакции может изменяться в широких пределах и может составлять, например, приблизительно от -20°С до температуры кипения растворителя или разбавителя. Также в зависимости от конкретного способа может возникнуть необходимость или целесообразность добавления нужного количества одного или нескольких вспомогательных агентов, например основания, подобного третичному амину, такому как триэтиламин или диизопропилэтиламин, либо алкоголята щелочного металла, такого как метоксид натрия или трет-бутоксид калия, для регулирования рН или нейтрализации образующейся кислоты, или для освобождения свободного основания аминосоединения, используемого в виде кислотно-аддитивной соли, либо N-гидроксазола, такого как 1-гидроксибензотриазол, либо катализатора, такого как 4-диметиламинопиридин. Подробности способа получения активированных производных карбоновой кислоты и образования амидных и сложноэфирных связей, а также литературные источники приведены в различных справочниках, например, таких как J. March, Advanced Organic Chemistry, 4th ed., John Wiley & Sons, 1992; или Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Jrganic Chemistry], Georg Thieme Verlag.
Защитные группы, которые все еще могут присутствовать в продуктах, получаемых в результате реакции сочетания, затем удаляют обычными способами. Например, трет-бутилзащитные группы могут быть удалены трифторуксусной кислотой. В частности, у трет-бутоксикарбонилзамещенной амидиногруппы или аминогруппы, которая является защищенной формой амидиногруппы или аминогруппы, может быть снята защита, т.е. она может быть превращена в амидиногруппу или аминогруппу в результате обработки трифторуксусной кислотой. Как указывалось выше, функциональные группы также могут быть получены после реакции сочетания из подходящих групп-предшественников. Кроме того, превращение в физиологически приемлемую соль или пролекарство соединения формулы I затем может быть осуществлено известными способами.
В качестве примеров введения специфических функциональных групп может быть приведена методика введения амидиногрупп, т.е. группы H2N-C(=NH)-, также обозначенной как аминоиминометильная группа или карбамимидоильная группа, при этом указанные группы также могут, например, представлять группу R10. Амидины могут быть получены из цианосоединений добавлением спирта в кислых безводных условиях, например, в метаноле или этаноле, насыщенном хлористым водородом, и последующим аммонолизом. Другой способ получения амидинов включает добавление сероводорода к цианогруппе, затем метилирование полученного тиоамида и последующее взаимодействие с аммиаком. Следующий способ включает добавление гидроксимина к цианогруппе, приводящее к образованию гидроксиамидиногруппы. При желании, связь N-О в гидроксиамидине может быть расщеплена, например, каталитическим гидрированием для получения амидина.
В целом, реакционную смесь, содержащую целевое соединение формулы I либо промежуточное соединение, подвергают окончательной обработке, а затем продукт очищают обычными способами, известными специалистам в данной области. Например, синтезированное соединение может быть очищено с использованием хорошо известных способов, таких как кристаллизация, хроматография или жидкостная хроматография высокого разрешения с обращенной фазой (ОФ-ВЭЖХ), либо других способов разделения, основанных, например, на размере, заряде или гидрофобности соединения. Подобным образом, хорошо известные способы, такие как анализ аминокислотных последовательностей, ЯМР, ИК и массспектрометрия (МС), могут быть использованы для характеристики соединения в соответствии с данным изобретением.
Описанные выше и ниже взаимодействия, осуществляемые при синтезе соединений формулы I, в целом, могут быть осуществлены в соответствии со способами обычной химии фазовых растворов.
Соединения в соответствии с настоящим изобретением ингибируют активность фактора VIIa фермента коагуляции крови.
В частности, они являются специфическими ингибиторами фактора VIIa. В данном описании термин "специфический", используемый относительно ингибирования активности фактора VIIa, означает, что соединение формулы I способно ингибировать активность фактора VIIa без существенного ингибирования активности других указанных протеаз, принимающих участие в коагуляции крови и/или пути фибринолиза, включая, например, фактор Ха, плазмин и тромбин (при такой же концентрации ингибитора). Соединения в соответствии с данным изобретением ингибируют каталитическую активность фактора VIIa либо непосредственно, в составе комплекса протромбиназы или в виде растворимой подгруппы, либо косвенно, ингибируя объединение фактора VIIa в комплекс протромбиназы.
Благодаря своей активности, ингибирующей фактор VIIa, соединения формулы I представляют собой полезные, фармакологически активные соединения, подходящие, например, для воздействия на коагуляцию (или свертывание) и фибринолиз крови, а также для лечения, включая терапию и профилактику заболеваний, таких как, например, сердечно-сосудистые нарушения, тромбоэмболические заболевания или рестенозы. Соединения формулы I, их физиологически переносимые соли и пролекарства могут быть введены животным, предпочтительно млекопитающим, и, в частности, человеку, в качестве лекарственных средств для лечения или профилактики. Они могут быть введены как таковые или в смесях друг с другом либо в виде фармацевтических композиций, предназначенных для энтерального или парентерального введения и содержащих, в качестве активного составляющего, эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его физиологически переносимых солей, и/или его пролекарств и фармацевтически приемлемого носителя.
Настоящее изобретение также относится к соединениям формулы I и/или их физиологически переносимым солям, и/или их пролекарствам, для использования в качестве фармацевтических препаратов (или лекарственных средств), к применению соединений формулы I и/или их физиологически переносимых солей, и/или их пролекарств для получения фармацевтических препаратов, предназначенных для ингибирования фактора VIIa, или для воздействия на коагуляцию или фибринолиз крови, или для лечения, включая терапию и профилактику, указанных выше и ниже заболеваний, например, для получения фармацевтических препаратов, предназначенных для лечения сердечно-сосудистых нарушений, тромбоэмболических заболеваний или рестенозов. Данное изобретение также относится к применению соединений формулы I и/или их физиологически переносимых солей, и/или их пролекарств, предназначенных для ингибирования фактора VIIa или для воздействия на коагуляцию или фибринолиз крови, или для лечения указанных выше и ниже заболеваний, например, предназначенных для лечения, включая терапию и профилактику, сердечно-сосудистых нарушений, тромбоэмболических заболеваний или рестенозов, а также к способам лечения, предназначенным для данных целей, включая способы указанных видов лечения и профилактики. Настоящее изобретение далее относится к или фармацевтическим композициям, содержащим эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его физиологически переносимых солей, и/или его пролекарств, и фармацевтически приемлемого носителя, т.е. одного или нескольких фармацевтически приемлемых веществ-носителей (либо наполнителей) и/или добавок (либо эксципиентов).
Фармацевтические композиции могут быть введены перорально, например, в форме пилюль, таблеток, таблеток с блестящим покрытием, таблеток с покрытием, гранул, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, сиропов, эмульсий, суспензий или аэрозольных смесей. Однако введение также может быть осуществлено ректально, например, в виде суппозиториев либо парентерально, например внутривенно, внутримышечно или подкожно, в виде растворов для инъекций или вливаний, микрокапсул, имплантатов или стержней, либо чрезкожно или локально, например, в виде мазей, растворов или настоев, либо другими способами, например, в виде аэрозолей или назальных спреев.
Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением получают способом, известным per se и знакомым специалисту в данной области, при этом помимо соединения (соединений) формулы I и его (их) физиологически переносимых солей и/или его (их) пролекарств используют фармацевтически приемлемые, инертные, неорганические и/или органические вещества-носители и/или добавки. Для получения пилюль, таблеток, таблеток с покрытием и твердых желатиновых капсул могут быть, например, использованы лактоза, кукурузный крахмал или их производные, тальк, стеариновая кислота или их соли и т.д. Вещества-носители для мягких желатиновых капсул и суппозиториев включают, например, жиры, воски, полутвердые и жидкие полиолы, натуральные или отвержденные масла и т.д. Подходящие вещества-носители для получения растворов, например растворов для инъекций, или эмульсий, или сиропов, включают, например, воду, солевой раствор, спирты, глицерины, полиолы, сахарозу, инвертный сахар, глюкозу, растительные масла и т.д. Подходящие вещества-носители для микрокапсул, имплантатов или стержней включают, например, сополимеры гликолевой и молочной кислот. Фармацевтические композиции обычно содержат приблизительно от 0,5 до 90 мас.% соединений формулы I и/или их физиологически переносимых солей, и/или их пролекарств. Количество активного ингредиента формулы I и/или его физиологически переносимой соли, и/или его пролекарства в фармацевтических композициях обычно составляет приблизительно от 0,5 до 1000 мг, предпочтительно приблизительно от 1 до 500 мг, на единицу, однако в зависимости от вида фармацевтической композиции оно также может быть выше.
Помимо активных ингредиентов формулы I и/или их физиологически приемлемых солей, и/или пролекарств, а также веществ-носителей, фармацевтические композиции могут содержать одну или несколько добавок, таких как, например, наполнители, разрыхляющие агенты, связующие, смазывающие агенты, увлажняющие агенты, стабилизаторы, эмульгаторы, консерванты, подсластители, красители, корригенты, ароматизаторы, загустители, разбавители, буферные вещества, растворители, солюбилизаторы, агенты для достижения эффекта "депо", соли для изменения осмотического давления, агенты для нанесения покрытий или антиоксиданты. Они также могут содержать два или несколько соединений формулы I и/или их физиологически переносимых солей, и/или их пролекарств. В том случае, если фармацевтическая композиция содержит два или несколько соединений формулы I, выбор отдельных соединений может быть направлен на специфический общий фармакологический профиль фармацевтической композиции. Например, сильнодействующее соединение с более короткой продолжительностью действия может быть соединено с длительно действующим соединением более слабого действия. Гибкость, допускаемая относительно выбора заместителей в соединениях формулы I, обеспечивает широкий контроль над биологическими и физико-химическими свойствами соединений, таким образом предоставляя возможность выбора таких желательных соединений. Более того, помимо по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его физиологически переносимых солей, и/или его пролекарств, фармацевтические композиции также могут содержать одно или несколько других терапевтически или профилактически активных ингредиентов.
В качестве ингибиторов фактора VIIa соединения формулы I, их физиологически переносимые соли и их пролекарства в целом подходят для лечения и профилактики состояний, при которых активность фактора VIIa играет важную роль или имеет нежелательную степень воздействия, либо на которые ингибирование фактора VIIa или снижение его активности может оказать благоприятное действие, либо для предотвращения, облегчения или лечения которых врачу необходимо ингибировать фактор VIIa или снизить его активность. Поскольку ингибирование фактора VIIa влияет на коагуляцию и фибринолиз крови, соединения формулы I, их физиологически переносимые соли и их пролекарства в целом подходят для снижения свертывания крови либо для лечения или профилактики состояний, при которых активность системы коагуляции крови играет важную роль или имеет нежелательную степень воздействия, либо на которые снижение уровня свертывания крови может оказать благоприятное действие, либо для предотвращения, облегчения или лечения которых врачу необходимо снизить активность системы коагуляции крови. Таким образом, конкретным предметом настоящего изобретения является снижение или ингибирование нежелательного свертывания крови, в частности, у пациента, в результате введения эффективного количества соединения I, его физиологически переносимой соли или пролекарства, а также фармацевтических композиций.
Состояния, при которых могут быть успешно использованы соединение формулы I и/или его физиологически переносимая соль, и/или его пролекарство, включают, например, сердечно-сосудистые нарушения, тромбоэмболические заболевания или осложнения, связанные, например, с инфекцией или хирургическим вмешательством. Соединения в соответствии с настоящим изобретением также могут быть использованы для снижения воспалительной реакции. Примеры конкретных нарушений, для лечения которых, включая терапию и профилактику, могут быть использованы соединения формулы I, включают коронарную болезнь сердца, инфаркт миокарда, стенокардию, васкулярный рестеноз после ангиопластики, такой как РТСА, респираторный дистресс-синдром взрослых, поражение нескольких органов и диссеминированное, внутрисосудистое нарушение свертывания крови. Примерами осложнений, связанных с хирургическим вмешательством, служат тромбозы, такие как тромбозы глубоких и проксимальных вен, которые могут возникнуть после операции. Ввиду своей фармакологической активности соединения в соответствии с данным изобретением могут заменить другие антикоагулирующие средства, такие как гепарин. Применение соединения в соответствии с данным изобретением может, например, привести к экономии средств по сравнению с другими антикоагулянтами.
При использовании соединений формулы I доза может изменяться в широких пределах и, как принято и известно врачу, в каждом отдельном случае должна быть подобрана для конкретного состояния. Например, она зависит от конкретного используемого соединения, от природы и тяжести подвергаемого лечению заболевания, от способа и схемы введения либо от того, подвергается лечению острое или хроническое состояние, либо от проводимой профилактики. Соответствующая доза может быть подобрана с использованием клинических подходов, хорошо известных в области медицины. В целом, суточная доза для достижения желаемых результатов у взрослых пациентов массой около 75 кг составляет приблизительно от 0,01 до 100 мг/кг, предпочтительно приблизительно от 0,1 до 50 мг/кг, в частности приблизительно от 0,1 до 10 мг/кг (в каждом случае в мг на кг массы тела). Суточная доза может быть разделена, в частности, при введении сравнительно большого количества, на несколько, например, 2, 3 или 4, дробных доз. Как обычно, в зависимости от индивидуальной реакции может возникнуть необходимость повышения или снижения указанной суточной дозы.
Соединение формулы I также может быть успешно использовано в качестве антикоагулянта вне организма пациента. Например, эффективное количество соединения в соответствии с данным изобретением может быть добавлено к свежеотобранному образцу крови для предотвращения его коагуляции. Далее, соединение формулы I или его соли могут быть использованы в диагностических целях, например, для диагноза in vitro, а также в качестве вспомогательного средства или инструмента для биохимических исследований. Например, соединение формулы I может быть использовано в анализе по определению наличия фактора VIIa или для выделения фактора VIIa в, по существу, очищенном виде. Соединение в соответствии с данным изобретением может быть помечено, например, радиоизотопом, после чего меченое соединение, связанное с фактором VIIa, выявляют с применением обычного способа, используемого для выявления конкретной метки. Таким образом, соединение формулы I или его соль может быть успешно использовано в качестве образца для выявления места действия или объема активности фактора VIIa in vivo, in vitro или ex vivo.
Более того, соединения формулы I могут быть использованы в качестве промежуточных соединений для синтеза при получении других соединений, в частности других фармацевтически активных ингредиентов, которые могут быть получены из соединений формулы I, например, в результате введения заместителей или модификации функциональных групп.
Подразумевается, что модификации, не оказывающие существенного влияния на эффективность различных вариантов осуществления данного изобретения, входят в объем раскрытого в данном описании изобретения. Соответственно, следующие примеры предназначены для иллюстрации, а не ограничения настоящего изобретения.
Примеры
Сокращения
DCC - N,N'-дициклогексилкарбодиимид
DIEA - N,N-дизопропил-N-этиламин
ДМФ - N,N-диметилформамид
ДМСО - диметилсульфоксид
NEM - N-этилморфолин
HOBt - N-гидроксибензотриазол
ТГФ - тетрагидрофуран
ТФУ - трифторуксусная кислота
TOTU - тетрафторборат О-(циано(этоксикарбонил)метиленамино)-1,1,3,3-тетраметилурония
При использовании на последней стадии синтеза соединения кислоты, такой как трифторуксусная или уксусная кислота, например, при использовании трифторуксусной кислоты для удаления трет-бутилгруппы, либо при очистке соединения хроматографией с применением элюента, содержащего такую кислоту, в некоторых случаях, в зависимости от способа окончательной обработки, например, от деталей лиофилизации, соединение частично или полностью получают в виде соли используемой кислоты, например в виде соли уксусной или трифторуксусной кислоты.
Пример 1
(S)-N-(4-Карбамимидоилбензил)-2-[3-(4-карбамимидоилфенил) уреидо]пропионамид
a) Этиловый эфир (S)-2-[3-(4-цианофенил)уреидо]пропионовой кислоты
Раствор 4-аминобензонитрила (2,3 г, 0,0195 моль) и N,N'-карбонилдиимидазола (3,5 г, 0,332 моль) в ДМФ (20 мл) нагревают при 80°С в течение 7 часов. Добавляют раствор этилового эфира L-аланина (3 г, 0,0195 моль) в ДМФ (15 мл) и перемешивание продолжают в течение 3 дней при 80°С. Добавляют воду (300 мл), а осадок отфильтровывают (получая 750 мг димера в виде побочного продукта). Раствор экстрагируют этилацетатом, получая 3 г указанного в заголовке соединения, содержащего соответствующую кислоту в виде побочного продукта.
МС 262,1 (M+1)+
b) (S)-2-[3-(4-цианофенил)уреидо]пропионовая кислота
Раствор соединения примера 1а) (3 г, 0,0115 моль) в метаноле (60 мл) и NaOH (2 N, 5,75 мл) перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют и добавляют воду. Добавляют водный раствор HCl (1 N), а осадок отделяют, получая 0,95 г (37%) указанного в заголовке соединения.
МС 234,2 (М+1)+
c)(S)-N-(4-цианобензил)-2-[3-(4-цианофенил)уреидо]пропионамид
К раствору соединения примера 1b) (0,222 г, 0,953 ммоль) соли п-толуолсульфоновой кислоты 4-аминометилбензонитрила (0,290 г, 0,953 ммоль), NEM (0,12 мл) и HOBt (0,129 г, 0,953 ммоль) в ДМФ (20 мл) при 0°С добавляют DCC (0,179 г, 0,953 ммоль). Раствор перемешивают в течение 1 часа при температуре от 3 до 10°С и 12 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в этилацетате (60 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO3 (2×20 мл) и сушат (MgSO4). Растворитель удаляют, получая 0,46 г указанного в заголовке соединения, используемого без дальнейшей очистки.
МС 348,1 (М+1)+
d) (S)-N-(4-карбамимидоилбензил)-2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]пропионамид
Раствор соединения примера 1с) (0,380 г, 1,10 ммоль) в смеси пиридин/триэтиламин (5 мл, 1:1) насыщают газообразным сернистым водородом (N2). Через 48 часов при комнатной температуре растворитель удаляют и добавляют раствор метилиодида (0,60 мл, 11 ммоль) в ацетоне (2 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 48 часов растворитель удаляют, добавляют раствор ацетата аммония (0,85 мг, 11 ммоль) в метаноле (10 мл) и уксусной кислоте (0,5 мл) и смесь перемешивают в течение 48 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют, а остаток очищают с применением ВЭЖХ, получая 24 мг (36%) указанного в заголовке соединения.
МС 382,3 (М+1)+; МС 191,6 (1/2(М+2)2+)
Пример 2
2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(4-диметиламинобензил)-3-фенилпропионамид
а) Этиловый эфир 3-фенил-2-[3-(4-цианофенил) уреидо]пропионовой кислоты
К раствору этилового эфира 2-изоцианато-3-фенил-пропионовой кислоты (6 г, 27,37 ммоль) в ДМФ (50 мл) при 3°С в течение 20 минут добавляют раствор 4-аминобензонитрила (3,23 г, 27,37 ммоль) в ДМФ (30 мл). Перемешивание продолжают в течение 7 дней при комнатной температуре и дополнительно последовательно добавляют этиловый эфир 2-изоцианато-3-фенилпропионовой кислоты (2,86 г). Растворитель удаляют, а остаток растворяют в этилацетате (100 мл), промывают водой (20 мл), насыщенным водным раствором KHSO4/K2SO4 (1:1, 2×20 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (4×90 мл). Органическую фазу сушат (MgSO4), фильтруют и упаривают, получая 12,20 г указанного в заголовке соединения, используемого без дальнейшей очистки.
МС 338,3 (M+1)+
b) Этиловый эфир 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-3-фенилпропионовой кислоты
Раствор соединения примера 2а) (12,04 г) в этаноле (100 мл) насыщают сухой газообразной HCl при температуре от 5 до 15°С. Через 48 часов при комнатной температуре растворитель удаляют. К остатку добавляют насыщенный раствор аммиака в этаноле (19 мл, 57,1 ммоль) и смесь перемешивают в течение 48 часов при комнатной температуре. Смесь отфильтровывают и к раствору добавляют этилацетат (180 мл). Осадок фильтруют, получая 7,5 г (67%) указанного в заголовке соединения.
МС 355,2 (M+1)+
c) Этиловый эфир 2-{3-[4-(трет-бутоксикарбониламино-трет-бутоксикарбонилиминометил)фенил]уреидо}-3-фенилпропионовой кислоты
Смесь соединения примера 2b) (7,5 г, 9,19 ммоль), NaHCO3 (4,84 г, 57,56 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбоната (8,37 г, 38,37 ммоль) в этаноле (100 мл) перемешивают при 40°С. Через 16 часов неорганическую соль отфильтровывают, а растворитель удаляют. Остаток растворяют в этилацетате (150 мл), промывают водой (50 мл), сушат (MgSO4), фильтруют и выпаривают, получая 8,91 г указанного в заголовке соединения, используемого без дальнейшей очистки.
d) Натриевая соль 2-{3-[4-(трет-бутоксикарбониламино-трет-бутоксикарбонилиминометил)фенил]уреидо}-3-фенилпропионовой кислоты
К раствору соединения примера 2с) (8,91 г) в этаноле (70 мл) добавляют раствор NaOH (0,84 г, 21,11 ммоль) в воде (15 мл). Через 7 часов при комнатной температуре раствор концентрируют (40 мл), а осадок отфильтровывают и промывают этилацетатом (2×15 мл) и простым эфиром (20 мл), получая 4,16 г указанного в заголовке соединения.
МС 527,3 (M+1)+
е) 2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(4-диметиламинобензил)-3-фенилпропионамид
К раствору примера 2d) (0,40 г, 0,73 ммоль), соли дихлористоводородной кислоты 4-диметиламинобензиламина (0,16 г, 0,73 ммоль) и HOBt (0,10 г, 0,73 ммоль) в ДМФ (15 мл) при 0°С добавляют DCC (0,17 г, 0,8 ммоль). Раствор перемешивают в течение 1 часа при температуре от 3 до 10°С и 12 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в этилацетате (40 мл), промывают насыщенным раствором водного NaHCO3 (2×5 мл) и насыщенным раствором водного NaCl (2×5 мл). Органическую фазу сушат (MgSO4) и фильтруют. Растворитель удаляют, а остаток (0,48 г) перемешивают с ТФУ (1,12 мл, 14,6 ммоль) и водой (0,17 г) в течение 24 часов при комнатной температуре. Добавляют этилацетат (20 мл) и н-пентан (20 мл), смесь охлаждают, а осадок отфильтровывают, получая 138 мг указанного в заголовке соединения. Т.пл. 147°С.
МС 459,3 (М+1)+; МС 230,1 (1/2 М+2)2+)
Пример 3
2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(3,4-дихлорбензил)ацетамидо
а) Этиловый эфир 2-[3-(4-цианофенил)уреидо]уксусной кислоты
К раствору этоксикарбонилметилизоцианата (24,5 мл, 0,212 моль) в ДМФ (100 мл) в течение 30 минут при 0°С добавляют раствор 4-аминобензонитрила (25 г, 0,212 моль) в ДМФ (100 мл). Перемешивание продолжают в течение 7 дней и периодически добавляют дополнительный этоксикарбонилметилизоцианат (18,5 мл, 0,156 моль). Растворитель удаляют в вакууме, а остаток перемешивают в смеси этилацетат/диэтиловый эфир. Смесь фильтруют, получая указанное в заголовке соединение (39,12 г, 74%; белое твердое вещество, имеющее т.пл. 140-144°С), используемое без дальнейшей очистки.
b) Этиловый эфир 2-[3-(4-этоксикарбонимидоилфенил)уреидо] уксусной кислоты
Через перемешиваемую смесь соединения примера 3а) (22,73 г, 0,0919 моль) в этаноле (500 мл) при 0°С пропускают сухой газообразный HCl. После перемешивания в течение 2 дней твердое вещество растворяется. После дополнительного перемешивания в течение 2 дней твердое вещество осаждается. Твердое вещество отфильтровывают, получая 36,99 г (96%) указанного в заголовке соединения (т.пл. 140°С), используемого без дальнейшей очистки.
c) Этиловый эфир 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]уксусной кислоты
К суспензии примера 3b) (18,80 г, 0,057 моль) в этаноле (300 мл) добавляют раствор аммиака в этаноле (150 мл, 0,145 моль). Через 30 часов осадок фильтруют и промывают небольшим количеством этанола. Остаток перемешивают с простым эфиром и фильтруют, получая 12,33 г (82%) указанного в заголовке соединения.
МС 265,1 (М+1)+
d) Этиловый эфир 2-{3-[4-(трет-бутоксикарбониламиноиминометил) фенил]уреидо}уксусной кислоты
К суспензии примера 3с) (42 г, 0,14 моль) и NaHCO3 (35,19 г, 0,42 моль) в этаноле (1,4 л) последовательно добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (70,2 г, 0,32 моль) во время перемешивания и нагревания суспензии при 50°С. Через 2 дня смесь фильтруют, а растворитель удаляют до конечного объема 100 мл. Осадок фильтруют при 0°С, а остаток промывают простым диэтиловым эфиром. Остаток кристаллизуют (этанол), получая 18,28 г (36%) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 107-110°С.
МС 365,3 (М+1)+
е) Натриевая соль 2-{3-[4-(трет-бутоксикарбониламиноиминометил) фенил]уреидо}уксусной кислоты
К суспензии соединения примера 3d) (2,0 г, 5,49 ммоль) в этаноле (50 мл) добавляют раствор NaOH (0,22 г, 5,49 ммоль) в воде (1 мл). После перемешивания в течение 20 часов при 20° С растворитель удаляют, а остаток подвергают лиофилизации, получая 1,98 г (99%) указанного в заголовке соединения.
МС 337,2 (M+1)+
f) 2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(3,4-дихлорбензил) ацетамид
К раствору 3,4-дихлорбензиламина (0,22 мл), соединения примера 3е) (0,6 г, 1,67 ммоль) и HOBt (0,23 г, 1,67 ммоль) в ДМФ (30 мл) при 0°С добавляют DCC (0,38 г, 1,84 ммоль). Раствор перемешивают в течение 1 часа при температуре от 3 до 10°С и 12 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в этилацетате (50 мл), промывают насыщенным раствором водного NaHCO3 (2,15 мл) и насыщенным раствором водного NaCl (2×40 мл). Органическую фазу сушат (MgSO4), фильтруют и упаривают. Остаток растворяют в ТФУ (2,57 мл) и воде (0,38 мл) и перемешивают в течение 24 часов при комнатной температуре. Добавляют дихлорметан (20 мл) и диэтиловый эфир (40 мл), а осадок фильтруют, получая 0,59 г (69%) указанного в заголовке соединения.
Т.пл. 221-214°С.
МС 394,1 (M+1)+
Пример 4
2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(4-диметиламинобензил) ацетамид
К раствору 4-диметиламинобензиламина (0,42 г, 2,79 ммоль), соединения примера 3е) (1 г, 2,79 ммоль) и HOBt (0,38 г, 2,79 ммоль) в ДМФ (50 мл) при 0°С добавляют DCC. рН доводят до 6 добавлением NEM (0,46 мл). Раствор перемешивают в течение 1 часа при температуре от 3 до 10°С и 12 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в этилацетате (110 мл), промывают насыщенным раствором водного NaHCO3 (2×20 мл) и насыщенным раствором водного NaCl (3×80 мл). Органическую фазу сушат (MgSO4), фильтруют и упаривают. Остаток растворяют в ТФУ (0,76 мл) и воде (0,12 мл) и перемешивают в течение 24 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют, а остаток подвергают кристаллизации из смеси вода/ацетон, получая 0,28 г (48%) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 209-214°С.
МС 369,2 (М+1)+; МС 185,0 (1/2 (М+2)2+)
Пример 5
N-бензгидрил-2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]ацетамид
К раствору соединения примера 3е) (0,1 г, 0,3 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавляют бензгидриламин (0,051 г, 0,3 ммоль), NEM (0,064 г, 0,6 ммоль) и TOTU (0,092 г, 0,3 ммоль). Раствор перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в водной ТФУ (5 мл, 90%). После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре растворитель удаляют, а остаток подвергают очистке с применением ВЭЖХ и лиофилизации, получая 0,057 г (37%) указанного в заголовке соединения.
МС 402,3 (М+1)+
Аналогично описанным выше примерам получают следующие иллюстративные соединения, которые могут быть названы как 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(Ra-замещенные)ацетамиды (например, соединение формулы Ia, в которой Ra представляет 3-хлорбензил, может быть названо как 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-N-(3-хлорбензил)ацетамид).
Иллюстративные соединения формулы Ia:
| Пример | Ra в формуле Ia | МС |
| 6 | 3-хлорбензил | 360,2 (M+1)+ |
| 7 | (S)-1-(1-нафтил)этил | 390,2 (M+1)+ |
| 8 | 4-хлорбензил | 360,2 (M+1)+ |
| 9 | 1-[4-(2,4-дихлорфенокси)фенил]этил | 500,2 (M)+ |
| 10 | 2-гидрокси-2-фенилэтил | 356,2 (M-1)+ |
| 11 | 2-аминоэтил | 279,1 (M+1)+ |
| 12 | 4-аминобензил | 441,4 (M+1)+ |
| 13 | 4-карбамимидоилбензил | 368,6 (M+1)+ |
| 185,3 (M+2)2+ | ||
| 14 | 3,3-дифенилпропил | 430,3 (M+1)+ |
| 15 | 1,2-дифенилэтил | 416,2 (M+1)+ |
| 16 | 3,5-дифторбензил | 362,1 (M+1)+ |
| 17 | 2-хлор-4-фторбензил | 378,1 (M+1)+ |
| 18 | (S)-1-фенилэтил | 340,2 (M+1)+ |
| 19 | (R)-1-фенилэтил | 340,2 (M+1)+ |
| 20 | 2-(4-феноксифенил)этил | 432,2 (М+1)+ |
| 21 | (S)-1-(4-метилфенил)этил | 354,2 (M+1)+ |
| 22 | 4-гидрокси-3-метоксибензил | 372,2 (M+1)+ |
| 23 | 3-(3-бромфенилсульфониламино)пропил | 513,1 (M+1}+ |
| 24 | 1-(3-бромфенилсульфонил)пиперидин-4-ил | 539,2 (M+1)+ |
| 25 | 1-(3-гидроксикарбонилметоксифенил)-1- | |
| фенилметил | 476,1 (M+1)+ | |
| 26 | 4-амино-9Н-флуорен-9-ил | 414,1 (M+1)+ |
| 27 | 1-(4-хлорфенил)-1-фенилметил | 436,16 (M+1)+ |
| 28 | (S)-1-(4-бромфенил)этил | 418,09 (M+1)+ |
| 29 | (S)-1-(4-нитрофенил)этил | 385,16 (M+1)+ |
| 30 | (S)-1-(2-нафтил)этил | 390,20 (M+1)+ |
| 31 | 1-(1,4-бензодиоксан-5-ил)этил | 398,18 (M+1)+ |
| 32 | (S)-1-(3-бромфенил)этил | 418,09 (M+1)+ |
| 33 | (S)-1-(4-хлорфенил)этил | 374,14 (M+1)+ |
| 34 | (S)-1-(3-метоксифенил)этил | 370,19 (M+1)+ |
| 35 | 1-(4-метилсульфонилфенил)этил | 418,16 (M+1)+ |
| 36 | 1-[4-(4-метоксифенокси)фенил]этил | 462,3 (M+1)+ |
| 37 | 1-[4-(4-нитрофенокси)фенил]этил | 477,3 (M+1)+ |
| 38 | 1-(4-феноксифенил)этил | 432,3 (M+1)+ |
| 39 | 1-(3,4-дихлорфенил)пропил | 422,2 (M)+ |
| 40 | 1-(4-пиридил)метил | 327,1 (M+1)+ |
| 164,0 (M+2)2+ | ||
| 41 | 1-фенил-1-(4-пиридил)метил | 403,19 (M+1)+ |
| 42 | 1-метил-1-фенилэтил | 354,19 (M+1)+ |
| 43 | 1-циано-1-(4-фторфенил)метил | 369,15 (M+1)+ |
| 44 | (S)-индан-1-ил | 352,18 (M+1)+ |
| 45 | (S)-1,2,3,4-тетрагидронафтален-1-ил | 366,19 (M+1)+ |
Пример 46
2-[1-Бензилокси-3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-N-[(S)-1-(4-метилфенил)этил]ацетамид
а) Трет-бутиловый эфир 2-бензилоксиаминоуксусной кислоты
К раствору O-бензилгидроксиламингидрохлорида (5 г, 31,3 ммоль) в сухом ДМФ (20 мл) добавляют трет-бутил 2-бромацетат (4,7 мл, 1 экв.) и карбонат калия (4,5 г, 1 экв.). Раствор перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают. Растворитель удаляют, остаток растворяют в этилацетате и экстрагируют небольшими порциями 1 N HCl, раствором карбоната натрия и рассолом. После сушки над сульфатом натрия растворитель удаляют досуха, получая 5,86 г (79%) указанного в заголовке соединения в виде масла достаточной чистоты.
МС 182,1 (М+1-трет-бутил)+
b) Трет-бутиловый эфир 2-[1-бензилокси-3-(4-цианофенил)уреидо] уксусной кислоты
К раствору соединения примера 46а) (2,5 г, 10,5 ммоль) в сухом ТГФ (20 мл) добавляют 4-цианофенилизоцианат (1,5 г, 1 экв.) и смесь перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Окончательную обработку производят, как описано на стадии 40а), получая 4,0 г (99%) указанного в заголовке соединения.
МС 326,1 (М+1-трет-бутил)+
c) 2-[1-бензилокси-3-(4-цианофенил)уреидо]уксусная кислота
Соединение примера 46b) (2 г, 5,2 ммоль) обрабатывают ТФУ (15 мл). Через 1 час (ЖХ-МС-контроль) ТФУ отгоняют, а остаток упаривают вместе с толуолом, получая 1,57 г (92%) указанного в заголовке соединения.
МС 326,1 (M+1)+
d) (S)-2-[1-бензилокси-3-(4-цианофенил)уреидо]-N-(1-(4-метилфенил)этил)ацетамид
К соединению примера 46с) (1,56 г, 4,83 ммоль) в ДМФ (10 мл)/ТГФ (20 мл) добавляют (S)-1-(4-метилфенил)этиламин (0,68 г, 5 ммоль), DIEA (0,83 мл, 1 экв.) и TOTU (1,6 г, 1 экв.). Раствор перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют, остаток растворяют в этилацетате и экстрагируют, как описано для стадии 46а). Остаток очищают хроматографией, получая 1,3 г (61%) указанного в заголовке соединения.
МС 443,2 (M+1)+
e) 2-[1-Бензилокси-3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-N-[(S)-1-(4-метилфенил)этил]ацетамид
Соединение примера 46d) (1,5 г, 3,39 ммоль) растворяют в метаноле (25 мл). Сухую газообразную HCl барботируют через раствор при 0°С и перемешивании в течение 4 часов, продолжая перемешивание при комнатной температуре еще в течение 16 часов. Завершенность образования сложного иминоэфира контролируют, применяя ЖХ-МС. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в сухом метаноле (20 мл). Добавляют ацетат аммония (2,6 г, 34 ммоль) и полученную смесь перемешивают в течение 40 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют и добавляют небольшое количество воды. Продукт фильтруют, промывают водой и сушат, получая 1,02 г (50%) указанного в заголовке соединения.
МС 460,20 (М-+1)+
Пример 47
2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)-1-гидроксиуреидо]-N-[(S)-1-(4-метилфенил)этил]ацетамид
Соединение примера 46 (104 мг, 0,2 ммоль) гидрируют с применением формиата аммония (143 г) и Pd/C (30 мг, 10%) в метаноле (10 мл) при комнатной температуре. Через 16 часов (ЖХ-МС-контроль) смесь отфильтровывают, а растворитель удаляют. Оставшиеся следы формиата удаляют в глубоком вакууме при повышенной температуре. Получают 47 мг (57%) указанного в заголовке соединения.
МС 370,10 (M+1)+
Пример 48
4-Метоксифениловый эфир[имино(4-{3-[((S)-1-(4-метилфенил)этилкарбамоил)метил]уреидо}фенил)метил]карбаминовой кислоты
К соединению примера 21 (310 мг, 0,9 ммоль) в 1,2-диметоксиэтана (20 мл) добавляют DIEA (0,34 г, 1,8 ммоль) и 4-метоксифенилхлорформиат (0,344 г, 1,8 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме, а остаток очищают с применением ВЭЖХ, получая 63 мг (14%) указанного в заголовке соединения. МС 504,2 (M+1)+
Пример 49
4-(1-{2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]ацетиламино}этил)фениламид пиперидин-4-карбоновой кислоты
a) 2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]уксусная кислота
Раствор этилового эфира 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]уксусной кислоты (24,48 г, 0,0926 мол, соединение примера 3с) в этаноле (100 мл) и NaOH (3,705 г, 0,0926 мол в 5 мл воды) перемешивают в течение 22 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают и промывают этанолом, получая 24,78 г указанного в заголовке соединения.
МС 258,2 (М)+
b) Трет-бутиловый эфир 4-(4-ацетилфенилкарбамоил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
К раствору 1-трет-бутилового эфира пиперидин-1,4-дикарбоновой кислоты (1,69 г, 7,4 ммоль) в ДМФ (20 мл) добавляют 1-(4-аминофенил)этанон (1 г, 7,4 ммоль), NEM (0,852 г, 7,4 ммоль) и TOTU (2,427 г, 7,4 ммоль). Раствор перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют, а остаток растворяют в этилацетате (50 мл) и промывают насыщенным раствором водного NaHCO3 (5 мл) и HCl (1 N, 10 мл). Органическую фазу сушат (MgSO4) и фильтруют. Растворитель удаляют, получая 1,344 г (52%) указанного в заголовке соединения.
с) Трет-бутиловый эфир 4-[4-(1-аминоэтил)фенилкарбамоил]пиперидин-1-карбоновой кислоты
Раствор соединения примера 49b) (1,344 г, 3,88 ммоль) и ацетата аммония (5,619 г, 72,9 ммоль) в метаноле (70 мл) перемешивают с цианоборгидридом натрия (7,3 мл, 7,29 ммоль, 1 М раствор в ТГФ) в течение 7 дней. Растворитель удаляют, а остаток перемешивают с диэтиловым эфиром (25 мл) и водой (50 мл). рН доводят до 3-4, добавляя концентрированную HCl и фазы разделяют. рН водной фазы доводят до >11 добавлением КОН, экстрагируют ее этилацетатом и сушат (MgSO4). Растворитель удаляют, получая 1,083 г (80%) указанного в заголовке соединения.
d) 4-(1-{2-[3-(4-Карбамимидоилфенил)уреидо]ацетиламино}этил) фениламид пиперидин-4-карбоновой кислоты
К раствору соединения примера 49а) (0,05 г, 0,212 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавляют соединение примера 49с) (0,059 г, 0,17 ммоль), NEM (0,024 г, 0,212 ммоль) и TOTU (0,065 г, 0,212 ммоль). Раствор перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют, а осадок растворяют в ТФУ (0,5 мл). Через 12 часов растворитель удаляют, а остаток очищают с применением ВЭЖХ и лиофилизуют, получая 59 мг (60%) указанного в заголовке соединения.
МС 274,7 (М)+
Аналогично примеру 49 получают следующие иллюстративные соединения формулы 1b, которые могут быть названы как 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-N-{1-[(Rb-замещенный)фенил] этил}ацетамиды (например, соединение формулы Ib, в котором Rb представляет 4-(3-метилбензоиламино), может быть названо как 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-N-{1-[4-(3-метилбензоиламино) фенил]этил}ацетамид).
Иллюстративные соединения формулы Ib:
| Пример | R13 в формуле Ib | МС |
| 50 | 4-(3-метилбензоиламино) | 473,4 (M+1)+ |
| 51 | 4-(пиридин-3-карбониламино) | 460,2 (M+1)+ |
| 52 | 4-(3-феноксибензоиламино) | 551,2 (М+1)+ |
| 53 | 4-(3-метоксикарбонилбензоиламино) | 517,4 (M+1)+ |
| 54 | 4-(4-аминобутириламино) | 440,2 (M+1)+ |
| 55 | 3-(фенилметансульфониламино) | 509,39 (M+1)+ |
| 56 | 3-(2-ацетиламино-4-метил[1,3]тиазол-5- | |
| сульфониламино) | 573,37 (M+1)+ | |
| 57 | 3-(пропан-2-сульфониламино) | 461,27 (M+1)+ |
| 58 | 4-(3-метоксикарбонилфенилкарбамоил) | 517,41 (M+1)+ |
| 59 | 4-(3-феноксифенилкарбамоил) | 551,45 (M+1)+ |
Аналогично примерам 1-5 получают следующие иллюстративные соединения.
Иллюстративные соединения формулы Ia, которые могут быть названы как 2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо] -N- (Ra-замещенные) ацетамиды:
| Пример | Ra в формуле Ia | МС |
| 60 | 1-(2,4-бис-трифторметилфенил)этил | 476,3 (M+1)+ |
| 61 | 1-(3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-6- | |
| ил)этил | 411,3 (M+1)+ | |
| 62 | 1-[4-(3-хлорбензилокси)фенил]этил | 480,1 (M+1)+ |
| 63 | 1-[4-(3-метоксибензилокси)фенил]этил | 476,2 (M+1)+ |
| 64 | 1-(4-бензилокси-3-метоксикарбонилфенил) | |
| этил | 504,2 (M+1)+ | |
| 65 | 1-(4-ацетиламино-3-бромфенил)этил | 475,2 (M+1)+ |
| 66 | 1-(4-уреидофенил)этил | 398,3 (M+1)+ |
| 67 | 1-[4-(морфолин-4-ил)фенил]этил | 425,4 (M+1)+ |
Пример 68
2-[3-(4-Карбамимидоил-3-хлорфенил)уреидо]-N-[1-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)этил]ацетамид
МС 432,2 (М+1)+
Пример 69
N-[(S)-1-(3-бромфенил)этил]-2-[3-(4-карбамимидоил-3-фторфенил)уреидо]ацетамид
МС 436,0 (M+1)+
Пример 70
(S)-4-[((S)-1-(3-бромфенил)этил)карбамоил]-4-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]масляная кислота
МС 492,05 (M+1)+
Пример 71
5-Амид 1-[(S)-1-(3-бромфенил)этиламида](S)-2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]пентандикислоты
МС 491,5 (M+1)+
Пример 72
N-[(S)-1-(3-бромфенил)этил]-2-[3-(4-карбамимидоилфенил)уреидо]-2-фенилацетамид
МС 496,06 (М+1)+
Фармакологические исследования
Способность соединений формулы I ингибировать фактор VIIa или другие ферменты, такие как фактор Ха, тромбин, плазмин или трипсин, может быть оценена определением концентрации соединения формулы I, ингибирующей ферментную активность на 50%, т.е. величины IC50, которая связана с константой ингибирования Ki. Очищенные ферменты применяют в хромогенных анализах. Концентрацию ингибитора, вызывающего 50% снижение скорости гидролиза субстрата, определяют путем линейной регрессии после построения графика зависимости относительных скоростей гидролиза (по сравнению с неингибированным контролем) от log концентрации соединения формулы I. Для определения константы ингибирования Ki величину IC50 корректируют для конкуренции с субстратом, используя формулу
Ki=IC50/{1+(концентрация субстрата/Кm)},
в которой Km представляет собой константу Михаэлса-Ментэна (Chen and Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22(1973), 3099-3108; I.H.Segal, Enzyme Kinetics, 1975, John Wiley & Sons, New York, 100-125; которые приведены в данном описании в качестве ссылки).
а) Анализ фактора VIIa (FVIIa)
Ингибирующую активность (выраженную в виде константы ингибирования Ki(FVIIa)) соединений формулы I по отношению к активности комплекса фактор "VIIa/тканевой фактор определяют, используя хромогенный анализ, по существу описанный ранее (J.A.Ostrem et al., Biochemistry 37 (1998) 1053-1059, приведена в данном описании в качестве ссылки). Кинетические анализы проводят при 25°С на половине площади титрационных микропланшетов (Costar Corp., Cambridge, Massachusetts), применяя кинетический аппарат для чтения планшетов (Molecular Devices Spectramax 250). Для обычного анализа 25 мкл фактора VIIa и тканевого фактора человека (5 нМ и 10 нМ в зависимости от конечной концентрации) объединяют с 40 мкл разбавленного ингибитора в 10% буфере ДМСО/TBS-PEG (50 мМ Трис, 15 мМ NaCl, 5 мМ CaCl2, 0,05% PEG 8000, рН 8,15). Через 15 минут после предварительной инкубации начинают анализ, добавляя 35 мкл хромогенного субстрата S-2288 (D-Ile-Pro-Arg-п-нитроанилид, Pharmacia Hepar Inc., конечная концентрация 500 мкМ).
Получают следующие результаты исследования (константы ингибирования Ki(FVIIa)).
| Соединение (пример) | Ki(FVIIa) (мкМ) | Соединение (пример) | Ki(FVIIa) (мкМ) |
| Пример 1 | 14,9 | Пример 2 | 20,9 |
| Пример 3 | 0,97 | Пример 4 | 1,94 |
| Пример 5 | 0,73 | Пример 6 | 2,17 |
| Пример 9 | 0,48 | Пример 15 | 6,30 |
| Пример 18 | 0,43 | Пример 19 | 20,2 |
| Пример 21 | 0,13 | Пример 30 | 0,026 |
| Пример 36 | 0,083 | Пример 37 | 0,086 |
| Пример 40 | 7,89 | Пример 41 | 0,84 |
| Пример 42 | 7,62 | Пример 43 | 8,47 |
| Пример 44 | 1,50 | Пример 45 | 1,41 |
| Пример 49 | 0,013 | Пример 51 | 0,050 |
| Пример 52 | 0,012 | Пример 54 | 0,047 |
| Пример 60 | 0,027 | Пример 61 | 0,023 |
| Пример 64 | 0,033 | Пример 68 | 3,94 |
| Пример 69 | 0,116 | Пример 70 | 0,539 |
Следующие тесты могут служить для исследования ингибирования других выбранных ферментов коагуляции и других сериновых протеаз соединениями формулы I и, таким образом, для определения их специфичности.
b) Анализ фактора Ха
Для данного анализа используют буфер TBS-PEG (50 мМ Трис-Cl, рН 7,8, 200 мМ NaCl, 0,05% (мас./об.) PEG-8000, 0,02% мас./об.) NaN3). IC50 определяют, объединяя в соответствующих лунках половины площади титрационного микропланшета Costar 25 мкл фактора Ха человека (Enzyme Research Laboratories, Inc,; South Bend, Indiana) в TBS-PEG; 40 мкл 10% (об./об.) ДМСО в TBS-PEG (неингибированный контроль) или различные концентрации исследуемого соединения, разбавленные в 10% (об./об.) ДМСО в TBS-PEG; и субстрат S-2765 (N-(α)-бензилоксикарбонил-D-Arg-Gly-L-Arg-п-нитроанилида; Kabi Pharmacia, Inc.; Franklin, Ohio) в TBS-PEG.
Данный анализ проводят предварительным инкубированием соединения формулы I с ферментом в течение 10 минут. Затем анализ инициируют, добавляя субстрат для получения конечного объема 100 мкл. Начальную скорость гидролиза хромогенного субстрата определяют по изменению поглощения при 405 нм, используя кинетический аппарат для чтения планшетов Bio-tek Instruments (Ceres UV900HDi) при 25°С во время линейной части хода времени (обычно через 1,5 минуты после добавления субстрата). Концентрация фермента составляет 0,5 нМ, а концентрация субстрата составляет 140 мкМ.
c) Анализ тромбина
Для данного анализа используют буфер TBS-PEG. IC50 определяют в соответствии с описанием, приведенным выше для анализа фактора Ха, за исключением того, что субстрат представляет собой S-2366 (L-PyroGlu-L-Pro-L-Arg-п-нитроанилид; Kabi), а фермент представляет собой тромбин человека (Enzyme Research Laboratories, Inc.; South Bend, Indiana). Концентрация фермента составляет 175 мкМ.
d) Анализ плазмина
Для данного анализа используют буфер TBS-PEG. IC50 определяют в соответствии с описанием, приведенным выше для анализа фактора Ха, за исключением того, что субстрат представляет собой S-2251 (D-Val-L-Leu-L-Lys-п-нитроанилид; Kabi), а фермент представляет собой плазмин человека (Kabi). Концентрация фермента составляет 5 нМ, а концентрация субстрата составляет 300 мкМ.
e) Анализ трипсина
Для данного анализа используют буфер TBS-PEG, содержащий 10 мМ CaCl2. IC50 определяют в соответствии с описанием, приведенным выше для анализа фактора Ха, за исключением того, что субстрат представляет собой BAPNA (бензоил-L-Arg-п-нитроанилид; Sigma Chemical Co.; St. Louis, Missouri), а фермент представляет собой бычий панкреатический трипсин (тип XIII, обработанный ТРСК; Sigma). Концентрация фермента составляет 50 нМ, а концентрация субстрата составляет 300 мкМ.
Артериовенозная шунтированная модель тромбоза у крыс
Антитромботическая эффективность соединений в соответствии с данным изобретением может быть определена с использованием экстракорпорального артериовенозного (AV) шунта у крыс. Артериовенозный шунтированный круг включает трубку из полиэтилена 60 длиной 20 см, вставленную в правую сонную артерию, трубку из полиэтилена 160 длиной 6 см, содержащую мерсеризованную хлопковую нить длиной 6,5 см (5 см которой омываются потоком крови), а также вторую трубку из полиэтилена 60 (20 см), замыкающую круг в левой шейной вене. Перед вставлением весь круг заполняют обычным солевым раствором.
Исследуемое соединение вводят в виде непрерывного вливания в хвостовую вену, применяя шприцевой насос и катетер в виде бабочки. Соединение вводят в течение 30 минут, затем шунт открывают и крови дают возможность течь в течение 15 минут (в целом, вливание длится 45 минут). В конце 15-минутного периода шунт зажимают, а нить осторожно вынимают и взвешивают на аналитических весах. Процентную величину ингибирования образования тромба определяют по массе тромба, полученного от контрольных крыс, которым вводили солевой раствор.
1. Соединение формулы (I)
в которой m равно 0, 1, 2, 3 или 4;
n равно 0, 1, 2 или 3;
А представляет галоген;
Х представляет кислород;
R1 выбран из водорода, (С1-C6)-алкоксикарбонила и (С6-C14-арилоксикарбонила, в которых все арильные группы незамещены или замещены (С1-C6)-алкокси;
R2 выбран из водорода, (С1-C6)-алкила, (С6-C14)-арила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, R20-(C1-C6)-алкила, R20-(C6-C14)-арила и R20-(C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, в котором R20 выбран из гидроксикарбонила, аминокарбонила;
R3 выбран из водорода, циано, гидрокси и (С1-C6)-алкила;
R4 выбран из (C1-C6)-алкила, (С6-C14)-арила, (С6-C14)-арил-(С1-C4)-алкила, Het и Het-(С1-C4)-алкила, в которых алкильные, арильные и Het группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R5 выбран из водорода, (С1-C6)-алкила, (С6-C14)-арила, (С6-C14)-арил-(С1-C4)-алкила, в которых алкильные и арильные группы незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
либо
R4 и R5 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют насыщенное или ненасыщенное 5-6-членное кольцо, которое представляет собой карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 одинаковых кольцевых гетероатома, выбранных из азота и кислорода, и которое может быть конденсировано с одной или двумя насыщенными или ненасыщенными карбоциклическими кольцевыми системами, содержащим от 5 до 10 кольцевых атомов, в которых получаемая R4(R5)C-группа незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10;
R6 выбран из водорода, гидрокси;
R10 выбран из (C1-C6)-алкила, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкила, (C1-C8)-алкокси, (C6-C14)-арил-(C1-C4)-алкокси, (С6-C14)-арилокси, (C6-C14)-арила, Het, трифторметокси, трифторметила, галогена, оксо, гидрокси, амино, (С1-C6)-алкилкарбониламино, аминокарбониламино, (С6-C14)-арилкарбониламино, Het-карбониламино, (C1-C8)-алкилкарбонила, (C6-C14)-арилкарбонила, (C1-C8)-алкиламинокарбонила, (C6-C14)-ариламинокарбонила, Het-аминокарбонила, (С1-C8)-алкоксикарбонила, нитро, амидино, (С1-C8)-алкиламино, ди-((С1-C8)-алкил)амино, гидроксикарбонилметокси, (С1-C8)-алкилсульфонила, (C6-C14)-арилсульфонила, (С1-C8)-алкилсульфониламино, (С6-C14)-арилсульфониламино, (С6-C14)-арил-(С1-C4)-алкилсульфониламино, Het-сульфониламино и Het-(C1-C4)-алкилсульфониламино, в которых (С1-C6)-алкилкарбониламино, представляющее R10,незамещен или замещен в алкильной группе аминогруппой;
в которых все арильные и Het группы в группе R10 незамещены или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из галогена, нитро, оксо, гидрокси, (C1-C8)-алкила, (С1-C8)-алкокси, (С6-C14)-арилокси, (С6-C14)-арила, циано, трифторметокси, (С1-C8)-алкилсульфонила, (C1-C8)-алкоксикарбонила, аминокарбонила, амино, (С1-C8)-алкиламино, ди-(C1-C8)-алкил)амино, (С1-C8)-алкилкарбониламино, при условии, что когда заместитель R10 связан с алкильной группой, он не может представлять (С1-C8)-алкоксикарбонил, (С1-C8)-алкиламинокарбонил, и что когда заместитель R10 связан с алкильной группой, он не может представлять (C1-C8)-алкил, замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из (С1-C8)-алкоксикарбонила;
Het представляет остаток насыщенной или ненасыщенной, моноциклической или бициклической 5-6-членной гетероциклической кольцевой системы, содержащей 1 или 2 одинаковых или различных кольцевых гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы;
в виде отдельных стереизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
2. Соединение формулы I по п.1, где R1 представляет водород или (C1-C4)-алкоксикарбонил, в виде отдельных стереоизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
3. Соединение формулы I по п.1 или 2, где R2 представляет водород, в виде отдельных стереоизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
4. Соединение формулы I по любому из пп.1-3, где n равно 0, R3 представляет водород, R5 представляет метил, этил или фенил, где фенильная группа незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10, в виде отдельных стереоизомеров и его физиологически приемлемые соли.
5. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где m равно 0, в виде отдельных стереоизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
6. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где n равно 0, в виде отдельных стереоизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
7. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R1 представляет собой водород, в виде отдельных стереоизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
8. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R3 представляет собой водород, в виде отдельных стереоизомеров и их смесей и его физиологически приемлемые соли.
9. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R4 представляет собой фенил, где фенильная группа незамещена или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями R10, в виде отдельных стереоизомеров и его физиологически приемлемые соли.
10. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R5 представляет собой метил или этил.
11. Способ получения соединения формулы I по любому из пп.1-10, включающий последовательное взаимодействие соединения формулы II с соединением формулы III и затем с соединением формулы IV с образованием мостика (тио)мочевины между группами G1 и G2 в формулах II и III, а также амидной связи между группой COZ в формуле II и группой NH2 в формуле IV:
где либо G2 выбран из изоцианато, (С1-C6)-алкоксикарбониламино и азолил-N-карбониламино, где указанные группы содержат группу R6, a G1 представляет NH2, либо G1 выбран из изоцианато, (С1-C6)-алкоксикарбониламино и азолил-N-карбониламино, G2 представляет NHR6, Z в соединении формулы III представляет гидрокси или нуклеофильнозаместимую уходящую группу, R0 означает в соединении формулы II цианогруппу, которую после взаимодействия с соединением формулы II или с соединением формулы III переводят в карбамимидоильную группу NH2-C(=NH) и при необходимости ацилируют с получением R1NH-C(=NH)-группы, и m, n, A, R1, R2, R3, R4, R5 и R6 имеют значения, указанные в пп.1-10, в которых функциональные группы при необходимости защищены, с последующим снятием защиты.
12. Фармацевтическая композиция, обладающая действием ингибитора фактора VIIa, включающая по меньшей мере одно соединение формулы I и/или его физиологически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
13. Соединение формулы I по любому из пп.1-10 и/или его физиологически приемлемая соль, обладающая действием ингибитора фактора VIa.
14. Соединение формулы I по любому из пп.1-10 и/или его физиологически приемлемая соль для получения лекарства, пригодная для ингибирования или снижения свертывания крови или воспалительной реакции либо для использования при лечении сердечно-сосудистых нарушений, тромбоэмболических заболеваний или рестенозов.
