Средства для предотвращения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки

 

Изобретение относится к медицине, к средству для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, таких как пролиферативная витреоретинопатия, и включает в качестве активного ингредиента N-(3,4-диметоксициннамоил) антраниловую кислоту формулы I или ее фармацевтически приемлемую соль. Средство обладает повышенной эффективностью. 4 с. и 1 з.п.ф-лы, 1 табл.

Данное изобретение относится к фармацевтической композиции, которую применяют в качестве средства для предупреждения или лечения болезней, связанных с повышенной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

В частности, данное изобретение относится к средству для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, которое включает в качестве активного ингредиента N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловую кислоту (общее название Траниласт), представленную формулой или ее фармацевтически приемлемую соль.

В данном изобретении в качестве болезни, связанной с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, можно привести пролиферативную витреоретинопатию.

Существующий уровень техники При ретинопексии, выполненной хирургически против отсдоения сетчатки, указывают на пролиферативную витреоретинопатию, которая известна как болезнь, связанная с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, как на причину ухудшающегося прогноза. В настоящее время единственным средством для лечения такой пролиферативной витреоретинопатии является хирургия стекловидного тела. В данных обстоятельствах прогноз сохранения зрения даже после хирургии не всегда благоприятный. Хорошо известно, что пролиферация эпителиальных пигментных клеток сетчатки играет важную роль при возникновении и развитии такой пролиферативной витреоретинопатии. Многие исследователи изучали ингибиторное действие различных лекарственных средств на пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки (Japanese Review of Clinical Ophthalmology, Vol. 9, pp. 1886-1890 (1993); Japanese Review of Clinical Ophthalmology, Vol. 9, pp. 2030-2034 (1993)).

С другой стороны, технический прогресс в хирургии стекловидного тела привел в результате к заметному повышению процента вылечившихся при отслоении сетчатки. Однако говорят, что максимальный процент вылечившихся составляет 92-94%. Считают, что причиной этому является пролиферативная витреоретинопатия, а именно пролиферация эпителиальных пигментных клеток сетчатки. Поэтому для повышения процента вылечившихся при ретинопексии в случае отслоения сетчатки и для предупреждения или лечения пролиферативной витреоретинопатии необходимо создание новых лекарств, обладающих исключительным ингибиторным действием на чрезмерную пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

Траниласт широко применяют в качестве лекарственного средства при лечении аллергических заболеваний, таких как бронхиальная астма, аллергический ринит, атопический дерматит и аллергические конъюктивиты, а также при лечении кожных заболеваний, таких как келоид и гипертрофический рубец. Например, известно, что Траниласт обладает ингибиторным действием на выделение химического медиатора, происходящее в результате аллергической реакции, а также на чрезмерное накопление коллагена фибробластными клетками в кожных тканях и чрезмерную пролиферацию клеток гладкой мускулатуры венечных сосудов сердца.

Однако нигде нет данных, что Траниласт подавляет пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки и что его используют в качестве средства для предупреждения или лечения пролиферативной витреоретинопатии.

Описание изобретения Данное изобретение относится к средству для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, которое включает в качестве активного ингредиента N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловую кислоту, представленную формулой или ее фармацевтически приемлемую соль.

Данное изобретение относится к способу предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, который включает применение N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловой кислоты формулы I или ее фармацевтически приемлемой соли.

Данное изобретение относится к применению N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловой кислоты формулы I или ее фармацевтически приемлемой соли для производства фармацевтической композиции для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

Кроме того, данное изобретение относится к применению N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловой кислоты формулы I или ее фармацевтически приемлемой соли в качестве вещества для предупреждения или лечения болезней, связанных с повышенной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

Авторы настоящего изобретения работали над поиском соединений, обладающих ингибиторным действием на чрезмерную пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки. В результате обнаружили, что Траниласт обладает заметным ингибиторным действием на пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки и поэтому чрезвычайно подходит в качестве средства для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

Соответственно авторы данного изобретения утверждают, что Траниласт заметно подавляет пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки в тесте, исследующем ингибиторное действие на пролиферацию при использовании культуры ин витро эпителиальных пигментных клеток сетчатки крысы.

Как следствие Траниласт обладает отличным ингибиторным действием на пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки и поэтому является соединением, пригодным в качестве средства для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

Поэтому фармацевтические композиции, которые пригодны как средства для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, можно получить, включая в качестве активного ингредиента Траниласт или его фармацевтически приемлемую соль.

Известны различные способы получения Траниласта и его фармацевтически приемлемых солей, которые являются активными ингредиентами, и их легко можно получить способами, описанными в литературе и т.п. (Публикации японских заявок на патент (kokoku) Sho. 56-40710; Sho. 57-36905; Sho. 58-17186; Sho. 58-48545; Sho. 58-55138; Sho. 58-55139; Hei. 1-28013; Hei. 1-50219; Hei. 3-37539 и т.д.).

Примерами фармацевтически приемлемых солей Траниласта являются соли с неорганическими основаниями, такие как соль натрия и соль калия, соли, образованные с органическими аминами, такими как морфолин, пиперидин, пиперазин и пирролидин, и соли, образованные с аминокислотами.

Когда фармацевтические композиции данного изобретения применяют в практике лечения, их можно применять орально. Предпочтительно местное применение в виде глазных капель, глазных мазей и инъекций.

Например, глазные капли можно приготовить, растворяя Траниласт или его фармацевтически приемлемую соль с основным веществом при нагревании в соответствующем количестве стерильной воды, в которой растворяют поверхностно, активное вещество, добавляя поливинилпирролидон и необязательно добавляя подходящие фармацевтические добавки, такие как консервант, стабилизирующий агент, буфер, вещество, обеспечивающее изотоничность, антиоксидант и средство, улучшающее вязкость для полного растворения.

Например, глазные мази можно соответственно приготовить, используя основы, которые обычно применяют в глазных мазях. Глазные мази можно также применять в виде термически обратимо желатинизирующихся водных фармацевтических композиций.

Например, инъекции можно осуществлять прямо в пораженную ткань, такую как стекловидное тело или соседние с ним ткани, используя при этом тонкую иглу, а также можно применять в виде внутриглазного перфузата.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения можно применять в виде препарата длительного выделения. Например, препарат Траниласт заключают в шарик (гранулу) или микрокапсулу из полимера длительного выделения в качестве препарата длительного выделения и шарик (гранулу) или микрокапсулу вживляют в ткани, которые нужно обработать. В качестве полимеров длительного выделения можно привести сополимер этилена и винилацетата, полигидрометакрилат, полиакриламид, поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, полимер молочной кислоты, сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты и т.п., предпочтительно в качестве биодеградируемых полимеров можно привести такой, как полимер молочной кислоты и сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты.

Когда фармацевтические композиции данного изобретения применяют в практике лечения, дозу Траниласта или его фармацевтически приемлемой соли в качестве активного ингредиента определяют соответственно в зависимости от возраста, степени развития симптомов у данного пациента, терапевтической оценки и т. п. Дозу необходимо назначать в соответствующей концентрации, чтобы она обладала лечебным действием. Например, в случае глазных капель предпочтительно закапывать капли в глаза от одного до нескольких раз в день по одной или несколько капель в концентрации, равной 0,001-2 вес.%.

Лучший вариант осуществления изобретения Данное изобретение более детально поясняют следующие примеры.

Пример Тест, подтверждающий ингибиторное действие на пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки 1. Изолирование и культивирование эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

Изолирование и культивирование эпителиальных пигментных клеток крыс осуществляли, как это описано Sakagami et al. (Ophthalmic Res., Vol. 27, pp. 262-267 (1995)). Шестидневных крыс Brown Norway анестезировали путем интраперитональной инъекции пентобарбитала и затем удаляли глаза. После погружения для стерилизации в 70% этанол глаза промывали в уравновешенном растворе солей Хэнка (HBSS). Затем их инкубировали в течение 15 минут при 37^oС в 0,1% растворе протеиназы К. После инкубации глазные яблоки промывали HBSS и помещали в чашку, содержащую смесь (1:1) среды Игла, модифицированной Дулбекко (ДМЕМ) и среды F12 Хэма (HF12), дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой (ФБС). У каждого глаза делали кольцевой надрез ниже ora serrata. Затем удаляли и выбрасывали передний сегмент, хрусталик и стекловидное тело. Под стереоскопическим микроскопом отделяли от сетчатки эпителиальные пигментные клетки сетчатки. Полоски эпителиальных пигментных клеток сетчатки промывали в среде HBSS, не содержащей кальция и магния. Затем полоски эпителиальных пигментных клеток сетчатки инкубировали в 0,1% растворе трипсина в течение 7 минут при 37^oС. Пастеровскую пипетку использовали для изолирования клеток. Изолированные клетки культивировали в смеси (1:1) ДМЕМ и HF12, дополненной 10% ФБС, и использовали в дальнейших экспериментах.

2. Приготовление исследуемых лекарственных средств
Исследуемые лекарственные средства получали, растворяя Траниласт в диметилсульфоксиде (ДМСО) и разбавляя раствор средой для культуры эндотелиальных клеток до конечной предписанной концентрации. Конечная концентрация ДМСО была 0,5%.

3. Экспериментальный метод
Клеточную суспензию 200 мкл, содержащую 410⁴ клеток, вносили в каждую лунку на покрытом коллагеном планшете с 96 лунками и культивировали при 37^oС в атмосфере 5% CO₂ в воздухе. Через один день среду заменяли и культивировали в 200 мкл смеси (1:1) среды ДМЕМ и среды HF12, дополненной 10% ФБС, содержащей различные концентрации Траниласта. Через 4 дня в каждую лунку добавляли 20 мкл Аламара Синего, реактива для анализа клеточной пролиферации. Через 4 часа инкубации с помощью иммуносчетчика измеряли поглощение при 620 нм и подсчитывали число клеток.

4. Оценка действия
Число клеток в необработанной группе принимали за 100% и вычисляли процент ингибирования клеточной пролиферации в группах, обработанных различными концентрациями Траниласта.

5. Результаты
Как показывает таблица, Траниласт заметно ингибировал пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки в зависимости от примененной концентрации.

Промышленное применение
Фармацевтическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента Траниласт или его фармацевтически приемлемую соль, обладает заметной ингибиторной активностью на пролиферацию эпителиальных пигментных клеток сетчатки, и поэтому крайне подходит в качестве вещества для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, таких как пролиферативная витреоретинопатия.

Формула изобретения

1. Средство для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, включающее в качестве активного ингредиента N-(3,4-диметоксициннамоил) антраниловую кислоту формулы

или ее фармацевтически приемлемую соль.

2. Средство для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, по п.1 в форме глазных капель или глазных мазей.

3. Способ предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки, включающий введение N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловой кислоты формулы

или ее фармацевтически приемлемой соли в форме глазных капель или глазных мазей.

4. Применение N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловой кислоты формулы

или ее фармацевтически приемлемой соли для изготовления фармацевтической композиции для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

5. Применение N-(3,4-диметоксициннамоил)антраниловой кислоты формулы

или ее фармацевтически приемлемой соли в качестве средства для предупреждения или лечения болезней, связанных с чрезмерной пролиферацией эпителиальных пигментных клеток сетчатки.

РИСУНКИ

Рисунок 1