Аллерген для диагностики чувствительности к укусам комаров

 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и касается препарата для диагностики чувствительности к укусам комаров. Аллерген представляет собой забуференный водно-солевой раствор белково-полисахаридных комплексов с активностью 5000-2000 PNU в 1 мл с рН 6,6-7,5, полученный из комаров вида Aedes aegypti экстракцией буферным раствором при рН 8,2. Техническим результатом является создание высокоочищенного аллергена для специфической диагностики аллергии на укусы комаров. 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и касается препарата для диагностики чувствительности к укусам комаров.

Известен аллерген, предназначенный для диагностики чувствительности к укусам комаров, выделенный из комаров вида Aedes aegypti, полученный путем экстракции насекомых щелочным буфером (карбонатным) при рН 8,2. Аллерген представляет собой прозрачную светло-коричневую жидкость, рН 7,2, содержащую 10000 PNU в 1 мл раствора (Адо А.Д. и др "Аллергия к комарам", Ж. Иммунология 1988, 6, стр. 48). Однако данный аллерген не является очищенным и содержит балластные вещества, так как при его получении не использованы центрифугирование и хроматографическое разделение экстракта, что приводит к побочными эффектам при его применении в клинике. Для экстракции известного аллергена использовали карбонатный буфер, который не позволяет получить максимальный выход аллергенного белка.

Задачей настоящего изобретения является создание высокоочищенного аллергена без риска наведения реакций анафилактического типа при его применении в условиях специфической диагностики аллергии к укусам комаров.

Для решения поставленной задачи предложен аллерген для диагностики чувствительности к укусам комаров, выделенный из комаров вида Aedes aegypti экстракцией буферным раствором при рН 8,2, представляющий собой забуференный водно-солевой раствор белково-полисахаридных комплексов с активностью 5000-20000 PNU и имеющий рН 6,6-7,5.

Аллерген выделен из сухих обезжиренных эфиром комаров вида Aedes aegypti путем экстракции щелочным буферным раствором при рН 8,0-8,2. Полученный экстракт центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 минут на рефрижераторной центрифуге при температуре 2-8^oС. После центрифугирования надосадочную жидкость аллергенного экстракта отбирают. В качестве консерванта используют фенол. Аллерген представляет собой прозрачную жидкость от светло-желтого до коричневого цвета, без посторонних включений осадка. 1 мл аллергена содержит белкового азота 100002000 PNU/ мл, содержание фенола (0,30,1)%.

Иммунобиологические свойства. Аллерген вызывает положительную местную реакцию в виде волдыря и гиперемии при постановке кожных проб у лиц, имеющих повышенную чувствительность на укусы комаров.

Аллерген предназначен для специфической диагностики повышенной чувствительности на укусы комаров. Для специфической диагностики используют кожный тест методом скарификации. Аллерген наносят на кожу в объеме 0,1 мл (одна капля) на среднюю треть ладонной поверхности предплечья, дезинфицированную 70%-ным этиловым спиртом. Одновременно с аллергеном в качестве контроля наносят на кожу по одной капле тест-контрольную жидкость (негативный контроль) и 0,01%-ный раствор гистамина (позитивный контроль). Расстояние между пробами 30-40 мм. Затем стерильными скарификаторами отдельными для каждого препарата и для каждого больного делают царапины через капли длиной 5 мм.

0,01%-ный раствор гистамина готовят путем разведения гистамина-дигидрохлорида (1 часть) 0,9%-ным раствором натрия хлорида изотонического для инъекций (9 частей).

Реакция кожи на тест-контрольную жидкость должна быть отрицательной. При положительной реакции на тест-контрольную жидкость реакцию на аллерген не учитывают. Реакция кожи на гистамин должна быть положительной. При отрицательной реакции на гистамин реакцию на аллерген не учитывают. Антигистаминные препараты отменяются за 2-3 дня до кожного тестирования. При сомнительных результатах кожную пробу можно повторить через 2-3 дня.

На введение аллергена на коже возникает гиперемия и волдырь (папула) через 20 минут (реакция немедленного типа), и гиперемия и инфильтрат через 24 часа (реакция замедленного типа), которые регистрируются согласно схеме (см. табл. 1 и 2).

Аллерген выпускают в комплекте, включающем 1 флакон с аллергеном (4,5 мл) и 1 флакон с тест-контрольной жидкостью (4,5 мл). Срок годности аллергена 2 года. Хранят аллерген в темном помещении с относительной влажностью не более 60%, при температуре 62^oС.

Аллерген для диагностики чувствительности к укусам комаров разрешен к применению Министерством здравоохранения РФ.

Формула изобретения

Аллерген для диагностики чувствительности к укусам комаров, выделенный из комаров вида Aedes aegypti экстракцией буферным раствором при рН 8,2, отличающийся тем, что аллерген представляет собой забуференный водно-солевой раствор белково-полисахаридных комплексов с активностью 5000-2000 PNU в 1 мл, имеющий рН 6,6-7,5.

РИСУНКИ

Рисунок 1