Высокомеченный тритием циклоспорин а

Авторы патента:

C07K7/64 - циклические пептиды, содержащие только нормальные пептидные связи

C07B59 - Введение изотопов элементов в органические соединения

A61K51 - Препараты, содержащие радиоактивные вещества, для использования в терапии или для исследований на живом организме

A61K38/13 - циклоспорины

Использование: в органической химии, в медикобиологических исследованиях. Сущность изобретения: получено новое высокомеченное тритием физиологически активное соединение циклоспорин А формулы I.

Изобретение относится к области органической химии и может быть использовано при медикобиологических исследованиях.

Современные методы исследования физиологически активных соединений требуют использования их в виде высокомеченных производных.

Циклоспорин A - вещество общей формулы

(The Merck Index an encyclopedia of chemicals druds and biolodicals Eleventth Edition and 12-th 1989-1996 NJ U.S.A.), является физиологически активным соединением. Циклоспорин A не описан в виде высокомеченного тритием производного.

Задачей, решаемой настоящим изобретением, явилось расширение ассортимента высокомеченных физиологически активных соединений. Задача решена тем, что впервые получен высокомеченный третием циклоспорин A.

Ниже приведены примеры, иллюстрирующие изобретение.

Пример 1. В реакционную ампулу помещена 12,1 мг циклоспорина A, 30,8 мг 5% PdO/Al₂O₃, 52,0 мг PdO. Напускали газообразный тритий до давления 400 гПа, и при охлаждении жидким азотом средней части ампулы смесь нагревали при 80^oC в течение 10 мин. При этом образующаяся при восстановлении окиси палладия стопроцентная тритиевая вода конденсировалась в средней части ампулы. Далее зону, содержащую активированный катализатор, вакуумировали при температуре 20^oC 10 мин. При этом основная часть адсорбированного на катализаторе трития удалялась и не гидрировала двойные связи циклоспорина A. Затем реакцию вели следующим образом. Снимали охлаждение со средней части ампулы и охлаждали жидким азотом нижнюю часть ампулы. При этом тритиевая вода перегонялась в смесь катализатора и вещества, ампулу снимали с установки, в реакционную ампулу впрыскивали 100 мкл смеси диоксана с триэтиламином (9:1), ампулу запаивали и реакцию вели при 150^oC 60 мин. Затем содержимое ампулы замораживали жидким азотом, ампулу вскрывали, катализатор отфильтровывали и промывали метанолом (5х0,5 мл). Общая радиоактивность реакционного раствора после изотопного обмена 13,2 Ки, без тритиевой воды - 0,7 Ки, после ТСХ - 140 мКи, после первой ВЭЖХ - 45 мКи, после второй ВЭЖХ - 8 мКи (радиохимическая чистота выше 97%). Выход меченого препарата 60 - 65%, с молярной радиоактивностью - 1 Ки/ммоль.

Меченый препарат очищали хроматографическими методами: ТСХ: (А) Ацетон-этилацетат - 50% уксусная кислота (2:1:5) Rf 0,82, (Б) трет-бутанол-метилэтилкетон-вода-аммиак (6,6: 5,0: 2,5:2,5) Rf (0,91; (В) бензол-диоксан (4: 1) Rf 0,36; (Г) хлороформ-диоксан (4:1) Rf 0,65; (Д) гексан-изо-пропиловый спирт (4:1) Rf 0,53. ВЭЖХ: (Ж) Saporon SGX, 5 мкм, 3,3х150 мм, метанол-50 мМ аммонийфосфатный буфер (pH 4,5) (85:15), V - 2 мл, 60^oC, время удержания - 15,41 мин; (И) Silasorb C₁₈, 13 мкм, 10х250 мм, метанол-вода-уксусная кислота (85:15:0,1), V - 2 мл, 60^oC, время удерживания - 15,85 мин; (К) Nucleosil C₁₈, 5 мкм, 2х75 мм, метанол - 50 мМ буфер (pH 2,7) (82:18), V - 0,1 мл/мин, 50^oC, время удерживания - 9,05 мин; (М) Nucleosil C₁₈, 5 мкм, 2х75 мм, метанол-буфер (pH 4,5) (87:13), V - 0,1 мл/мин, 60^oC, время удерживания - 5,52 мин.

Пример 2. В реакционную ампулу помещали 12,4 мг циклоспорина A, 31 мг 5% PdO/Al₂O₃, 51,7 мг PdO. Напускали газообразный тритий до давления 450 гПа, и при охлаждении жидким азотом средней части ампулы смесь нагревали при 70^oC в течение 10 мин. При этом образующаяся при восстановлении окиси палладия стопроцентная тритиева вода конденсировалась в средней части ампулы. Далее зону, содержащую активированный катализатор, вакуумировали при температуре 25^oC 5 мин. При этом основная часть адсорбированного на катализаторе трития удалялась и не гидрировала двойные связи циклоспорина A. Затем реакцию вели следующим образом. Снимали охлаждение со средней части ампулы и охлаждали жидким азотом нижнюю часть ампулы. При этом тритиевая вода перегонялась в смесь катализатора и вещества, ампулу снимали с установки, в реакционную ампулу впрыскивали 100 мкл смеси диоксана с триэтиламином (9:1), ампулу запаивали и реакцию вели при 180^oC 40 мин. Затем содержимое ампулы замораживали жидким азотом, ампулу вскрывали, катализатор отфильтровывали и промывали метанолом (5х0,5 мм). Общая радиоактивность реакционного раствора после изотопного обмена 13 Ки, без тритиевой воды - 0,8 Ки, после ТСХ - 180 мКи, после первой ВЭЖХ - 60 мКи, после второй ВЭЖХ - 30 мКи (радиохимическая чистота выше 97%). Выход меченого препарата 50 - 55%, с молярной радиоактивностью - 4 Ки/ммоль.

Таким образом, впервые получен высокомеченный тритием циклоспорин A.

Формула изобретения

Высокомеченный тритием циклоспорин А формулы

Линейные или циклические олигопептиды, обладающие сродством к опиатным рецепторам, фармацевтическая композиция // 2131438

Изобретение относится к новым олигопептидам, обладающим сродством к опиатным рецепторам, которые могут быть линейными или циклическими пентапептидами с первичной последовательностью аминокислот в скелете Тир-Х-Фен-Лей-Z, где X и Z обозначают аминокислоты или производные аминокислот и/или аналоги и где X и Z могут быть ковалентно связаны, образуя гетероциклическую структуру, в которой Z выбирают из Цис, Глу, Глн или производных Глу и Глн; X выбирают из аминокислот или аминокислотных аналогов, таких как Сер, Глу, D-Ала, D- или Z-2,4-диаминомасляная кислота, АМЦК, Цис или их производные

Циклопептиды, способ их получения, содержащие их фармацевтические композиции и способ их получения // 2130030

Изобретение относится к новым циклопептидам формулы (I): циклo-(Arg-B-Asp-X-Y), где B, Х и Y имеют указанное в п

Циклопептиды или их соли, способ их получения, фармацевтические композиции и способ их получения, способ лечения // 2129563

Изобретение относится к новым соединениям формулы (I) цикло-(А-В-С-Д-Аrg), где А-Д-Val; B - L- или Д-Phe; C - L-Asp, Д-Asp (O-C1-C4-алкил) и Д-Gly или Ala, при этом по меньшей мере два из указанных аминокислотных остатков находятся в Д-форме, а также их соли

Производные циклических пептидов или их фармацевтически приемлемые соли, способ получения, фармацевтическая композиция // 2129562

Изобретение относится к циклическим пептидным противогрибковым средствам

Циклические пептиды или их аддитивные соли кислоты, композиция, проявляющая противогрибковую и антипневмоцистную активность, способ лечения грибковых инфекций // 2122548

Изобретение относится к некоторым аза циклогексапептидным соединениям, имеющим атом азота, присоединенный к циклогексапептидному кольцу по 5-му атому углерода компонента 4-гидрокси-орнитина ("C-5-орн"), формулы I, где R1-H или OH; R2 - H, CH3 или OH; R3 - H, CH3, CH2CN, CH2CH2NH2 или CH2CONH2; RI - C9-C21-алкил, C9-C21-алкенил, C1-C10-алкоксифенил или C1-C10алкоксинафтил; RII - H, C1-C4-алкил, C3-C4-алкенил, (CH2)2-4OH, CO(CH2)1-4NH2, (CH2)2-4NRIVRV; RII и RIII, взятые вместе, -(CH2)4-, -(CH2)5-, -(CH2)2O(CH2)2-, -(CH2)2NH(CH2)2-; RIV - H или алкил; RV - H или алкил и их аддитивные соли

Циклопептид или его фармацевтически приемлемая соль, способы получения и фармацевтическая композиция // 2108342

Изобретение относится к новому полипептидному соединению и к его фармацевтическим приемлемой соли

Способ получения кристаллического циклоспорина в несольватированной орторомбической форме // 2002754

Способ получения вос-тоциновой кислоты // 514812

Высокомеченные тритием коэнзим а или ацетил-коэнзим а // 2143416

Изобретение относится к органической химии и может найти применение в биохимии, в медицине, в медикобиологических исследованиях

Высокомеченный тритием метиловый эфир солянокислого (n- нитро)-аргинина // 2136641

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в биохимии и медицине

Способ получения равномерно изотопомодифицированных природных l аминокислот // 2100434

Изобретение относится к области биотехнологии и органической химии, к способам получения изотопомодифицированных природных соединений, а именно: L--аминокислот, и может найти применение в экспериментальной биологии, медицине, ветеринарии, сельском хозяйстве

Способ получения солей четвертичных аминов, содержащих меченый тритием ароматический радикал при атоме азота // 2089532

Способ получения меченых тритием алифатических - галоидкислот // 2089531

Изобретение относится к органической химии и может найти применений в исследованиях по биологии и медицине

Высокомеченный тритием алпразолам и способ его получения // 2083579

Способ получения меченных тритием алифатических галоидкислот с галоидным заместителем при углероде, начиная от c*003 // 2083549

Способ получения кратномеченных тритием по двойным связям полииновых жирных кислот // 2055833

Способ получения хлорофилла, меченного радиоактивным изотопом c14 // 2039728

Изобретение относится к технологии получения радиоактивных органических соединений, в частности к способам введения радиоактивной метки в природные соединения, и может быть использовано в научно-исследовательских лабораториях для изучения метаболизма и биологической активности хлорофилла и продуктов его биотрансформации

Способ получения 5-(метил, 63 -н)-2,4-(1н,3н) пиримидиндиона // 2035443

Изобретение относится к области органической и биологической химии и касается приемов по получению меченного тритием тимина, который может найти применение в биохимических исследованиях и в экспериментальной медицине и ветеринарии, в селекционных работах

Способ лечения, антитела, гибридома // 2139731

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии и иммунологии, и касается лечения В-клеточной лимфомы

Способ лечения, антитела, гибридома // 2139731