2-аминоалкил-5-аминоалкиламинозамещенные изохиноиндазол-6- (2н)-оны, способ их получения, фармацевтическая композиция и способ лечения опухоли

 

Изохинолино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он, изохинолино[5,6,7-cd]-6(2Н)-он или гидроксильное производное из общей формулы I, где R - водород, один из Х и Y-атом углерода, а другой - атом азота; А и В, одинаковые или разные, выбирают из группы, содержащей С_1-10алкил или С_2-10алкил, замещенный гидроксилом, или их аддитивная соль кислоты. Соединения проявляют противоопухолевую активность. 6 с. и 5 з.п.ф-лы, 4 ил., 2 табл.

Изобретение касается азаантрапиразолов, а именно 2-аминоалкил-5-аминоалкиламинозамещенные изохино[8,7,6-cd] индазол-6-(2Н)-онов и 2-аминоалкил-5-аминоалкиламинозамещенных изохино[5,6,7-cd]индазол-6-(2Н)-онов. Эти соединения показывают противоопухолевую активность.

Сообщается о некоторых 1,4-биc[(aминoaлкил)aминo]aнтpaцeн- 9,10-дионах, проявляющих противоопухолевую активность в клинических опытах. Особый интерес представляют аметантрон, 1,4-бис-{[2-(2- гидроксиэтиламино)этил]амино}антрацен-9,10-дион, и митоксантрон, 5,8-дигидрокси-1,4-бис{[2-(2-гидроксиэтиламино)этил] - амино}антрацен-9,10-дион. [Zee-Cheng et al., J. Med. Chem. 21, 291-294 (1978); Cheng et al., "Progress in Medicinal Chemistry", Ellis G. P. znd West, G. B. , eds.; Elsevier: Amsterdam, 1983, Vol. 20, pp 83 и ссылки, указанные там]. Митоксантрон является онколитическим агентом широкого спектра действия, чья активность подобна активности антрациклинового доксорубицина. Клинические опыты показывают, что митоксантрон обладает особенно перспективной активностью для лечения запущенного рака молочной железы, острой лейкемии и лимфомы [Legha, Drugs of Today, 20, 629 (1984)]. Хотя изучение на животных показывает сниженную кардиотоксичность в сравнении с доксорубицином, для митоксантрона также наблюдают некоторую клиническую кардиотоксичность, главным образом у пациентов, получавших предварительно доксорубицин (R. Stuart Harris et al., Lancet, 219, (1984) и ссылки, указанные там). Аметантрон, по сообщениям, на животных приблизительно в 10 раз менее сильнодействующий и менее кардиотоксичный, чем митоксантрон. Так как замедленная токсичность наблюдается только для митоксантрона после введения двух препаратов внутрибрюшинно не имеющим опухолей половозрелым крысам в равноэффективных антиопухолевых дозах, то предполагается, что наличие в митоксантроне 5,8-дигидроксигрупп причастно к замедленной смерти [Corbett еt al., Cancer Chemother. Pharmacol. 6, 161, (1981)].

Кроме того, и митоксантрон и аметантрон имеют заметную миелодепрессивную токсичность и оба соединения проявляют перекрестную резистентность к клеточным гистотипам, обнаруживающим резистентность против доксорубицина, медиированную повышенной экспрессией гликопротеина P. Такая резистентность, которая называется множественной лекарственной устойчивостью, включает ряд противоопухолевых антибиотиков, среди которых амакрин и производные подофиллотоксина, эта резистентность является одной из основных причин неспособности использования таких антибиотиков для лечения твердых опухолей.

При попытке преодолеть вышеуказанные недостатки получены некоторые хромофор-модифицированные антрацендионы. Например, заявка ЕР 103381 описывает 2-аминоалкил-5-аминоалкиламинозамещенные антра[1,9-cd] пиразол-6-(2Н)-оны (антрапиразолы), которые обладают противоопухолевой активностью. Противоопухолевая активность вышеназванных соединений в ряде доклинических моделей сообщается H.D. Hollis Showalter et al. [J. Med. Chem. 30, 121-131, (1987)]. Однако, антрапиразолы не лишены токсичного побочного действия, при тяжелой лейкопении (W.H.O. степень 3 и 4) и нейтропении (W.H.O. степень 4) дозы антрапиразола СI-941 в клинических опытах фазы I и фазы II ограничиваются [I.E. Smith et al. , J. Clin. Oncol. 9, 2141-2147, (1991)]. Кроме того, заметная нефротоксичность наблюдается при обработке крыс СI-941 [D. Campling and M.E. C. Robbins, Nephrotoxicity, Peter H. Dekker Bach. editor, pp 345-352 (1991) New York; смотри Chemical Abstreets 116: 294n, (1992)]. Эти авторы предполагают, что повреждение почек может быть клинической проблемой при лечении антрапиразолом.

Поэтому поиск новых активных аналогов все еще очень желателен.

Мы обнаружили, что введение одного атома азота в положение 9 или в положение 8 вышеприведенных антра[1,9-cd] пиразол-6-(2H)-онов дает 2-аминоалкил-5-аминоалкиламинозамещенные изохино[8,7,6 -cd]индазол-6-(2Н)-оны и 2-аминоалкил-5-аминоалкиламинозамещенные изохино[5,6,7-cd] индазол-6-(2Н)-оны, которые обладают заметной противоопухолевой активностью.

Соединения изобретения имеют формулу (I) где R является водородом или гидрокси; один из X и Y является атомом углерода, а другой атомом азота, с учетом того, что когда Y - азот, R является водородом; A и B являются одинаковыми или различными и выбираются из группы, включающей С₁-С₁₀алкил или [фенилалкил]; С₂-С₁₀алкил, обладающий одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из OR₁ и NR₂R₃; С₂-С₁₀алкил, прерываемый одним или двумя атомами кислорода или одной -NR₄-группой, и вышеназванный С₂-С₁₀алкил необязательно замещен одной или двумя гидрокси (ОН) или NR₂R₃-группами, где R₁ выбирают из группы, включающей водород, С₁-С₆алкил, фенил, [фенилалкил], -S(O₂)R₅, С₂-С₆алкил, необязательно замещенный NR₂R₃, R₂ и R₃ могут быть одинаковыми или различными и их выбирают из группы, содержащей водород, С₁-С₁₀алкил, [фенилалкил], фенил, С₂-С₁₀алкил, замещенный одной или двумя гидроксигруппами (ОН), или R₂ и R₃ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют этилениминное кольцо или 5- или 6-членное ароматическое или неароматическое гетероциклическое кольцо, которое необязательно содержит другой гетероатом, такой как сера, кислород или азот, R₄ выбирают из группы, состоящей из водорода, С₁-С₁₀алкила, С₂-C₁₀гидроксиалкила, С₂-С₁₀алкила, замещенного NR₂R₃ [фенилалкила] , фенила, R₅ выбирают из группы, состоящей из С₁-С₁₀алкила, фенилалкила, в качестве свободных оснований или их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами.

Настоящее изобретение также касается таутомерных форм, отдельных энантиомеров и диастереомеров соединений формулы (I), так же, как и их смесей.

Настоящее изобретение касается также нетоксичных солей соединений формулы (I) с кислотами, пригодными для фармацевтического и ветеринарного использования, таких как соли, полученные при добавлении неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, серная, фосфорная, пирофосфорная кислоты, и/или органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, лимонная, бензойная, молочная, малеиновая, фумаровая, янтарная, винная, глутаминовая, аспарагиновая, глюконовая, аскорбиновая кислоты и другие подобные.

У соединений (I) термин "фенил" означает фенильное кольцо, которое может необязательно содержать один или два заместителя, таких как С₁-С₄алкильные группы, CF₃, атомы галогена, нитро, амино, ацетиламино, формиламино, диметиламино, диэтиламино, гидрокси, метокси и этоксигруппы.

Предпочтительными примерами С₁-С₁₀алкильных групп являются метил, этил, н-пропил, втор-пропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, н-гексил.

Предпочтительными примерами [фенилалкила] являются бензил и 4-метоксибензил. Если в соединениях формулы (I) А или В являются С₂-С₁₀алкилом, прерываемым одним или двумя атомами кислорода или одной -NR₄-группой, и необязательно замещенным одной или двумя гидрокси или -NR₂R₃ группами, то по крайней мере два атома углерода предпочтительно вставляются между вышеназванными атомами кислорода и/или -NR₄- и -NR₂R₃ группами.

Когда в соединениях формулы (I) -NR₂R₃ заместитель является 5- или 6-членным ароматическим или неароматическим гетероциклическим кольцом, которое может содержать другой гетероатом, такой как сера, кислород и азот, предпочтительными примерами вышеназванных гетероциклических колец являются 1-имидазолил, 1-пирролил, 1-тетрагидропирролил, 1-пиразолил, 4-морфолинил, 1-пиперидинил, 1-пиперазинил, 1-(4-метил)пиперазинил и 1-(4-бензил)пиперазинил.

Предпочтительными соединениями изобретения являются соединения формулы (I), где R означает H, X и Y имеют определенные выше значения.

Наиболее предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I), где R означает H, X и Y имеют определенные выше значения и А и B независимо друг от друга выбираются из группы, содержащей остаток формулы -(CH₂)_p-NH₂, где p = 2 или 3; остаток формулы -(CH₂)_p-NR₂R₃, где p определен выше, R₂ и R₃ представляют собой метил; остаток формулы -(CH₂)_p-NR₂R₃, где p имеет определенные ранее значения, R₂ - водород и R₃ - метил; остаток формулы -(CH₂)_p-OH, где p имеет определенные выше значения; остаток формулы -(CH₂)_p-NH-(CH₂)_q-OH, где p и q = 2 или 3 независимо друг от друга.

Конкретные примеры предпочтительных соединений этого изобретения приведены в таблице 1 и имеют следующие химические названия: (1) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил) амино] этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он; (2) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[(3- аминопропил)амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он; (3) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[(2- аминоэтил)амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(4) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-[[2- (метиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(5) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] 5-[[2- (диметиламино)этил]амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(6) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино] этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(7) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[(3- aминoпpoпил)амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(8) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[(2-аминоэтил)амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(9) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-[[2- (метиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(10) 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-[[2-(диметиламино) этил]амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(11) 5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]амино]-2-[2-(диметиламино) этил] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(12) 5-[(3-аминопропил)амино]-2-[2- (диметиламино)этил]изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
(13) 5-[(2-аминоэтил)амино] -2-[2-(диметиламино) этил]изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
(14) 5-[[2-(метиламино)этил] амино] -2-[2-(диметиламино)этил] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(15) 5-[[2-(диметиламино)этил] амино] -2-[2-(диметиламино) этил]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(16) 5-[[2-[(2-гидpoкcиэтил)амино]этил]амино]-2-[2- (диметиламино)этил] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(17) 5-[(3-аминопропил)амино]-2-[2- диметиламино)этил] изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он;
(18) 5-[(2-аминоэтил)амино] - [2-(диметиламино)этил]изохино- [5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он;
(19) 5-[[2-(метиламино)этил] амино] -2-[2- (диметиламино)этил] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(20) 5-[[2-(диметиламино)этил] амино] -2-[2- (диметиламино)этил]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(21) 2-[2-аминоэтил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(22) 2-[2-аминоэтил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[8,7,6- cd]индазол-6(2H)-он;
(23) 2-(2-аминоэтил)-5-[(2-аминоэтил)амино] изохино[8,7,6- cd]индазол-6(2Н)-он;
(24) 2-[2-аминоэтил]-5-[[2-(метиламино)этил]амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(25) 2-[2-аминоэтил] -5-[[2-(диметиламино)этил]амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
(26) 2-(3-аминопропил)-5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(27) 2-[3-аминопропил] -5-[(3- аминопропил)амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(28) 2-[3-аминопропил] -5-[(2-аминоэтил)амино] изохино[8,7,6- cd]индазол-6(2Н)-он;
(29) 2-[3-аминопропил] -5-[[2- (метиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
(30) 2-[3-аминопропил]-5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино [8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
(31) 5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]амино]-2-[3-аминопропил] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(32) 5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] амино] -2-[2- аминоэтил]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(33) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино]этил]амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(34) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[(3-аминопропил)амино]изохино [8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
(35) 2-[(2-метиламино)этил]-5-[(2- аминоэтил)амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(36) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2- (метиламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
(37) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2- (диметиламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2H)-он;
(38) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(39) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[(3-аминопропил)амино]изохино [5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он;
(40) 2-[(2-метиламино)этил[-5-[(2-аминоэтил)амино]изохино [5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(41) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2- (метиламино)этил] амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
(42) 2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-(диметиламино)этил] амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он;
(43) 2-метил-5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино [5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он;
(44) 2-метил-5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино [5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он.

Соединения этого изобретения могут быть получены способом, приведенным на фиг. 1 и включающим реакцию (реакция a) соединения формулы (III)

(IIIa) X = N, Y = C;
(IIIb) X = C, Y = N,
где Z является OTs (OTs означает п-толуолсульфонилоксигруппу) или Cl;
W - фтор или хлор при условии, что Z и W не могут быть одновременно хлором,
с гидразином формулы (IV)
H₂N - NH - B',
где B' имеет те же значения, что и B, приведенные в формуле (I), или B' является группой, которая может превращаться в B с помощью удаления защитных групп для первичных или вторичных аминов, необязательно присутствующих в B',
с образованием соединения формулы (II)

(IIa) X = N, Y = C;
(IIb) X = C, Y = N,
которое затем реагирует (реакция b) с соединением формулы (V)
H₂N - A',
где A' имеет значения, аналогичные значениям A, определенным в формуле (I), или A' является группой, которая может превращаться в A при удалении защитных групп для первичных или вторичных аминов, необязательно присутствующих в A',
с образованием соединений формулы (I')

Когда A' и/или B' отличаются от A и/или B соединения формулы (I') превращаются в соединения формулы (I) с помощью удаления защитных групп для первичных и/или вторичных аминов, необязательно присутствующих в A' и/или B'.

Когда, если требуется, способ, представленный на фиг. 1, выполняется реакцией соединений формулы (IIIa), то могут быть получены соединения изобретения формулы (Ia), где X представляет собой атом азота и Y представляет собой атом углерода. Или же, если требуется, реакцией соединений формулы (IIIb) могут быть получены соединения формулы (Ib).

Защитные группы для первичных и/или вторичных аминов, необязательно присутствующие в A' и/или B', которые полезно используются при получении соединений формулы (I), представляют собой (С₁-С₃)ацилпроизводные (предпочтительно ацетилпроизводные), (С₁-С₄)алкоксикарбонилпроизводные (предпочтительно трет-бутоксикарбонилпроизводные) и (С₇-С₁₀)аралкилоксикарбонилпроизводные (предпочтительно бензилоксикарбонилпроизводные).

В предпочтительном воплощении этого изобретения соединения формулы (I) получают реакцией соединения формулы (III')

с гидразином формулы (IV) с образованием соединения формулы (II')

Соединения формулы (II') затем реагируют с соединением формулы (V) с образованием соединения формулы (I'), затем следует стадия удаления защитных групп для первичных и вторичных аминов, необязательно присутствующих в A' и/или B', с образованием соединения формулы (I).

В другом предпочтительном воплощении этого изобретения соединения формулы (I), где X является углеродом и Y является азотом, предпочтительно получают реакцией соединения формулы (III''):

с гидразином формулы (IV) с образованием соединения формулы (II'')

Соединения формулы (II') затем реагируют с соединением формулы (V) с образованием соединения формулы (I'), с последующим удалением защитных групп для первичных и вторичных аминов, необязательно присутствующих в A' и/или B', с образованием соединения формулы (I), где X является углеродом и Y - азотом.

Реакция соединений (III) с гидразином (IV) может выполняться при нагревании соединений (III) со стехиометрическим количеством гидразинов (IV) или избытком гидразинов (IV). Реакция обычно проводится в инертном растворителе, таком как хлористый метилен, хлороформ, 1,1,1-трихлорэтан, диметоксиэтан, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид, диметилформамид, пиридин, пиколин и их смесь, или, если это необходимо, соединение (IV) само используется в качестве растворителя, необязательно в присутствии неорганического основания, такого как карбонат щелочного или щелочноземельного металла, или кислый карбонат, или органического основания, такого как триалкиламин, при температуре от 0^oC до температуры кипения растворителя.

Предпочтительно реакция выполняется в растворителе, таком как пиридин, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид или N,N,N',N'- тетраметилэтилендиамин, при использовании от 2 до 10 эквивалентов соединения (IV) на 1 эквивалент соединения (III) и при работе при температуре от 5^oC до 50^oC.

Если в отдельном воплощении этого изобретения соединение формулы (III) реагирует с гидразином формулы (IV), то реакция предпочтительно выполняется при молярном соотношении между соединениями (III) и (IV) от 1:1,05 до 1:1,25 и при использовании в качестве растворителя тетрагидрофурана и при температуре, колеблющейся от комнатной температуры до 50^oC.

Реакция соединений формулы (II) с соединениями формулы (V) может выполняться при нагревании соединений (II) со стехиометрическим количеством амина (V) или избытком амина (V). Реакция обычно проводится в инертном растворителе, таком как хлористый метилен, хлороформ, 1,1,1-трихлорэтан, диметоксиэтан, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид, диметилформамид, пиридин, пиколин и их смеси, или, если это необходимо, при использовании самого соединения (V) в качестве растворителя, необязательно в присутствии неорганического основания, такого как карбонат щелочного или щелочноземельного металла или кислый карбонат, или органического основания, такого как триалкиламин, при температуре от 0^oC до температуры кипения растворителя.

Предпочтительно реакция выполняется в растворителе, таком как пиридин, хлороформ или диметилсульфоксид, при использовании от 2 до 10 эквивалентов соединения (V) на 1 эквивалент соединения (II) и при работе при температуре, колеблющейся от комнатной температуры до 100^oC.

Если в соединениях формулы (I') A' и/или B' отличны от A и/или B, то удаление защитной группы для первичных и/или вторичных аминных функций выполняется по методикам, известным в предшествующих работах. Подходящие методики могут быть найдены у Green, T.W., Wuts, P.G.M., "Protective Groups in Organic Synthesis", Second edition, John Wiley and Sons, 1991.

Например, удаление N-(трет-бутоксикарбонил)защитной группы может выполняться обработкой соединения формулы (I') избытком безводной соляной кислоты в растворителе, таком как (С₁-С₄)спирт, дихлорметан, хлороформ или их смеси, при температуре от 0^oC до температуры кипения растворителя и в течение времени от нескольких минут до нескольких часов. Предпочтительно реакция выполняется в этаноле или в хлороформе при использовании от 10 до 20 молярных эквивалентов безводной соляной кислоты при температуре от 20^oC до 50^oC и обычно заканчивается за 4 часа.

Соединения формулы (IV) известны или они могут быть получены по известным методикам, смотри, например, J.Med. Chem., 7, 493 (1964) и J. Het. Chem., 26, 85, (1989).

Соединения формулы (V) известны и коммерчески доступны или они могут быть получены по известным методикам. Например, получение некоторых N-(трет-бутоксикарбонил)алкандиаминов, пригодных для получения некоторых соединений настоящего изобретения, описано в Synth. Comm., 20, 2559, (1990) или в J. Med. Chem., 33, 97, (1990).

Соединения формулы (III), где Z = OTs [соединения (III')], получают по многостадийной методике, приведенной на фиг. 2, которая включает следующие реакции:
(c) ацилирование по Фриделю-Крафтсу 1,4-дифторбензола ангидридами пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты (VI), где R₆ является водородом или подходящей защитной группой гидрокси-функции, такой как метокси или бензилокси, в присутствии AlCl₃ (110^oC, 22 часа) с образованием региоизомерных кетокислот (VIIa) и (VIIb);
(d) реакция кетокислот (VIIa) и (VIIb) с метилатом натрия в метаноле (8,5 часов, кипячение), приводящая к региоизомерным метоксизамещенным кетокислотам (VIIIa) и (VIIIb); соединения (VIIIa) и (VIIIb), где R₆ является водородом, могут реагировать как таковые на следующей стадии; если R₆ отличается от водорода, то соединение (VIIIa) очищают кристаллизацией и вводят в реакцию в качестве чистого региоизомера;
(e) восстановление соединений (VIIIa) (R₆ отличен от водорода) парой Zn/Cu в 75% водной муравьиной кислоте (15 мин, комнатная температура, затем 80^oC, 2 ч) до образования (IX); если R₆ является водородом, то кислоты (IXa) и (IXb) могут разделяться хроматографически с получением чистых выделенных региоизомеров (IXa) и (IXb);
(f) циклизация соответствующей кислоты (IX) нагреванием суспензии соединения в полифосфорной кислоте при 110-120^oC 2 ч до образования бензо[g]изохинолина (X);
(g) окисление соединения (X) до соответствующего диона (XI) с помощью церий аммоний нитрата в смеси ацетонитрила и воды (60^oC, 2 ч);
(h) удаление метоксигруппы диона (XI) хлористым алюминием в хлористом метилене (комнатная температура, 2 ч, затем температура кипения, 1,5 ч) с образованием соединений (XII), которые соответствуют смеси 9-фтор-6-гидрокси- и 9-хлор-6-гидрокси- 5,10-дионов (XII) вследствие частичного замещения удаляемого фтор с помощью AlCl₃; и
(i) конечное введение функциональной группы в свободную гидроксигруппу (XII) с помощью толуолсульфонилхлорида в пиридине при комнатной температуре ведет к требуемым соединениям (III), где Z = OTs [соединения (III)]; если R₆ является защитной группой гидрокси функции, то она удаляется согласно методам, известным в предшествующих работах, что приводит к соединению (III), где R является ОН.

В предпочтительном воплощении этого изобретения получение промежуточных продуктов (XI) проводится многостадийной методикой, представленной на фиг. 3, которая включает следующие реакции:
циклизация смеси региоизомерных кетокислот (VIIa) и (VIIb) 20% олеумом при 130-140^oC с образованием 6,9-дифторбензо[g]изохинолинов (XIII);
реакция (XIII) с одним эквивалентом метилата натрия в растворителе, таком как метанол, с образованием смеси промежуточных продуктов (XI), которые разделяются на отдельные чистые соединения (XIa) и (XIb) перекристаллизацией из растворителя и/или хроматографией на колонке. Чистые промежуточные продукты (XIa) и (XIb) затем обрабатываются согласно уравнению (h) и (i) фиг. 2 и затем согласно фиг. 1 до образования соединений (Ia) и (Ib), соответственно.

В предпочтительном способе этого изобретения, который дает соединения формулы (I), где X является углеродом и Y - азотом, 9-хлор-6-фторбензо[g] изохинолин-5,10-дионы формулы (III'') получают многостадийным способом, приведенным на фиг. 4, который включает следующие реакции:
введение лития в 1-хлор-4-фторбензол алкиллитиевым реагентом, таким как втор-бутиллитий, в ТГФ при -75^oC с образованием 1-литий-5-хлор-2-фторбензола (XIV);
ацилирование 1-литий-5-хлор-2-фторбензола (XIV), произведенное in situ по вышеприведенной стадии, с ангидридами пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты с образованием смеси кетокислот (XVa) и (XVb), которые могут разделяться на отдельные чистые соединения перекристаллизацией из растворителя или сублимацией;
восстановление чистой кетокислоты (XVa) парой Zn/Cu или Zn-порошком в 75% водной муравьиной кислоте (15 минут при комнатной температуре, затем 2 ч при 80^oC) ведет к (XVI);
окислительная циклизация (XVI) дымящейся серной кислотой (20-30% SO₃, 10 мин, 130^oC) с образованием 9-хлор-6-фторбензо[g]изохинолин-5,10-дионов формулы (III'').

Промежуточные продукты (III'') затем обрабатывают согласно фиг. 1 с образованием соединений формулы (I), где X является углеродом и Y - азотом.

Биологическая активность соединений изобретения.

Оценка биологической активности соединений этого изобретения выполняется in vitro и in vivo согласно методикам, разработанным Национальным онкологическим институтом США.

Оценка цитотоксической активности in vitro соединений изобретения проводится при использовании линии клеток аденокарциномы толстой кишки человека (Lovo), выделенной из метастатических утолщений, и подлинии, проявляющей множественную лекарственную устойчивость. Подлиния является устойчивой к ряду противоопухолевых агентов, среди которых доксорубицин, VP-16 и винкристин. Эта подлиния (называемая Lovo/ДХ) проявляет сниженное накопление доксорубицина и повышенную экспрессию протеина (Grandi, M., Geroni, C., Giuliani, F.C., British J. Cancer, (1986), 54, 515). Соединения тестируют согласно МТТ анализу (Mosman, T., "Rapid Colorimetzic assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay", J. Immunol. Methods, (1983), 65, 55-63; Green, L.M. "Rapid colorimetric assay for cell viability: application to the quantitation of cytotoxic and growth inhibitory lymphokines", J. Immunol. Methods, (1984), 70, 257-268) в сравнении с митоксантроном и доксорубицином.

В общих чертах, характерные соединения этого изобретения более цитотоксические, чем доксорубицин, и так же цитотоксичны, как и митоксантрон на линии клеток Lovo. Если митоксантрон тестируют на линии клеток Lovo/ДХ, то индекс устойчивости R1 (определенный соотношением IC₅₀ для линии устойчивых клеток к IC₅₀ для линии чувствительных клеток) находится до 22,5, показывая, что эта подлиния все же имеет приобретенную устойчивость к митоксантрону и аметантрону. С другой стороны, некоторые соединения этого изобретения при тестировании на таких же устойчивых подлиниях не показывают перекрестной устойчивости с митоксантроном и аметантроном, как приведено в таблице 2. Оценка in vitro характерных соединений этого изобретения предполагает, что характерные соединения этого изобретения могут быть пригодны для того, чтобы преодолеть множественную лекарственную устойчивость, обуславливающую механизм устойчивости опухоли.

Изучение биологической активности in vivo характерных соединений этого изобретения выполняется при использовании моделей лейкемии у мышей Р388 и L1210. Лейкемические клетки мышей Р388 вводят внутрибрюшинно (в/б) пли внутривенно (в/в) мышам CD2F1. Обработку начинают приблизительно через 24 ч после трансплантации опухоли и дозы препарата вводят в/б (Р388 в/б/в/б) или в/в (Р388 в/в / в/в) согласно предварительно установленным методикам опыта, обычно с 3-х дневным интервалом (Р388 в/в / в/в) или с 4-х дневным интервалом (Р388 в/б / в/б). Изучение выполняется в течение 60-дневного периода и записывают дату смерти каждого животного. Процент Т/С определяют при использовании среднего времени выживаемости (MST) для каждой группы по формуле
% Т/С = (MST обработанных) : (MST контроль) 100
Характерные соединения этого изобретения способны увеличивать время выживаемости обработанных животных значительно больше чем митоксантрон, приводя к более высоким величинам % Т/С при вполне переносимой дозе. Кроме того, вышеуказанные характерные соединения изобретения проявляют антилейкемическую активность в широком ряду вполне переносимых доз и, в частности, они активны при дозах, которые более низкие, чем максимально переносимая доза, обеспечивая показания для более благоприятного терапевтического индекса в сравнении с митоксантроном.

Противоопухолевая активность характерных соединений этого изобретения оценивается также на модели лейкемии у мышей L1210.

Лейкемические клетки L1210 вводят внутрибрюшинно (в/б) или внутривенно (в/в) мышам CDF1 и обработку начинают приблизительно через 24 часа после трансплантации опухоли. Дозы препаратов вводят в/б (L1210 в/б / в/б) или в/в (L1210 в/в / в/в) по предварительно установленным методикам опыта, обычно с 3-х дневным (L1210 в/в / в/в) или 4-х дневным (L1210 в/б / в/б) интервалами. Изучение выполняется в точение 60-дневного периода и фиксируются даты смерти каждого животного. Значение % Т/C определяется при использовании среднего времени выживаемости (MST) для каждой группы по формуле
% T/C = (MST обработанных) : (MST контроля) 100.

Также в этой дополнительной лейкемической модели характерные соединения этого изобретения показывают активность более лучшую, чем клинически используемый препарат митоксантрон. Так как характерные соединения этого изобретения показывают хорошие результаты против in vivo моделей лейкемии мышей Р388 и L1210, которые рассматриваются для предсказания противоопухолевой активности для человека, соединения, представленные здесь, предлагаются для лечения лейкемии человека и твердых опухолей, чувствительных к лечению противоопухолевыми антибиотиками.

Соединения настоящего изобретения могут также поэтому использоваться в качестве активного ингредиента терапевтических составов для индуцирования регресса и/или временного облегчения рака у млекопитающих при введении в количествах от приблизительно 1 мг до приблизительно 0,4 г на 1 кг веса тела. Предпочтительный режим дозирования составляет от приблизительно 1 мг до приблизительно 50 мг на 1 кг веса тела в день. Единичная доза может употребляться так, чтобы субъекту приблизительно с 70 кг веса тела вводилось в течение 24-часового периода от приблизительно 70 мг до приблизительно 2,5 г активного соединения. Дозирование может регулироваться для того, чтобы совмещаться с другими режимами лечений, такими как радиационная терапия.

Фармацевтические составы могут быть в форме таблеток, капсул, гелевых капсул, суппозиториев, лиофилизированного порошка и растворов для внутривенного введения. Изобретение иллюстрируется, но не ограничивается, следующими примерами и вариантами, которые легко очевидны по предшествующим работам.

Синтез соединений изобретения.

Исходные. Пример 1. Ангидрид пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты.

Смесь пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты (15,0 г) и уксусного ангидрида (30 мл) кипятят 2 ч. Избыток уксусного ангидрида отгоняют, ангидрид собирают и очищают сублимацией (123^oC при 3 мм рт. ст.) и получают ангидрид пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты в виде белого твердого вещества (10,1 г).

Т. пл.: 74-76^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 7.94 (д, 1H); 9.24 (д, 1Н); 9.39 (с, 1Н).

Исходные. Пример 2. 4-(2,5-Дифторбензоил)никотиновая кислота и 3-(2,5-дифторбензоил)изоникотиновая кислота.

Смесь ангидрида пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты (5,0 г) и хлористого алюминия (17,5 г) в 1,4-дифторбензоле (65 мл) нагревают на масляной бане при 110^oC в течение 22 ч. Избыток 1,4-дифторбензола отгоняют, остаток охлаждают на бане со льдом, обрабатывают смесью льда с водой (75 мл) и концентрированной соляной кислотой (6,3 мл). Выпавший твердый осадок отфильтровывают, сушат и получают смесь 4-(2,5-дифторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(2,5-дифторбензоил)изоникотиновой кислоты приблизительно в соотношении 4:1 соответственно в виде белого твердого вещества (7,7 г), которое может перекристаллизовываться из ацетонитрила и воды.

Т. пл.: 214-217^oC.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆): 7.4 (м), 7.90 (м); 8.80 (д); 8.90 (д); 9.15 (с).

Перекристаллизация этого материала (15,97 г) из абсолютного этанола (360 мл) дает почти чистую 3-(2,5-дифторбензоил)изоникотиновую кислоту (1,146 г).

Исходные. Пример 3. 4-(2-Метокси-5-фторбензоил)никотиновая кислота и 3-(2- метокси-5-фторбензоил)изоникотиновая кислота.

Смесь 4-(2,5-дифторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(2,5- дифторбензоил)изоникотиновой кислоты из Исходные. Пример 2 (14,1 г) прибавляют к раствору метилата натрия, полученного при добавлении порциями натрия (6,8 г) к сухому метанолу (140 мл). Реакционную смесь кипятят 8,5 часов и оставляют на ночь при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают приблизительно до 1/3 ее объема, добавляют воду (100 мл), отгоняют метанол, медленно прибавляют к остатку концентрированную HCl (25 мл) при одновременном охлаждении при 10^oC, полученный осадок собирают отсасыванием, промывают 0,1 N HCl и получают смесь 4-(2-метокси- 5-фторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(2-метокси-5- фторбензоил)изоникотиновой кислоты (11,31 г).

Т. пл.: > 230^oC.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆): 3.40 (с); 3.45 (с); 7.15 (м); 7.37 (д); 7.42-7.63 (м); 7.26 (д); 8.60 (с); 8.83 (д); 9.07 (с): 13.55 (шир с);
Исходные. Пример 4. 4-(2-Метокси-5-фторбензил) никотиновая кислота и 3-(2-метокси-5-фторбензил)изоникотиновая кислота.

К суспензии смеси 4-(2-метокси-5-фторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(2-метокси-5-фторбензоил)изоникотиновой кислоты (1,222 г), полученной по методике Исходные. Пример 3, в муравьиной кислоте (15 мл) и воде (5 мл) при перемешивании прибавляют пару цинк-медь (L.F. Fieser and M. Fieser, Reagents for Organic Synthesis, Vol. 1, p. 1292) (1,5 г), выдерживают 15 мин при комнатной температуре, затем реакционную смесь нагревают 2 ч на масляной бане, поддерживая 80^oC. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры ее фильтруют через фильтр из пористого стекла и основательно промывают 75% водной муравьиной кислотой (10 мл), а затем этилацетатом (10 мл). Объединенные фильтраты упаривают до приблизительно 5 мл, обрабатывают 0,5 N HCl (15 мл), экстрагируют этилацетатом (3 20 мл); наконец, насыщают хлористым натрием и дополнительно экстрагируют этилацетатом: 1,2-диметоксиэтаном = 3:1 (2 20 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель упаривают в вакууме до получения желтоватого осадка. Этот материал подвергают хроматографии на колонке с силикагелем (элюент - этилацетат: метанол: уксусная кислота от 96:4:0 до 90:10:1 об/об/об) и получают 4-(2-метокси-5-фторбензил)никотиновую кислоту (0,805 г) в качестве желтовато-белого твердого вещества.

Т. пл.: > 220^oC.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆): 3.70 (с, 3Н); 4.33 (с, 2Н); 6.91-7.12 (м, 3Н); 7.21 (д, 1Н); 8.61 (д, 1Н); 8.97 (с, 1Н).

При вышеприведенной колоночной хроматографии может также получаться некоторое количество 3-(2-метокси-5-фторбензил) изоникотиновой кислоты.

Исходные. Пример 5. 9-Фтор-10-гидрокси-6-метоксибензо[g]изохинолин.

Смесь 4-(2-метокси-5-фторбензил)никотиновой кислоты (0,63 г) и полифосфорной кислоты (15 г) нагревают 2 ч при перемешивании при 110-120^oC, затем нагревание прекращают, добавляют воду (50 мл), сохраняя реакционную массу при этом теплой (60^oC). Смесь охлаждают до 0^oC, нейтрализуют 20% гидроксидом натрия, перемешивают 1,5 ч при комнатной температуре и экстрагируют 4% метанолом в хлороформе (4 75 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель упаривают в вакууме и получают 9-фтор-10-гидрокси-6-метоксибензо[g] изохинолин (0,40 г) в виде пурпурно-красного твердого вещества.

Т. пл.: > 210^oC (из этанола).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆): 3.87 (с, 3Н); 6.70-6.83 (м, 2Н); 6.92-7.00 (м, 1Н); 7.30 (д, 1Н); 7.50 (д, 1Н); 8.75 (с, 1Н); 12.30 (шир с, 1Н).

УФ (этанол): _max (нм) (E_1%) (см): 539 (204); 398 (513); 378 (452); 266 (1232).

ИК (KBr): 729, 1245, 1499, 1528, 1620, 1644 и 2838 cм^-1
Исходные. Пример 6. 9-Фтор-6-метоксибензо[g]изохинолин-5,10-дион.

К суспензии 9-фтор-10-гидрокси-6-метоксибензо[g]изохинолина (1,22 г) в ацетонитриле (150 мл) при перемешивании в течение 20 мин прибавляют раствор церий аммоний нитрата (CAN; 13,70 г) в воде (50 мл), после окончания добавления полученную суспензию нагревают при 60^oC в точение 2 ч до получения прозрачного темного раствора, который охлаждают до комнатной температуры и разбавляют водой (100 мл). После отгонки ацетонитрила в вакууме водный слой насыщают хлористым натрием и экстрагируют хлористым метиленом (3 150 мл). Объединенные органические экстракты сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель упаривают в вакууме, полученный остаток очищают хроматографически на колонке с силикагелем (элюент - хлористый метилен:этилацетат от 85: 15 до 75:25 об/об) и получают 9-фтор-6-метоксибензо[g]изохинолин-5,10- дион в виде коричнево-желтого твердого вещества (0,48 г).

Т. пл.: > 220^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 4.05 (с, 3Н); 7.38 (дд, J=3.39, 9.39 Гц, 1H); 7.55 (дд, J= 10.37, 9.39 Гц, 1Н): 8.00 (дд, J=5.09, 0.78 Гц, 1Н); 9.07 (д, J=5.09 Гц, 1Н); 9.45 (д, J=0.78 Гц, 1Н).

Исходные. Пример 7. 6,9-Дифторбензо[g]изохинолин-5,10-дион.

Раствор смеси 4-(2,5-дифторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(2,5-дифторбензоил)изоникотиновой кислоты, полученной в Исходные. Пример 2, (61,07 г) в 20% олеуме (100 мл) нагревают до 140^oC в течение 20 мин прибавляют в 4 порции (13,2 мл каждая) 20% олеум. После добавления четвертой порции смесь нагревают 20 минут, затем охлаждают до комнатной температуры, обрабатывают смесью льда (1500 г), воды (1500 мл) и 35% NaOH (350 мл) и экстрагируют 4 раза хлористым метиленом (1 1000 мл, следующие 3 500 мл). Объединенные органические растворы промывают водой (2 1000 мл), сушат (Na₂SO₄), упаривают на роторном испарителе. Полученное темно-красное твердое вещество (56,0 г) растворяют в кипящем ТГФ (840 мл), вносят обесцвечивающий (активированный уголь (8,40 г), выдерживают 30 мин, фильтруют при нагревании, фильтрат упаривают до 200 мл, выпавший осадок отфильтровывают и получают 6,9-дифторбензо[g]изохинолин-5,10-дион (43,0 г).

Т. пл.: 201-203^oC.

При концентрировании маточного раствора до 70 мл получают дополнительное количество продукта (3,35 г), т.пл. 200-202^oC.

Исходные Пример 8. 9-Фтор-6-метоксибензо[g]изохинолин- 5,10-дион и 6-фтор-9-метоксибензо[g]изохинолин-5,10-дион
Раствор метилата натрия получают в атмосфере азота в капельной воронке из сухого метанола (97,6 мл) и натрия (2,024 г), добавленного порциями. После исчезновения всего натрия раствор прибавляют по каплям в течение 2 ч 35 мин при перемешивании при 20^oC к раствору 6,9-дифторбензо[g]изохинолин-5,10-диона, полученного по методике Исходные. Пример 7, (19,615 г) в сухом ТГФ (883 мл). После окончания добавления раствор концентрируют до половины объема его на роторном испарителе, затем охлаждают до 18^oC в течение 30 мин. Выпавшее твердое вещество отфильтровывают, промывают ТГФ (100 мл); затем суспендируют в воде (80 мл) перемешивают ночь, отфильтровывают снова и получают твердое вещество А (7,4 г).

Маточный раствор ТГФ упаривают досуха, полученное твердое вещество суспендируют в воде (78 мл) при перемешивании 1 ч, фильтруют и получают твердое вещество В (12,9 г).

Твердое вещество А (9,30 г) в хлористом метилене (45 мл) кипятят 30 мин, охлаждают до комнатной температуры, твердое вещество отфильтровывают, промывают хлористым метиленом (5 3 мл), сушат в вакууме при 40^oC и получают 6-метокси-9- фторбензо[g]изохинолин-5,10-дион (8,65 г) в виде чистого соединения.

Т. пл.: 248-250^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 4.05 (с, 3Н); 7.40 (дд, J=9.39, 3.91 Гц, 1Н); 7.55 (дд, J= 10.37, 9.39 Гц, 1Н); 8.00 (дд, J=5.09, 0.78 Гц, 1Н); 9.48 (д, J=0.78 Гц, 1Н).

Твердое вещество В (14,0 г) растворяют в хлористом метилене (140 мл), нерастворившийся осадок отфильтровывают. Раствор хлористого метилена пропускают через хроматографическую колонку с силикагелем (630 г) при элюировании при атмосферном давлении хлористым метиленом. Когда появляются хорошо разделенные желтые хроматографические полосы, колонку элюируют смесью хлористый метилен: этилацетат от 10:1 до 8:2, до 1:1 с получением смеси 9-метокси-6-фторбензо[g] изохинолин-5,10-диона и 6-метокси-9-фторбензо[g] изохинолин-5,10-диона (6,50 г) в соотношении 94:6 (по оценке ЖХ высокого давления).

Т. пл.: 168-170^oC.

Исходные. Пример 9.

a) 9-Фтор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-дион и 9-хлор- 6-гидроксибензо[g]изохинолин-5,10-дион (1:1 смесь, реакция в маленьком объеме).

Смесь 9-фтор-6-метоксибензо[g] изохинолин-5,10-диона (0,072 г) и треххлористого алюминия (0,112 г) в сухом хлористом метилене (40 мл) перемешивают при комнатной температуре 4 ч в атмосфере азота, вносят дополнительную порцию хлористого алюминия (0,190 г), смесь кипятят 1,5 ч и оставляют на ночь при комнатной температуре, добавляют солевой раствор (15 мл), водную фазу отделяют и экстрагируют хлористым метиленом (3 5 мл). Органические слои объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель упаривают в вакууме и получают смесь приблизительно 1:1 (0,070 г) 9-фтор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-диона (нижнее желтое пятно на пластине силикагеля ТСХ при элюировании хлористым метиленом/этилацетатом 70:30) и 9-хлор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-диона (верхнее желтое пятно на приведенной выше хроматографической системе), которая используется в следующей стадии без дополнительной очистки.

9-Фтор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-дион имеет следующий ¹H-ЯМР спектр (CDCl₃): 7.38 (дд, 1Н); 7.53 (дд, 1Н); 8.09 (дд, 1Н); 9.15 (д, 1Н); 9.57 (д, 1Н); 12.56 (с, 1Н).

9-Хлор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-дион имеет следующий ¹H-ЯМР спектр (CDCl₃): 7.91 (д, 1Н); 7.75 (д, 1Н); 8.07 (дд, 1Н); 9.13 (д, 1Н); 9.58 (д, 1Н); 12.95 (с, 1Н).

b) 9-Фтор-6-гидроксибензо[g]изохинолин-5,10-дион и 9-хлор-6- гидроксибензо[g]изохинолин-5,10-дион (смесь 9:1, реакция для больших количеств).

К раствору 6-метокси-9-фторбензо[g]изохинолин-5,10-диона (7,20 г) в хлористом метилене (432 мл) при перемешивании и кипячении прибавляют в одну порцию хлористый алюминий (19,05 г), кипятят 4 ч, охлаждают, выливают в воду (1300 мл), вносят хлористый метилен (200 мл), перемешивают 10 мин и органический слой отделяют. Водный раствор насыщают NaCl и дополнительно экстрагируют хлористым метиленом (3 400 мл). Органические растворы объединяют, промывают солевым раствором (1000 мл), сушат и растворитель упаривают на роторном испарителе. Полученное коричневое твердое вещество (6,5 г) перекристаллизовывают из этилацетата/н-гексана 1:1 (65 мл) и получают смесь 9:1 (при оценке по ¹H-ЯМР спектру) 9-фтор-6-гидроксибензо[g]изохинолин-5,10- диона и 9-хлор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-диона соответственно (6,00 г).

Т. пл.: частичное расплавление происходит при 179-181^oC; полное расплавление происходит при 193-195^oC.

Исходные. Пример 10.

а) 9-Фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10- дион и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10- дион (1:1 смесь, реакция для маленьких объемов).

Смесь 1: 1 9-фтор-6-гидроксибензо[g]изохинолин-5,10-диона и 9-хлор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-диона, Исходные. Пример 9а, (0,060 г) растворяют в сухом пиридине (2 мл), прибавляют п-толуолсульфонилхлорид (0,095 г), перемешивают 1 ч при комнатной температуре, добавляют триэтиламин (0,25 мл), перемешивают дополнительно 1 ч, упаривают почти досуха и обрабатывают 1 N HCl (4 мл) - 20% сульфатом аммония (6 мл) и этилацетатом (10 мл). Органические растворы объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия, упаривают досуха и получают смесь приблизительно 1:1 (0,095 г) 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона, которая используется на следующей стадии без дополнительной очистки.

Чистые отдельные соединения получают с помощью хроматографии на колонке с силикагелем этой смеси (элюент: хлористый метилен/н-гексан/этилацетат от 50/45/5 до 50/40/10 об/об/об), они показывают следующие аналитические данные:
9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g]изохинолин-5,10-дион:
Т. пл.: 173-174^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.45 (с, 3Н); 7.35 (д, 2Н); 7.50-7.57 (м, 2Н); 7.82-7.94 (м, 3Н); 9.08 (д, 1Н); 9.48 (с, 1Н).

9-Хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g]изохинолин-5,10-дион:
Т. пл.: 180-181^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.45 (с, 3Н); 7.35 (д, 2Н); 7.47 (д, 1Н); 7.78-7.91 (м, 4Н); 9.07 (д, 1Н); 9.48 (с, 1Н).

b) 9-Фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-дион и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-дион (9:1 смесь, реакция для больших объемов).

К суспензии 9:1 смеси 9-фтор-6-гидроксибензо[g]изохинолин- 5,10-диона и 9-хлор-6-гидроксибензо[g] изохинолин-5,10-диона, соответственно, Исходные. Пример 9, (5,53 г) и п-толуолсульфонилхлорида (8,47 мл) в хлористом метилене (166 мл) прибавляют при перемешивании триэтиламин (8,20 мл). Полученный красновато-фиолетовый раствор оставляют на 1 ч при комнатной температуре в атмосфере азота и выливают в воду (500 мл). Органическую фазу отделяют, водный раствор экстрагируют дополнительно хлористым метиленом (100 мл). Органические растворы объединяют, сушат (Na₂SO₄), упаривают досуха. Полученное твердое вещество суспендируют в гексане (100 мл) 1 ч, фильтруют и получают 9: 1 смесь (оценивают по данным ¹H-ЯМР) 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси) бензо[g]изохинолин-5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси) бензо[g]изохинолин-5,10-диона соответственно (8,85 г).

Т. пл.: 156-158^oC.

Исходные. Пример 11. 3-(5-Хлор-2-фторбензоил)изоникотиновая кислота и 4-(5-хлор-2-фторбензоил)никотиновая кислота.

К раствору 1-хлор-4-фторбензола (0,97 г) в ТГФ (70 мл) при перемешивании при температуре -75^oC в атмосфере азота прибавляют по каплям через шприц втор-бутиллитий (1,3 М в циклогексане; 6,0 мл), перемешивают дополнительно 30 мин и полученную желтую смесь переносят по каплям через канал кожуха в смесь ангидрида пиридин-3,4-дикарбоновой кислоты (1,00 r) в ТГФ (100 мл) при температуре - 78^oC в атмосфере азота. Светло-желтый раствор нагревают до температуры -20^oC за 4 ч, ТГФ упаривают в вакууме, остаток в виде желтого твердого вещества растворяют в воде (10 мл), охлаждают до 0^oC, подкисляют разбавленной HCl на бане со льдом и образовавшийся осадок отфильтровывают. Осадок белого цвета нагревают в ацетоне (30 мл), остается нерастворившееся вещество (0,095 г), которое по данным ¹H-ЯМР анализа является 94:4 смесью 3-(5-хлор-2-фторбензоил)изоникотиновой кислоты и 4-(5-хлор-2- фторбензоил)никотиновой кислоты соответственно.

Т. пл.: 289-291^oC.

После центрифугирования супернатант удаляют, упаривают на роторе и получают кристаллы 94: 6 смеси (по данным ¹H-ЯМР анализа) 4-(5-хлор-2-фторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(5-хлор-2-фторбензоил) изоникотиновой кислоты соответственно (0,947 г).

Т. пл.: 236-237^oC.

Сублимация этой смеси (0,025 г) при 180-205^oC/0,5 мм рт.ст. дает белое твердое вещество, состоящее из 4-(5-хлор-2-фторбензоил) никотиновой кислоты и 3-(5-хлор-2-фторбензоил)изоникотиновой кислоты соответственно в соотношении 98:2 (20 мг).

4-(5-Хлор-2-фторбензоил)никотиновая кислота:
¹H-ЯМР (CDCl₃/CD₃OD = 9/1): 6.96 (м, 1Н); 7.21 (д, 1H); 7.45 (м, 1Н); 7.86 (м, 1Н); 8.76 (д, 1Н); 9.18 (с, 1Н).

3-(5-Хлор-2-фторбензоил)изоникотиновая кислота:
¹H-ЯМР (ДМСО-d₆): 7.37 (м, 1Н); 7.75 (м, 2Н); 7.83 (д, 1Н); 8.77 (с, 1Н); 8.90 (д, 1Н).

Исходные. Пример 12. 4-(5-Хлор-2-фторбензил)никотиновая кислота.

К смеси 4-(5-хлор-2-фторбензоил)никотиновой кислоты и 3-(5-хлор-2-фторбензоил)изоникотиновой кислоты из Исходные. Пример 11 (94:6 на молярной основе; 0,60 г) в 75% муравьиной кислоте прибавляют при перемешивании пару цинк-медь (0,75 г), экзотермическую, с выделяющимися пузырьками реакционную смесь перемешивают 15 мин, нагревают 2 ч при 80^oC, охлаждают до 40^oC, фильтруют через стеклянный пористый фильтр. Твердый осадок промывают 75% муравьиной кислотой (1 5 мл) и этилацетатом (2 5 мл). Смесь упаривают на роторном испарителе до 2 мл. Полученное оранжевое масло растворяют в 0.5 N HCl (3 мл), экстрагируют этилацетатом (3 10 мл), затем насыщают NaCl, экстрагируют этилацетатом/1,2-диметоксиэтаном (2 5 мл). Объединенные экстракты сушат над Na₂SO₄, растворитель упаривают на роторном испарителе и получают желтое пенообразное вещество. Это вещество (0,541 г) перекристаллизовывают в горячем ацетонитриле (1 мл) и получают 4-(5-хлор-2-фторбензил)никотиновую кислоту (0,142 г).

Т. пл.: 174-176^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃/CD₃OD = 9/1): 4.43 (с, 2Н); 6.79 (м, 1Н); 6.86 (м, 1Н); 6.95 (м, 1Н); 7.11 (д, 1Н); 8.55 (д, 1Н); 9.12 (с, 1Н).

Исходные. Пример 13. 9-Хлор-6-фторбензо[g]изохинолин-5,10-дион.

К 4-(5-хлор-2-фторбензил)никотиновой кислоте, Исходные. Пример 12, прибавляют дымящуюся серную кислоту (30% SO₃; 0,31 мл). Темную смесь быстро нагревают до 130^oC 10 мин в колбе, оборудованной осушительной трубкой, наполненной ватой, охлаждают до комнатной температуры, обрабатывают льдом (3 г), экстрагируют хлористым метиленом (4 7 мл). Экстракты объединяют, сушат над Na₂SO₄, растворитель упаривают на роторном испарителе и получают 9-хлор-6-фторбензо[g] изохинолин-5,10-дион в виде желтого твердого вещества (0,045 г; 82% выход).

Т.пл.: 204-206^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 7.45 (м, 1Н); 7.83 (м, 1Н); 7.98 (д, 1Н); 9.08 (д, 1Н); 9.49 (с, 1Н).

Пример 1. 5-(п-толуолсульфонилокси)-2-метилизохино[8,7,6,- cd]индазол-6-(2Н)-он
Смесь 1:1 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g]изохинолин -5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g]изохинолин- 5,10-диона, Исходные. Пример 10а, (0,041 г) растворяют в сухом пиридине (2 мл), вносят свежеприготовленный 1 М раствор N-метилгидразина в пиридине (0,183 мл), перемешивают 3 ч при комнатной температуре, реакционную смесь упаривают досуха, обрабатывают водой (5 мл), насыщенным раствором NaH₂PO₄ (5 мл), экстрагируют несколько раз хлористым метиленом (50 мл). Органические растворы объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия растворитель упаривают в вакууме, полученный остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: хлористый метилен/этилацетат 90/10 об/об (50 мл), затем 75/25 (50 мл), затем 60/40 (50 мл) и наконец 40/60 (50 мл)) и получают 2-метил-5-(п-толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.42 (с, 3Н); 4.25 (с, 3Н); 7.33 (д, 2Н); 7.53 (д, 1Н); 7.63 (д, 1Н); 7.95 (д, 2Н); 8.07 (д, 1Н); 8.80 (д, 1Н); 9.50 (с, 1Н).

Пример 2. 2-[2-(Диметиламино)этил-5-(п- толуолсульфонилокси)-изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

К смеси 9:1 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g]изохинолин -5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин- 5,10-диона, Исходные. Пример 10, (2,4 г) в ТГФ (24 мл), содержащей N,N-диизопропилэтиламин (1,10 мл), при перемешивании в атмосфере азота прибавляют раствор 2-(диметиламиноэтил)гидразина (J. Med. Chem., 7, 493, 1964) (1,86 г) в безводном ТГФ (6,0 мл) в течение 30 минут, в результате слегка экзотермической реакции температура реакции при этом повышается от 20^oC до 25^oC, реакцию выдерживают 1 ч при комнатной температуре, выливают воду (240 мл). Полученную суспензию перемешивают 30 минут, отфильтровывают твердый осадок, промывают водой, сушат при 40^oC и получают 2-[2-(диметиламино)этил]-5-(п-толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6- cd]индазол-6(2Н)-он (1,44 г).

Т. пл.: 139-141^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.35 (с, 6Н); 2.45 (с, 3Н); 2.95 (т, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 7.35 (д, 2Н); 7.52 (д, 1Н); 7.80 (д, 1Н); 7.95 (д, 2Н); 8.10 (д, 1Н); 8.80 (д, 1Н); 9.55 (с, 1Н).

Пример 3. 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]-5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

(2-N-трет-бутоксикарбониламиноэтил)гидразин получают реакцией N-трет-бутоксикарбонил-2-хлорэтиламина с гидразином по методике, адаптированной из J. Med. Chem. , 7, 493, (1964). К смеси 9:1 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона, Исходные. Пример 10, (3,0 г) в ТГФ (25 мл), содержащей N,N-диизопропилэтиламин (1,38 мл), прибавляют при перемешивании в атмосфере азота в течение 30 минут раствор (2-N-трет-бутоксикарбониламиноэтил)гидразин (9,2 г) в безводном ТГФ (10 мл), при этом из-за слегка экзотермической реакции температура реакции повышается от 21^oC до 24^oC, перемешивают 1 час при комнатной температуре, полученный твердый осадок отфильтровывают промывают ТГФ: н-гексаном 1:1 (15 мл), сушат при 40^oC в вакууме и получают 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5- (п-толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он (1,33 г).

Т. пл.: 206-208^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 1.4 (с, 9Н); 2.45 (с, 3Н); 3.75 (кв, 2Н); 4.70 (т, 2Н); 4.92 (шир, 1Н); 7.35 (д, 2Н); 7.50 (д, 1Н); 7.75 (д, 1Н); 7.95 (д, 2Н); 8.09 (д, 1Н): 8.78 (д, 1Н); 9.50 (с, 1Н);
Пример 4. 2-[2-[(2-Гидроксиэтил)амино] этил] -5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

К раствору смеси 9:1 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси) бензо[g]изохинолин-5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси) бензо[g]изохинолин-5,10-диона, Исходные. Пример 10, (0,200 г) в ТГФ (2,0 мл), содержащему триэтиламин (0,073 мл),прибавляют по каплям при перемешивании раствор 2-[(2-гидроксиэтиламино)этил] гидразина (J. Med. Chem., 26, 85, (1989); 0,179 г) в абсолютном этаноле (0,5 мл), перемешивают 2 часа при комнатной температуре, добавляют дополнительное количество 2-[(2-гидроксиэтиламино)этил] гидразина (0,179 г) в абсолютном этаноле (0,5 мл), реакционную смесь выдерживают дополнительные 2 часа, упаривают до объема приблизительно 1 мл, вносят воду (20 мл), оставляют на ночь при перемешивании при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, сушат в вакууме при 40^oC и наконец после обработки в кипящем этилацетате получают 2-[2-[(2- гидроксиэтил)амино]этил]-5-(п-толуолсульфонилокси)изохино [8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он (0,060 г).

Т. пл.: 131-133^oC.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆/D₂O): 2.45 (с, 3Н); 2.62 (т, 2Н); 3.13 (т, 2Н); 3.40 (т, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 7.25 (д, 1Н); 7.40 (д, 2Н); 7.75 (д, 2Н); 7.95 (д, 1Н); 8.15 (д, 1Н); 8.80 (д, 1Н); 9.40 (с, 1Н).

Пример 5. Получение 2-(аминоалкил)-5-(п- толуолсульфонилокси)-изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-онов.

При использовании методики примеров 1-4 реакцией смесей 9-фтор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона и 9-хлор-6-(п-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона (Исходные. Пример 10) с замещенным гидразином, выбранным из группы 2-(диэтиламиноэтил)гидразин (J. Med. Chem., 7, 493, (1964), 3-диметиламинопропилгидразин [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)] , 2-аминоэтилгидразин [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], 2-(метил- аминоэтил)гидразин, 2-гидроксиэтилгидразин, 3-аминопропилгидразин [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], получают следующие соединения:
2-[2-(диэтиламино)этил]-5-(п-толуолсульфонилокси)изохино [8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[3-(диметиламино)пропил] -5-(п-толуолсульфонилокси)изохино [8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(амино)этил] -5-(п-толуолсульфонилокси)изохино [8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(метиламино)этил]-5-(п-толуолсульфонилокси)изохино [8,7,6-cd]]индазол-6(2Н)-он;
2-[3-(амино)пропил] -5-(п-толуолсульфонилокси)изохино [8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он.

Пример 6. 5-Хлор-2-метилизохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он.

К раствору 9-xлop-6-фторбензо[g]изoxинoлин-5,10-диoнa (Исходные. Пример 13) в пиридине (0,5 мл) при перемешивании при охлаждении на бане со льдом прибавляют по каплям в течение 2 мин раствор метилгидразина (0,76 М; 0,021 г) в пиридине (0,6 мл). Появление желтого осадка в темном растворе наблюдают через 6 мин, через 1,5 ч реакционная масса уменьшается до половины ее объема с помощью мягкого пропускания потока азота, затем смесь обрабатывают льдом (5 г) и выпавший светло-желтый осадок отфильтровывают, промывают смесью лед-вода (2 1 мл) и сушат в вакууме. Желтое твердое вещество очищают хроматографически на колонке с силикагелем (элюент: хлороформ/метанол 96/4 об/об) и получают 5-хлор-2-метилизохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он (0,033 г; выход 71%) в виде желтого твердого вещества.

Т. пл.: 244-245^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 4.25 (с, 3Н); 7.59 (дд, 2Н); 7.92 (д, 1Н); 8.84 (д, 1Н); 9.55 (с, 1Н).

Пример 7. Получение 2-(аминоалкил)-5-хлоризохино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-онов.

При использовании методики Примера 6 реакцией 9-хлор-6-фтор- бензо[g]изохинолин-5,10-диона (Исходные. Пример 13) с замещенным гидразином, выбранным из группы, включающей (2-N-трет- бутоксикарбониламиноэтил)гидразин, 2-(диметиламиноэтил)гидразин [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], 2-(диэтиламиноэтил)гидразин [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], 2-[(2-гидроксиэтиламино)этил] гидразин [J. Het. Chem., 26, 85, (1989)], 3-диметиламинопропилгидразин [J. Het. Chem. , 23, 1491, (1986)], 2-аминоэтилгидразин [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], 2-(метиламиноэтил)гидразин, 2-гидроксиэтилгидразин, 3-аминопропилгидразин [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)]; получают 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)- этил] -5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
Т. пл.: 226-228^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₃OD): 1.30 (с, 9Н); 3.58 (т, 2Н); 4.63 (т, 2Н) 7.54 (д, 1Н); 7.70 (д, 1Н): 7.90 (дд, 1Н) 8.70 (д, 1Н); 9.40 (с, 1Н).

2-[2-(Диметиламино)этил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он
Т. пл.: 160-161^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.32 (с, 6Н); 2,95 (т, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 7.60 (д, 1Н); 7.69 (д, 1Н); 8.00 (дд, 1Н); 8.88 (д, 1Н); 9.60 (с, 1Н).

2-[2-(диэтиламино)этил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(диэтиламино)этил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-хлоризохино[5,6,7-cd] индазол -6(2Н)-он;
Т. пл.: 148-152,5^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₃OD): 2.75 (т, 2Н); 3.43 (т, 2Н); 3.60 (т, 2Н); 4.63 (т, 2Н); 7.55 (д, 1Н); 7.75 (д, 1Н); 7.98 (дд, 1Н); 8.73 (д, 1Н); 9.40 (с, 1Н).

2-[3-(диметиламино)пропил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(амино)этил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(метиламино)этил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(гидрокси)этил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[3-(амино)пропил]-5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он.

Пример 8. 5-[[2-(Диметиламино)этил]амино]-2- метилизохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

К суспензии 2-метил-5-(п-толуолсульфонилокси)изохино(8,7,6- cd] индазол-6(2Н)-она (0,02 г) в сухом пиридине (2 мл) прибавляют 1 М раствор N,N-диметилэтилендиамина в пиридине (0,10 мл) перемешивают 1 ч при комнатной температуре, нагревают 13 ч при 70^oC, в то время как вносят дополнительные количества раствора N,N-диметилэтилендиамина (0,1; 0,05; 0,05 мл) соответственно через 2, 4 и 11 ч. Затем пиридин и избыток N,N-диметилэтилендиамина удаляют упариванием в вакууме, полученный остаток обрабатывают CH₂Cl₂ (50 мл) и рассолом (10 мл), добавляют насыщенный раствор NaHCO₃. Органический раствор сушат над безводным Na₂SO₄ и растворитель упаривают. Остаток оранжевого цвета очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: CHCl₃/MeOH 95/5 (30 мл), затем CHCl₃/MeOH/NH₄OH 90/15/0,5 (50 мл)) и получают 2-метил-5-[[2-(диметиламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он (0,011 г) в виде красновато-оранжевых кристаллов.

Т. пл.: 208-215^oC. (разл.).

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.40 (с, 2Н); 2.75 (т, 2Н); 3.57 (кв, 2Н); 4.25 (с, 3Н); 6.97 (д, 1Н); 7.63 (д, 1Н); 8.30 (дд, 1Н); 8.79 (д, 1Н); 9.30 (шир т, 1Н); 9.62 (д, 1Н).

Пример 9. 2-[2-(Диметиламино)этил]-5-[[2-(диметиламино) этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

Раствор 2-[2-(диметиламино)этил]-5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-она из Примера 2 (0,463 г) и 2-(диметиламино)этиламина (0,80 мл) в сухом пиридине (4,63 мл) нагревают 1 ч 30 мин при 80^oC в атмосфере азота. Раствор затем упаривают досуха, темный осадок обрабатывают рассолом (30 мл) и этилацетатом (4 25 мл). Органические растворы объединяют, сушат над Na₂SO₄, упаривают до приблизительно 3 мл, добавляют н-гексан (12 мл), перемешивают 1 ч, отфильтровывают выпавший осадок, сушат его в вакууме при 40^oC и получают 2-[2-(диметиламино)этил]-5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино(8,7,6- cd]индазол-6(2Н)-он (0,23 г).

Т. пл.: 150-152^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.32 (с, 6Н); 2.40 (с, 6Н); 2.70 (т, 2Н); 2.95 (т, 2Н); 3.60 (кв, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 6.98 (д, 1Н); 7.70 (д,1Н); 8.30 (д, 1Н); 8.80 (д, 1Н); 9.30 (шир, 1Н); 9.65 (с, 1Н).

Пример 10. 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5-[[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

Суспензию 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил)-5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-она из Примера 3 (0,535 г) и N-(трет-бутоксикарбонил)этилендиамина (полученного по методике Synt. Comm., 20, 2559, (1990); 1,12 г) в сухом пиридине (5,35 мл) нагревают при 80^oC. Полученный темный раствор оставляют при этой температуре 5 ч, затем упаривают досуха, обрабатывают рассолом (30 мл) и этилацетатом (2 25 мл). Оранжево-красное твердое вещество, нерастворимое в бифазной смеси, отфильтровывают и сушат в вакууме при 40^oC (0,43 г).

Этот материал (0,60 г) очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюент хлористый метилен-метанол от 90/10 до 70/30 об/об). Фракции, содержащие продукт, объединяют, упаривают до приблизительно 20 мл и выделяют 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино) этил] -5-[[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он в виде красно-оранжевых кристаллов (0,45 г).

Т. пл.: 211-213^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃/ДМСО-d₆ 9: 1): 1.3 (с, 9Н); 1.4 (с, 9Н); 3.32 (кв, 2Н); 3.58 (м, 4Н); 4.58 (т, 2Н); 6.20 (шир, 1Н); 6.40 (шир, 1Н); 7.05 (д, 1Н); 7.70 (д, 1H); 8.15 (д, 1Н); 8.65 (д, 1H): 9.20 (шир, 1H); 9.49 (с, 1H).

Пример 11. 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]-5- [[(2-(диметиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он.

Суспензию 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]-5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-она (0,056 г) и 2-(диметиламино)этиламина (0,080 мл) в сухом пиридине (0,50 мл) нагревают при 80^oC. Получившийся темный раствор выдерживают при этой температуре 1 ч, затем оставляют на ночь при комнатной температуре, образующийся темный осадок отфильтровывают, очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: этилацетат, затем хлористый метилен/метанол 9/0,5 об/об) и получают 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5-[[2- (диметиламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2H)-он (0,024 г) в качестве красно-оранжевых кристаллов.

Т. пл.: 225-227^oC (из хлористого метилена).

¹H-ЯМР (CDCl₃): 1.43 (с, 9Н); 2.40 (с, 6Н); 2.7 (т, 2Н); 3.55 (кв, 2Н); 3.78 (м, 2Н); 4,65 (т, 2Н); 5.23 (шир м, 1Н); 6.78 (д, 1H); 7.62 (д, 1H); 8.28 (дд, 1Н); 8.76 (д, 1H); 9,6 (с, 1Н).

Пример 12. Изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-оны.

По методикам Примеров 8-11 реакцией 2-[2-(диметиламино)этил] -5-(п-толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-она из Примера 2, 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]-5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-она из Примера 3 или 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-(п- толуолсульфонилокси)изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-она из Примера 4 с соответственно выбранным амином получают следующие соединения:
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино]-этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 3.25 (м, 6Н); 3.61 (т, 4Н); 3.71 (м, 4Н); 3.98 (кв, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 5.31 (шир, 2Н); 7.08 (д, 1Н); 7.70 (д, 1Н); 8.30 (д, 1Н); 8.83 (д, 1Н); 9.30 (шир, 1Н); 9.69 (с, 1Н).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[3-(амино)пропил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.05 (м, 2Н); 3.18 (м, 4Н); 3.58 (т, 2Н); 3.65 (т, 2Н); 3.78 (кв, 2Н); 4.62 (т, 2Н); 5.20 (шир, 3Н); 7.10 (д, 1Н); 7.69 (д, 1Н); 8.30 (д, 1Н); 8.85 (д, 1Н); 9.15 (шир, 1Н); 9.30 (т, 1Н); 9.71 (с, 1Н).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(амино) этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 3.20 (м, 4Н); 3.58 (т, 2Н); 3.66 (т, 2Н); 3.86 (кв, 2Н); 4.61 (т, 2Н); 5.15 (шир, 3Н); 7.12 (д, 1Н); 7.69 (д, 1Н); 8.30 (д, 1Н); 8.85 (д, 1Н); 9.15 (шир, 1Н); 9.30 (т, 1Н); 9.71 (с, 1Н).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил-5-[[2- (метиламино)этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.61 (с, 3Н); 3.06 (т, 2Н); 3.20 (т, 2Н); 3.58 (т, 2Н); 3.67 (т, 2Н); 3.88 (кв, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 5.10 (т, 1H); 7.05 (д, 1H); 7.70 (д, 1H); 8.33 (д, 1H); 8.81 (д, 1H); 8.99 (шир, 2Н); 9.35 (т, 1H); 9.66 (с, 1H).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-[[2-(диметиламино)этил]амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.42 (с, 6Н); 2.75 (т, 2H); 3.18 (т, 2Н); 3.58 (кв, 2Н); 3.63 (т, 2Н); 4.61 (т, 2Н); 5.15 (т, 1H); 6.99 (д, 1H); 7.66 (д, 1H); 8.31 (д, 1H); 8.80 (д, 1H); 9.11 (шир, 1H); 9.35 (т, 1H); 9.65 (с, 1H).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(N-трет- бутоксикарбониламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₃OD): 1.40 (с, 9Н); 3.31 (м, 4Н); 3.52 (кв,2Н); 3.63 (т, 2Н); 3.85 (т, 2H); 4.71 (т, 2Н); 7.03 (д, 1H); 7.70 (д, 1Н); 8.21 (дд, 1Н); 8.76 (д, 1Н); 9.61 (с, 1Н);
2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино] этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₃OD): 1.45 (с, 9Н); 3.18 (м, 4Н); 3.73 (кв,2Н); 3.80 (м, 4Н); 4.67 (т, 2Н); 7.00 (д, 1H); 7.68 (д, 1H); 8.25 (дд, 1Н); 8.75 (д, 1H); 9.60 (с, 1Н).

2-[2-(диметиламино)этил]-5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино]этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
Т. пл.: 156-157^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.30 (с, 6Н); 2.91 (м, 4Н); 3.08 (т, 2Н); 3.60 (т, 2Н); 3.75 (м, 2Н); 4.60 (т, 2Н); 6.90 (д, 1H); 7.60 (д, 1Н); 8.25 (дд, 1H); 8.75 (д, 1H); 9.45 (шир, 1Н); 9.60 (с, 1H).

2-[2-(диметиламино)этил] -5-[[2-(амино)этил] амино]изохино[8,7,6- cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₃OD): 2.30 (с, 6Н); 2.95 (т, 2Н); 3.13 (т, 2Н); 3.65 (т, 2Н); 4.58 (т, 2Н); 7.04 (д, 1H); 7.70 (д, 1H); 8.18 (дд, 1H); 8.66 (д, 1Н); 9.51 (с, 1H).

Пример 13. 5-[[2-(Диметиламино)этил]амино]-2-метилизохино [5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он.

К 2-(диметиламино)этиламину (0,34 мл) прибавляют 5-хлор-2- метилизохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он из Примера 6 (0,013 г), реакционную смесь желтого цвета быстро нагревают до кипения, кипятят 1 ч, избыток диамина удаляют из оранжевого раствора пропусканием потока азота. Полученную оранжевую смесь очищают хроматографически на колонке с силикагелем с градиентом элюирования (1% метанол/хлороформ (25 мл), 2% метанол/хлороформ (25 мл), 4% метанол/хлороформ (25 мл), 8% метанол/хлороформ (25 мл), 12% метанол/хлороформ (25 мл), 16% метанол/хлороформ (25 мл), 24% метанол/хлороформ (50 мл)) и получают 5-[[2- (диметиламино)этил] амино]-2-метилизохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)- он (0,010 г) в виде красновато-оранжевых кристаллов.

Т. пл.: 212-216^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.36 (с, 6Н); 2.69 (т, 2Н); 3.54 (кв, 2Н); 4.21 (с, 3Н); 6.91 (д, 1H); 7.54 (д, 1H); 8.00 (д, 1H); 8.79 (д, 1H); 9.19 (шир, 1Н); 9.67 (с, 1Н).

Пример 14. 2-[2-(Диметиламино)этил] -5-[[2- (диметиламино)этил]амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он.

К раствору 2-[2-(диметиламино)этил] -5-хлоризохино[5,6,7- cd]индазол-6(2Н)-она (0,539 г) в пиридине (6,80 мл) при перемешивании прибавляют в атмосфере азота N,N- диметилэтилендиамин (1,79 мл), результирующий раствор нагревают 12 ч при 80^oC. Пиридин и избыток N,N-диметилэтилендиамина удаляют на роторном испарителе и полученный остаток очищают хроматографически на колонке с силикагелем при элюировании сначала хлористым метиленом, затем хлористым метиленом/метанолом 95/5 и наконец хлористым метиленом/метанолом/концентрированным аммиаком от 95/5/0,5 до 95/5/1 об/об/об. Фракции, содержащие желтый требуемый продукт, объединяют, растворитель упаривают на роторном испарителе, полученный остаток кристаллизуют из диизопропилового эфира и получают 2-[2-(диметиламино)этил]-5-[[2- (диметиламино)этил] амино] изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он в виде желтого порошка (0,291 г).

Т. пл.: 110-111^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.31 (с, 6Н); 2.38 (с, 6Н); 2.71 (т, 2Н); 2.92 (т, 2Н); 3.55 (кв, 2Н); 4.65 (т, 2Н); 7.01 (д, 1Н); 7.69 (д, 1Н); 8.10 (дд, 1Н); 8.83 (д, 1Н); 9.30 (шир т, 1Н); 9.71 (с, 1Н).

Пример 15. Изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-оны.

При использовании методик Примеров 13 или 14 получают реакцией 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5-хлоризохино[5,6,7- cd]индазол-6(2Н)-она, 2-[2-(диметиламино)этил]-5-хлоризохино [5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-она или 2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-хлоризохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-она из Примера 7 получают следующие соединения:
2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]-5-[[2-(N-трет- бутоксикарбониламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
Т. пл.: 211-213^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 1.40 (с, 9Н); 1.46 (с, 9Н); 3.55 (кв, 2Н); 3.65 (кв, 2Н); 3.77 (кв, 2Н); 4.69 (т, 2Н); 5.55 (шир, 2Н); 7.00 (д, 1Н); 7.60 (д, 1Н); 7.93 (дд, 1Н); 8.70 (д, 1Н); 9.10 (шир т, 1Н); 9.38 (с, 1Н).

2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5-[[2- (амино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он (реакция выполняется при 50^oC в ДМСО в качестве растворителя)
Т. пл.: 221-222^oC.

¹H-ЯМР (CDCl₃): 1.43 (с, 9Н); 3.13 (т, 2Н); 3.58 (кв, 1Н); 3.75 (кв, 2Н); 3.67 (т, 2Н); 5.05 (шир, 1Н); 7.00 (д, 1Н); 7.65 (д, 1Н); 8.05 (дд, 1H); 8.60 (д, 1Н); 9.30 (шир, 1Н); 9.75 (с, 1H).

2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил] -5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино] этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₂OD): 1.48 (с, 9Н); 3.25 (м, 4Н); 3.74 (кв,2Н) 3.80 (м, 4Н); 4.68 (т, 2Н); 7.01 (д, 1Н); 7.72 (д, 1H); 8.09 (дд, 1Н); 8.80 (д, 1Н); 9.75 (с, 1H);
2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил]-5-[[2- (диметиламино)этил]амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 1.44 (с, 9Н); 2.31 (с, 6Н); 2.75 (т, 2Н); 3.68 (кв, 2Н); 3.75 (кв, 2Н); 4.68 (т, 2Н); 5.10 (шир м, 1H); 7.03 (д, 1Н); 7.70 (д, 1H); 8.15 (дд, 1H); 8.85 (д, 1H); 9.33 (шир т, 1H); 9.71 (с, 1H).

2-[2-(диметиламино)этил]-5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино]этил]амино]изохино(5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₂OD): 2.40 (с, 6Н); 2.95 (т, 2Н); 3.23 (м,4Н); 3.82 (м, 2Н); 4.70 (т, 2Н); 7.05 (д, 1H); 7.70 (л, 1Н); 8.13 (дд, 1Н); 8.85 (д, 1H); 9.70 (с, 1Н).

2-[2-(диметиламино)этил] -5-[[2- (амино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃): 2.39 (с, 6Н); 2.95 (т, 2Н); 3.15 (т, 2Н); 3.68 (кв, 2Н); 4.68 (т, 2Н); 7.00 (д, 1H); 7.65 (д, 1H); 8.12 (дд, 1H); 8.85 (д, 1H); 9.33 (шир т, 1H); 9.72 (с, 1H).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-[(2- гироксиэтил)амино] этил] амино] изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он; (реакция выполняется при 52^oC в ДМСО в качестве растворителя)
Т. пл.: 148-151^oC.

¹H-ЯМР (D₂O): 2.75 (м, 6Н); 2.95 (м, 2Н); 3.12 (м, 2Н); 3.70 (м, 4Н); 4.05 (м, 2Н); 6.10 (д, 1H); 6.65 (д, 1H); 6.90 (д, 1H); 7.83 (с, 1H); 7.95 (д, 1H).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(амино) этил] амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₂OD): 2.97 (т, 2Н); 3.30 (м, 4Н); 3.68 (т, 2Н); 3.85 (т, 2Н); 4.66 (т, 2Н); 7.00 (д, 1H); 7.69 (д, 1H); 8.10 (дд, 1H); 8.83 (д, 1H); 9.76 (с, 1H).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[3- (амино)пропил] амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₂OD): 2.09 (м, 2Н); 2.57 (т, 2Н); 3.30 (м, 4Н); 3.53 (т, 2Н); 3.82 (т, 2Н); 4.66 (т, 2Н); 7.01 (д, 1Н); 7.68 (д, 1H); 8.05 (дд, 1Н); 8.80 (д, 1Н); 9.68 (с, 1Н).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2- (метиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₂OD): 2.48 (с, 3Н); 2.83 (т, 2Н); 3.28 (м,4Н); 3.58 (т, 2Н); 3.83 (т, 2Н); 4.67 (т, 2Н); 7.01 (д, 1H); 7.68 (д, 1Н); 8.03 (дд, 1H); 8.80 (д, 1H); 9.67 (с, 1Н).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-[[2- (диметиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₂OD): 2.31 (с, 6Н); 2.72 (т, 2Н); 3.33 (м, 4Н); 3.57 (т, 2Н); 3.87 (т, 2Н); 4.71 (т, 2Н); 7.00 (д, 1H); 7.71 (д, 1H); 8.09 (дд, 1H); 8.81 (д, 1H); 9.70 (с, 1H).

2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(N-трет- бутоксикарбониламино)этил]амино]изохино(5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (CDCl₃ + CD₃OD): 1.41 (с, 9Н); 3.29 (м, 4Н); 3.56 (т, 2Н); 3.79 (т, 2Н); 3.83 (т, 2Н); 4.68 (т, 2Н); 7.05 (д, 1Н); 7.68 (д, 1H); 8.08 (дд, 1Н); 8.80 (д, 1H); 9.68 (с, 1H).

Пример 16. Удаление трет-карбонильной защитной группы
К суспензии 2-[2-(N-трет-бутоксикарбониламино)этил)-5-[[2-(N- трет-бутоксикарбониламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол- 6(2Н)-она из Примера 10 (0,104 г) в абсолютном этаноле (2,1 мл) прибавляют по каплям при перемешивании в атмосфере азота этанольный раствор безводной HCl (5 N; 0,40 мл). Начальное растворение исходного материала при добавлении этанольного раствора HCl сопровождается выпадением темно-красного твердого осадка. Этот твердый осадок повторно растворяется в абсолютном этаноле и раствор нагревают 2,5 часа при 40^oC, причем при нагревании наблюдают образование красно-пурпурового осадка. Смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют диэтиловый эфир (10 мл), осадок отфильтровывают в атмосфере азота и получают тригидрохлорид 2-[2-(амино)этил] -5-[[2-(амино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd] индазол- 6(2Н)-она (0,070 г).

Т. пл.: 247-250^oC.

¹H-ЯМР (D₂O): 3.40 (т, 2Н); 3.70 (т, 2Н); 3.95 (т, 2Н); 4.87 (т, 2Н); 7.05 (д, 1Н); 7.78 (д, 1Н); 8.04 (дд, 1Н); 8.62 (д, 1Н); 9.10 (с, 2Н).

УФ (H₂O): _max (E_1%) = 230 нм (650 см); 240 (555 см); 370 нм (244 см); 591 нм (342 см).

Пример 17. По методике Примера 16 из соответствующих N-третбутоксикарбонильных производных Примеров 11, 12, 14 или 15 получают в виде тригидрохлоридов следующие соединения:
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(амино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (D₂O): 3.07 (т, 2Н); 3.39 (м, 2Н); 3.69 (т, 2Н); 3.88 (т, 2Н); 4.83 (т, 2Н); 7.05 (д, 1Н); 7.70 (д, 1Н); 8.33 (дд, 1Н); 8.78 (д, 1Н); 9.15 (с, 1Н).

2-[2-(амино)этил] -5-[[2-[2- гидроксиэтил)амино] этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он;
¹H-ЯМР (D₂O): 3.28 (т, 2Н); 3.31 (м, 4Н); 3.85 (м, 4Н); 4.90 (т, 2Н); 7.03 (д, 1Н); 7.70 (д, 1Н): 8.35 (дд, 1Н); 8.72 (д, 1Н); 9.77 (с, 1Н).

2-[2-(амино)этил] -5-[[(2- (диметиламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он;
Т. пл.: 224^oC (разложение).

¹H-ЯМР (D₂O): 3.00 (с, 6Н); 3.60 (т, 2Н); 3.70 (т, 2Н); 4.07 (т, 2Н); 4.93 (т, 2Н); 7.20 (д, 1Н); 7.95 (д, 1Н); 8.43 (дд, 1Н); 8.77 (д, 1Н); 9.43 (с, 1H).

УФ (HCl 0,1 N): _max (E_1%) = 236 им (485 см); 382 нм (205 см); 507 нм (232 см).

2-[2-(амино)этил] -5-[[2-[(амино)этил] амино]изохино[5,6,7- cd]индазол-6(2Н)-он;
Т. пл.: 260^oC.

¹H-ЯМР (D₂O): 3.42 (т, 2Н); 3.75 (т, 2Н); 4.00 (т, 2Н); 5.05 (т, 2H); 7.32 (д, 1Н); 8.09 (д, 1Н); 8.62 (д. 1Н); 8.87 (д, 1H); 9.55 (с, 1Н).

УФ (HCl 0,1 N): _max (E_1%) = 245 нм (622 см); 275 нм (181 см); 351 нм (258 см); 472 нм (327 см); 494 нм (353 см).

2-[2-(амино)этил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] )амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он;
2-[2-(амино)этил] -5-[[2-(диметиламино)этил] амино]изохино[5,6,7- cd]индазол-6(2Н)-он.

Пример 18. 2-[2-(Диметиламино)этил] -5-[[2-(амино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он дималеат.

К раствору 2-[2-(диметиламино)этил] -5-[[2-(амино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-она из Примера 12 (0,030 г) в абсолютном этаноле (1,5 мл) при перемешивании при температуре 50^oC прибавляют по каплям раствор малеиновой кислоты(0,030 г) в абсолютном этаноле (0,4 мл), после окончания добавления реакционную массу оставляют при 50^oC на 3 мин, затем позволяют охладиться до комнатной температуры, выдерживают 1 час и наблюдают выпадение красно-пурпурового кристаллического материала, который отфильтровывают, промывают этанолом, сушат в вакууме при 40^oC и получают дималеат 2-[2-(диметиламино)этил] -5-[[2-(амино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-она (0,029 г).

Т. пл.: 175-175,5^oC.

¹H-ЯМР (D₂O): 3.00 (с, 6Н); 3.40 (т, 2Н); 3.80 (т, 2Н); 3.93 (т,2Н) 4.90 (т, 2Н); 6.00 (с, 4Н); 7.00 (д, 1Н); 7.70 (д, 1Н); 7.80 (д, 1Н); 8.55 (д, 1Н); 9.0 (с, 1Н).

УФ (HCl 0,1 N): _max (E_1%) = 236 нм (436 см); 382 нм (169 см); 507 нм (190 см).

Пример 19. По методике Примера 18 получают соли соответствующих изохино-индазол-6(2Н)-онов с малеиновой кислотой:
дималеат 2-[2-(диметиламино)этил]-5-[[2-(диметиламино)этил]амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-она
Т. пл.: 189-191^oC.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆): 2.88 (с, 12Н); 3.37 (т, 2Н); 3.70 (т, 2Н); 3.95 (кв, 2Н); 5.01 (т, 2Н); 6.00 (с, 4Н); 7.38 (д, 1Н); 8.20 (дд, 1Н); 8.85 (д, 1Н); 9.20 (шир т, 1Н); 9.55 (с, 1Н).

УФ (H₂O): _max (E_1%) = 368 нм (154 см); 469 нм (206 см); 490 нм (211 см).

дималеат 2-[2-(диметиламино)этил]-5-[[2- (диметиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-она
Т. пл.: 142-146^oC
¹H-ЯМР (D₂O): 3.00 (с, 6Н); 3.05 (с, 6Н); 3.60 (т, 2Н); 3.92 (т, 2Н); 4.08 (т, 2Н); 5.07 (т, 2Н); 6.15 (с, 4Н); 7.20 (д, 1Н); 7.95 (д, 1Н); 8.20 (д, 1Н); 8.75 (д, 1Н); 9.30 (с, 1Н).

УФ (H₂O): _max (E_1%) = 292 нм (108 см); 352 нм (133 см); 476 нм (215 см).

дималеат 2-[2-(диметиламино)этил] -5-[[2-[(2- гидроксиэтил)амино]этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-она
Т. пл.: 156-157^oC.

¹H-ЯМР (D₂O): 3.05 (с, 6Н); 3.30 (м, 2Н); 3.54 (т, 2Н); 3.88 (м, 4Н); 4.03 (т, 2Н); 4.96 (т, 2Н); 6.00 (с, 4Н); 7.00 (д, 1Н); 7.70 (д, 1Н); 7.83 (дд, 1Н); 8.57 (д, 1H); 9.05 (с, 1H);
УФ (H₂O): _max (E_1%) = 368 нм (1057 см); 491 нм (210 см);

Формула изобретения

1. Изохинолино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он, изохинолино-[5,6,7-cd]индазол-6(2Н) -он или их гидроксильное производное общей формулы (I)

где R является водородом;
один из X и Y представляет собой атом углерода, а другой - атом азота;
A и B, одинаковые или разные, выбираются из группы, содержащей C₁ - С₁₀-алкил или C₂ - С₁₀-алкил, замещенный NR₂R₃, где R₂ и R₃ независимо - водород, C₁ - С₁₀-алкил или C₂ - С₁₀-алкил, замещенный гидроксилом,
или их аддитивная соль кислоты.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Y является углеродом и X - азотом.

3. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что Y является азотом и X - углеродом.

4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R является водородом.

5. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R является водородом и A и B независимо друг от друга выбирают из группы, содержащей -(CH₂)_p-NH₂, где p = 2 или 3; -(CH₂)_p-NR₂R₃, где p определен выше и R₂ и R₃ являются метилами; -(CH₂)_p-NR₂R₃, где p определен выше, R₂ представляет собой водород и R₃ - метил; -(CH₂)_p-NH-(CH₂)_q-OH, где p и q = 2 или 3 независимо друг от друга.

6. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что его выбирают из группы, включающей
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]-5-[(2-аминоэтил)амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(метиламино)этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-диметиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]-5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]-5-[(2-аминоэтил)амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] -5-[[2-(метиламино)этил] амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он,
2-[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]-5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]амино]-2-[2-(диметиламино)этил]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
5-[(3-аминопропил)амино]-2-[2-(диметиламино)этил]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
5-[(2-аминоэтил)амино] -2-[2-(диметиламино)этил] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
5-[[2-(метиламино)этил] амино]-2-[2-(диметиламино)этил]изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
5-[[2-диметиламино)этил]амино]-2-[2-(диметиламино)этил]изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] амино] -2-[2-(диметиламино)этил]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он,
5-[(3-аминопропил)амино] -2-[2-(диметиламино)этил] изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2H)-он,
5-[(2-аминоэтил)амино] -2-[2-(диметиламино)этил] изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2H)-он,
5-[[2-(метиламино)этил] амино]-2-[2-(диметиламино)этил]изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2H)-он,
5-[[2-(диметиламино)этил] амино]-2-[2-(диметиламино)этил]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2H)-он,
2-[2-аминоэтил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино]этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-аминоэтил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[2-аминоэтил]-5-[(2-аминоэтил)амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-аминоэтил] -5-[[2-(метиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[2-аминоэтил] -5-[[2-(диметиламино)этил] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[3-аминопропил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[3-аминопропил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[3-аминопропил] -5-[[2-амино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[3-аминопропил] -5-[[2-(метиламино)этил] амино] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[3-аминопропил] -5-[[2-диметиламино)этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] амино] -2-[3-аминопропил] изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил]амино]-2-[2-аминоэтил]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[(2-аминоэтил)амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил]-5-[[2-(метиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино[8,7,6-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-[(2-гидроксиэтил)амино] этил] амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[(3-аминопропил)амино] изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[(2-аминоэтил)амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил]-5-[[2-(метиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-[(2-метиламино)этил] -5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-он,
2-метил-5-[[2-(диметиламино)этил] амино]изохино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он,
2-метил-5-[[2-(диметиламино)этил]амино]изохино[5,6,7-cd]индазол-6(2Н)-он или их аддитивные соли кислоты.

7. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, содержащая активный ингредиент и фармацевтически приемлемый разбавитель или эксипиент, отличающаяся тем, что содержит в качестве ингредиента эффективное количество соединения по п.1.

8. Способ лечения лейкемии и твердых опухолей, восприимчивых к антрапиразольной терапии, у млекопитающих путем введения им производного антрапиразола, отличающийся тем, что в качестве производного антрапиразола вводят млекопитающим эффективное количество соединения по п.1.

9. Способ получения изохинолино[8,7,6-cd]индазол-6(2Н)-он, изохинолино[5,6,7-cd] индазол-6(2Н)-она или их гидроксильного производного в соответствии с п.1, отличающийся тем, что осуществляют реакцию соединений формулы (III)

где Z - OTS (п-толуолсульфонилокси группа) или хлор;
W - фтор или хлор, при условии, что Z и W не могут одновременно быть хлором;
с алкилгидразином формулы (IV)
NH₂-NH-B^',
где B^' имеет значения, аналогичные B в формуле (I), или B^' является группой, которая может превращаться в B с помощью удаления защитных групп для первичных или вторичных аминов, необязательно присутствующих в B^',
с образованием соединения формулы (II)

где X, Y, R, Z и B^' имеют значения, указанные выше,
которое затем подвергают реакции с соединением формулы (V)
NH₂-A^',
где A^' имеет те же значения, что и A в формуле (I), или A^' является группой, которая может превращаться в A при удалении защитной группы для первичных или вторичных аминов, необязательно присутствующих в A^',
с образованием соединений формулы (I^')

и, когда A^' и/или B^' отличны от А и/или В, соединения формулы (I^') превращают в соединения формулы (I) удалением защитных групп для первичных и/или вторичных аминов, необязательно присутствующих в A^'.

10. Способ получения 9-фтор или хлор-6-(n-толуол-сульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона, 6-фтор или хлор-9-(n-толуолсульфонилокси)бензо[g] изохинолин-5,10-диона, и/или их гидроксильных производных общей формулы (III^')

где значения X, Y, W и R указаны выше,
отличающийся тем, что осуществляют следующие стадии:
а) ацилирование по Фриделю-Крафтсу 1,4-дифторбензола ангидридами пиридин-3,4-дикарбоновых кислот формулы (VI)

R₆ является водород или подходящей защитной группой гидроксифункции, такой как метокси, бензилокси,
в присутствии AlCl₃ с получением региоизомерных кето-кислот формул

b) реакцию кето-кислот (VIIa) и (VIIb) с метилатом натрия в метаноле с образованием региоизомерных метоксизамещенных кето-кислот

соединения (VIIIa) и (VIIIb), где R₆ является водородом, могут реагировать как таковые на следующей стадии; когда R₆ отличен от водорода, соединения (VIIIa) очищают кристаллизацией и оно реагирует как чистый региоизомер;
c) восстанавливают соединение (VIIIa) и (VIIIb) (R₆ отличен от водорода) парой Zn/Cu в муравьиной кислоте с образованием соединения формулы (IX)

когда R₆ является водородом, кислоты (IXa), где X = N, и (IXb), где Y = N, могут разделяться хроматографически с получением чистых выделенных региоизомеров (IXa) и (IXb);
d) осуществляют циклизцию соответствующей кислоты (IX) при нагревании суспензии соединения в полифосфорной кислоте с образованием бензо[g]изохинолина формулы (X)

e) окисляют полученное соединение (X) до соответствующего диона (XI)

церийаммонийнитратом в смеси ацетонитрила и воды;
f) удаляют метоксигруппу диона (XI) хлористым алюминием в метиленхлориде с образованием соединений (XII), которые соответствуют смеси 9-фтор-6-гидрокси- и 9-хлор-6-гидрокси-5,10-дионов (XIII)

вследствие частичного замещения удаляемого фтора при обработке AlCl₃;
g) вводят функциональную группу к свободной гидроксигруппе (XII) с помощью обработки толуолсульфонилхлоридом в пиридине с образованием требуемого соединения (III^'), где Z = OTS; когда R₆ является защитной группой гидроксифункции, она может удаляться по методам, известным по предшествующим работам, с получением таким образом соединения (III), где R означает OH.

11. Способ получения 9-хлор-6-фторбензо(g)изохинолин-5,10-диона или его 4-гидроксипроизводного общей формулы (III^'')

где R₆ - водород,
отличающийся тем, что осуществляют следующие стадии:
a) введение лития в 1-хлор-4-фторбензолалкиллитий реагентом, таким как втор-бутиллитий, в ТГФ при -75^oC с образованием 1-литий-5-хлор-2-фторбензола формулы (XIV)

b) ацилирование 1-литий-5-хлор-2-фторбензола (XIV), полученного in situ в приведенной выше стадии, с ангидридами пиридин-3,4-дикарбоновых кислот формулы (VI)

с получением смеси кето-кислот

которые могут разделяться на отдельные чистые соединения перекристаллизацией из растворителя или сублимацией;
c) восстановление чистой кето-кислоты (XVa) парой Zn/Cu или порошком Zn в 75%-ной водной муравьиной кислоте (15 мин при комнатной температуре, затем 2 ч (при 80^oC) с образованием соединения формулы (XVI)

d) окислительную циклизацию соединения (XVI) дымящейся серной кислотой (20 - 30% SO₃, 10 мин, 130^oC) с получением 9-хлор-6-фторбензо[g]изохинолин-5,10-дионов формулы (III^'')
Приоритет по пунктам:
08.09.92 по пп.1 - 11;
11.08.93 по пп.1 - 11, разновидности радикалов

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7

MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины заподдержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 09.09.2010

Дата публикации: 10.12.2011

---