Способ нормализации структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов

 

Изобретение относится к экспериментальной биологии, может быть использовано для моделирования процесса нормализации структуры спинно-мозговых ганглиев при их токсическом повреждении. Белым крысам вводят тетрахлорметан. Воздействуют на область грудных сегментов спинного мозга импульсным магнитным полем. Индукция магнитного поля 100 мТл, частота импульсов 8-10 Гц. Время воздействия 10-15 мин. Проводят 3-4 процедуры. Способ позволяет нормализовать структуру спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов. 3 табл.

Предлагаемый способ относится к экспериментальной биологии и может быть использован для моделирования процесса нормализации структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов при их токсическом повреждении.

Спинно-мозговые ганглии - это первичные афферентные нервные центры, расположенные на стыке периферической и центральной нервных систем, через которые проходит сенсорная информация, кодированная в виде нервных импульсов. Нарушение спинальной чувствительной иннервации всегда сопровождается трофическими нарушениями общего характера [1, 2]. Выключение или нарушение афферентных иннервационных механизмов приводит к возникновению дефицита или искажению информации о состоянии органа, вследствие чего и нарушается обмен веществ в данном органе.

Введение в организм животного в течение длительного времени тетрахлорметала (CCl₄) приводит к токсическому повреждению нервных клеток, которое характеризуется явлением хроматолиза в большинстве нейронов, проявляющимся в исчезновении грубых глыбок и равномерном распределении хроматофильного вещества по всей цитоплазме в слабо окрашенной форме, что связано с обеднением нервных клеток рибонуклеопротеидами; уменьшением, по сравнению с интактными животными, числа ядер с несколькими ядрышками, ультраструктурными изменениями нейроцитов, выражающимися в полиморфизме митохондрий, большинство которых имело просветленный матрикс и разрушенные кристы; увеличением количества лизосом, фрагментацией элементов эндоплазматической сети, уменьшением числа рибосом [3].

Известны работы по изучению нормализации структуры симпатических ганглиев солнечного сплетения после введения в организм животных в течение длительного времени CCl₄ [4].

Наиболее близким к предлагаемому способу по совокупности существенных признаков является известный способ нормализации структуры ганглиев солнечного сплетения, который авторами выбран в качестве прототипа.

Данный способ заключается в следующем: животным, а именно беспородным белым крысам, вводят CCl₄ в течение трех месяцев, который вызывает токсическое повреждение симпатических ганглиев солнечного сплетения, что приводит к патологическим изменениям в печени.

После этого на область солнечного сплетения воздействуют импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 8 - 10 Гц. При этом проводят 8 - 10 процедур по 10 - 15 мин каждая [4].

Воздействие магнитного поля позволяет нормализовать структуру симпатических ганглиев солнечного сплетения и, как следствие, происходит регенерация печени.

Морфологическими исследованиями доказано наличие афферентной иннервации печени волокнами, исходящими, в основном, от восьми грудных сегментов (Th₅ - Th₁₂), проникающими в ганглии солнечного сплетения, а также блуждающего нерва. Нервы, входящие в ворота печени, отходят от солнечного сплетения, правого и левого блуждающего нервов. При этом ветвь левого блуждающего нерва идет в ворота органа непосредственно, а ветвь правого блуждающего нерва предварительно заходит в ганглии солнечного сплетения [5].

Однако введение CCl₄ в организм животного в течение длительного времени вызывает токсическое повреждение не только симпатических ганглиев солнечного сплетения, но и спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов, состояние которых связано с состоянием внутренних органов организма, в частности, печени.

Задачей предлагаемого способа является регенерация внутренних органов, как следствие нормализации структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов при их токсическом повреждении.

Поставленная задача решается способом нормализации структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов у животных, включающим предварительное токсическое повреждение структуры ганглиев тетрахлорметаном с последующим воздействием на животное импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 8 - 10 Гц в течение 10 - 15 мин за процедуру, согласно изобретению, воздействие импульсным магнитным полем осуществляют в области грудных сегментов спинного мозга, при этом количество процедур составляет 3 - 4.

Отличительными признаками является то, что воздействие импульсным магнитным полем осуществляют в области грудных сегментов спинного мозга, при этом количество процедур составляет 3 - 4.

Осуществление воздействия импульсным магнитным полем в области грудных сегментов спинного мозга приводит к нормализации токсически поврежденных спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов, выражающейся в увеличении количества нормальных и снижении числа дистрофических нейронов, увеличении объема нейронов и их ядер, уменьшении числа гиперхромных нейронов, с хроматолизом, со смещенным ядром и ядрышком.

Экспериментально обнаружено, что нормализация спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов происходит после 3 - 4 процедур импульсным магнитным полем.

Анализ патентной и научно-технической информации показал, что предлагаемый способ является новым и соответствует критерию "изобретательский уровень".

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом: животным, а именно беспородным белым крысам, вводят CCl₄ в течение одного месяца, который вызывает у животных токсическое повреждение структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов.

Затем на область грудных сегментов спинного мозга воздействуют импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 8 - 10 Гц. При этом проводят 3 - 4 процедуры по 10 - 15 мин каждая.

Через сутки после последней процедуры животных забивали путем декапитации. Выделяли спинно-мозговые ганглии грудного отдела Th₅ - Th₁₃, фиксировали в растворе Буэна, заливали в парафин. Срезы толщиной 5 мкм окрашивали по методу Ниссля. Гистологические препараты исследовали методом морфометрического анализа с использованием окулярных стереометрических сеток [6]. На тест-площади препарата определяли количество нормальных и дистрофических нейронов, суммарный объем нейронов, их ядер и ядрышек, количество нейронов гиперхромных, с хроматолизом, со смещенным ядром и ядрышком.

Предлагаемым способом была осуществлена нормализация структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов у группы животных, состоящей из 18 белых беспородных крыс, после токсического воздействия CCl₄. Животных подвергали воздействию импульсным магнитным полем 3 - 4 дня подряд в течение 10 - 15 мин в день на область грудных сегментов спинного мозга, при этом животных фиксировали спинной стороной вверх при проведении процедуры. Всю экспериментальную группу животных смагничивали одновременно. Через сутки после последней процедуры крыс забивали, выделяли спинно-мозговые ганглии грудного отдела, приготовляли парафиновые гистологические препараты, окрашенные по методу Ниссля и проводили морфометрические исследования под микроскопом, используя окулярную морфометрическую сетку. На тест-площади препарата определяли количество нормальных и дистрофических нейронов, их ядер и ядрышек, количество нейронов гиперхромных, с хроматолизом, со смещенным ядром и ядрышком.

Результаты исследований приведены в таблицах 1, 2. Наряду с результатами исследований с данной группой приведены результаты исследований группы животных /контрольная группа/, у которых было вызвано токсическое повреждение CCl₄ структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов и которые не получили лечения импульсным магнитным полем и данные по группе животных, не получивших токсического повреждения /интактная группа/.

Под влиянием введения CCl₄ в течение одного месяца у крыс уменьшается количество нейронов /7,63 0,24/ по сравнению с нормой /9,0 0,23/, их суммарный объем /5,07 0,25 и соответственно в норме - 7,59 0,26/ и объем ядер /0,12 0,01 и 0,21 0,02 - в норме/. Значительно увеличивается количество нейронов гиперхромных, со смещенным ядром и ядрышком /см. таблицу 1, 2/.

Под влиянием импульсного магнитного поля у крыс в спинно-мозговых ганглиях грудных сегментов увеличивается количество нормальных нейронов и уменьшается число дистрофических /см. таблицу 1/, с хроматолизом, смещенным ядром и ядрышком /см. таблицу 2/.

Как видно из полученных результатов импульсное магнитное поле нормализует структуру спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов.

Ниже приведены примеры конкретного использования предлагаемого способа.

Пример 1.

У крысы N 94 массой 180 г введением CCl₄ в течение одного месяца вызывали повреждение и спинно-мозговых ганглиев грудного отдела. Через сутки после отмены CCl₄ крысу привязывали за четыре конечности к деревянной доске спинной стороной кверху и подвергали воздействию импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 8 Гц 10 минут. Процедуру проводили три дня подряд в 8.00 - 8.10 час. утра. Через сутки после последней процедуры крысу декапитировали, выделяли спинно-мозговой ганглий Th₁₃, фиксировали в растворе Буэна, заливали в парафин, приготовляли гистологические препараты, окрашивали по методу Ниссля. Результаты морфометрических исследований приведены в таблице 3.

Пример 2.

У крысы N 95 массой 185 г введением CCl₄ в течение одного месяца вызывали повреждение и спинно-мозговых ганглиев грудного отдела. Через сутки после отмены CCl₄ крысу привязывали за четыре конечности к деревянной доске спинной стороной к верху, подвергали воздействию импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 9 Гц 12 минут. Процедуру проводили три дня подряд в 8.00 - 8.12 час. утра. Через сутки после последней процедуры крысу декапитировали, выделяли спинно-мозговой ганглий Th₉, фиксировали в растворе Буэна, заливали в парафин, приготовляли гистологические препараты, окрашивали по методу Ниссля. Результаты морфометрических исследований приведены в таблице 3.

Пример 3.

У крысы N 96 массой 200 г введением CCl₄ в течение одного месяца вызывали повреждение и спинно-мозговых ганглиев грудного отдела. Через сутки после отмены CCl₄ крысу привязывали за четыре конечности к деревянной доске спинной стороной к верху, подвергали воздействию импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 10 Гц 15 минут. Процедуру проводили четыре дня подряд в 8.00 - 8.15 час. утра. Через сутки после последней процедуры крысу декапитировали, выделяли спинно-мозговой ганглий Th₅, фиксировали в растворе Буэна, заливали в парафин, приготовляли гистологические препараты, окрашивали по методу Ниссля. Результаты морфометрических исследований приведены в таблице 3.

Во всех конкретных случаях отмечали увеличение общего количества нормальных нейронов на тест-площади препарата, их суммарного и среднего объема; увеличение суммарного и среднего объема ядер нейронов. В связи с этим снижалось количество дистрофических нейронов; гиперхромных, с хроматолизом, со смещенным ядром и ядрышком.

Как видно из полученных данных предлагаемый способ позволяет нормализовать структуру спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов у животных, и, как следствие, работу внутренних органов.

Источники информации 1. Зайко Н.Н. Нервная трофика и дистрофический процесс. - Патологическая физиология пищеварительной системы, печени, эндокринной и нервной систем. М. , 1966, 4, 513 - 556.

2. Заикина М.Г. О значении спинальной афферентной иннервации в регуляции трофических процессов. - В кн.: Проблемы нервной трофики в теории и практике медицины. М., 1963, с. 111 - 114.

3. Садовникова В.В. Реакция нейронов симпатического ганглия в процессе регенерации нормальной и патологически измененной печени. - В сб. трудов ГМИ "Восстановительные процессы в нервной системе и их коррекция". Горький, 1990, с. 29 - 34.

4. Прототип Садовникова В.В. - диссертация "Морфофункцинальная характеристика репаративных процессов в печени при действии магнитного поля", 1992.

5. Карупу В. Я. Нервы печени и их реактивные свойства. - Киев, Наукова думка, 1967, 202 с.

6. Автандилов Г. Г. Проблемы патогенеза и патологоанатомической диагностики болезней в аспектах морфометрии. М.: Медицина, 1984, 285 с.

Формула изобретения

Способ нормализации структуры спинно-мозговых ганглиев грудных сегментов у животных, включающий предварительное токсичное повреждение структуры ганглиев тетрахлорметаном, с последующим воздействием на животное импульсным магнитным полем с индукцией 100 мТл, частотой импульса 8-10 Гц в течение 10-15 мин на процедуру, отличающийся тем, что воздействие импульсным магнитным полем осуществляют в области грудных сегментов спинного мозга, при этом количество процедур составляет 3-4.

РИСУНКИ

Рисунок 1