Способ получения производных цефема

 

Использование: в медицине в качестве антимикробных средств. Сущность изобретения: производные цефема ф-лы 1, где R₁-амино или защищенная аминогруппа, R₂ - низший алкил или фторметил, R₃-COO, карбокси или защищенная карбоксигруппа, R₄-гидрокси (низший) алкил или защищенный гидрокси (низший) алкил, R₅-амино или защищенная аминогруппа, R₆-водород или метил. Реагент 1: соединение ф-лы 2, где R³_a-карбокси или защищенная карбокси, J-хлор, ацетокси. Реагент 2: соединение ф-лы 3. Условия реакции: иодид натрия, иодотриметилсилан или хлортриметилсилан.

Изобретение относится к способу получения производных цефема общей формулы I (I) где R¹ - амино или защищенная аминогруппа, R² - низший алкил или фторированный метил, R³ - COO^- , карбокси или защищенный карбокси, R⁴ - гидрокси(низший)алкил или защищенный гидрокси(низший)алкил, R⁵ - амино или защищенная аминогруппа, R⁶ - водород или метил, или его аддитивной соли трифторуксусной кислоты, его аддитивной соли серной кислоты, или его соли с трифторацетатом, обладающих антибактериальной активностью.

Известны производные цефема, обладающие антибактериальной активностью (1). Однако их активность недостаточно высока (см. табл. 2).

Целью изобретения является разработка способа получения производных цефема, обладающих более высокой антибактериальной активностью.

Цель достигается предложенным способом получения производных цефема общей формулы 1 и их вышеуказанных солей, заключающимся в том, что осуществляют взаимодействие соединения формулы: где R¹ и R² по отдельности определены выше, R^3a представляет собой карбокси или защищенный карбокси, и I означает хлор или ацетокси, либо его соли, с соединением формулы: где R⁴, R⁵ и R⁶ имеют значения, определенные выше, либо с его солью, в присутствии йодида натрия, йодотриметилсилана или хлоротриметилсилана, и если желают, то I) подвергают полученное таким образом соединение (1), где R¹означает защищенную аминогруппу, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, реакции удаления амино-защитной группы, чтобы получить соединение (1), где R¹ представляет собой амино, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, либо II) подвергают полученное таким образом соединение (I), где R³означает защищенный карбокси, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, реакции удаления карбоксизащитной группы, чтобы получить соединение (I), где R³ означает СОО^- или карбокси, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, или его соли с трифторацетатом, или
III) подвергают полученное таким образом соединение (1), где R⁴означает защищенный гидрокси(низший)алкил, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты или его соли с трифторацетатом, реакции удаления гидрокси-защитной группы, чтобы получить соединение (1), где R⁴ представляет собой гидрокси(низший)алкил, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, или его соли с трифторацетатом или
IV) подвергают полученное таким образом соединение (1), где R⁵представляет собой защищенный амино, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, или его соль с трифторацетатом, реакции удаления амино-защитной группы, чтобы получить соединение (1), где R⁵ представляет собой амино, или его соль трифторуксусной кислоты или его соль серной кислоты, или его соль с трифторацетатом.

Следующие препаративные примеры и примеры даны в целях наиболее подробного иллюстрирования настоящего изобретения.

Препаративный пример 1.

Смесь уксусного ангидрида (11,13 мл) и муравьиной кислоты (5,93 мл) перемещают при комнатной температуре в течение 30 мин. К этому раствору добавляют 5 г 5-амино-1-(2-гидроксиэтилпиразола при охлаждении льдом и смесь перемешивают при 30-40^оС в течение 1 часа. Реакционную смесь выливают в смесь воды, тетрагидрофурана и этилацетата и устанавливают ее значение рН 6 с водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой отделяют, а водный слой экстрагируют смесью тетрагидрофурана и этилацетата три раза. Органические слои объединяют, сушат над сульфатом магния и выпаривают в вакууме, получая 5,18 г 5-формамидо-1-(2-формилоксиэтил)пиразол.

ИК-спектр(нуйоле) 5180, 1705, 1660 см^-1.

ЯМР-спектр (в пердетеродиметилсульфоксиде) б: 4,21-4,61. (4Н, мультиплет) 6,11 и 6,34 (1Н, каждый дублет, I = 3 Гц) 7,47 (1Н, дублет, I 3 Гц), 8,00 (1Н синглет), 8,33 (1Н, синглет).

П р и м е р 1. В суспензию бензигидрилового эфира 7 бета(-2-)дифторметоксиимино)-2-тритиламинотиазол(-4-ил-ацетамидо)-3- хлорметил-3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-изомер, 5 г) и 0,856 г йодистого натрия в 5 мл N, N-диметилформамида добавляют 4,18 г 5-формамидо-1-(2-формилоксиэтил)пиразола при комнатной температуре. После перемешивания в течение 24 ч смесь выливают в смесь ацетилацетата и воды. Выделенный органический слой промывают водой и водным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом магния и выпаривают в вакууме. Остаток растворяют в тетрагидрофуране и подвергают хроматографированию на колонке с ионообменной смолой Амберлит Ай-Ар-Эй 400 (типа трифторацетата) (Торговый знак, производство фирмы Роом и Хаас, Ко). Целевое вещество элюируют тетрагидрофураном и выпаривают в вакууме, получая трифторацетат бензгидрил 7 бета-(7-)дифторметоксиимино(-2-)2-тритиламинотиазол-4-ил(ацетамидо) -3-(3-формамидо-2-(2-формилоксиэтил)-1-пиразолило(3-3)формамидо -2-(2-формилэоксиэтил)-1-пиразолило-метил-3-цефем-4-(карбоксилата) синизомер, 4,80 г).

ИК-спектр (нуйол): 1780, 1720, 1675 см^-1
ЯМР (пердейтеродиметилсульфоксид) б: 3,50 (2Н, мультиплет) 3,65 (2Н, мультиплет) 4,35 (2Н, мультиплет) 5,25 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 5,50 (2Н, широкий синглет), 5,88 (1Н, дублеты, I = 5 Гц и 8 Гц), 6,91 (1Н, синглет), 7,03 (1Н, синглет), 7,04-7,70 (27Н, мультиплет), 8,08 (1Н, синглет), 8,33 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 8,67 (1Н, синглет), 9,05 (1Н, синглет), 10,05 (1Н, дублет, I = 5 Гц).

П р и м е р 2 (исправленный). К суспензии 7 -[2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-ацетоксиметил -3-цефем-4-карбоновой кислоты (синизомера) (5 г), йодотриметилсилана (6,6 г) и N, N-диизопропилэтиламина (6,4 г) в метиленхлориде (20 мл) добавили смесь 5-(амино-1-(2-гидроксиэтил)пиразола (4,20 г), хлоротриметилсилана (7,2 г) и N, N-диизопропилэтиламина (8,5 г) в метиленхлориде (10 мл) при окружающей температуре. После перемешивания в течение 20 ч смесь вылили в смесь 1 н. раствора соляной кислоты и метиленхлорида при ледяном охлаждении и довели рН до 4 с помощью раствора бикаpбоната натрия. Отделенный водный слой подвергали хроматографии на колонке на макропористой безионной адсорбционной смоле "Diaion НР20". Целевое соединение элюировали 10% -ным диизопропиловым спиртом и лиофилизовали, получив 7 -[2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3-амино -2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолио] метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер) (0,4 г).

П р и м е р 3. К раствору трифторацетат бензгидрил 7 бета-(2-)дифторметоксиимино(-2-)2-тритиламинотиазол-4-ил(ацетамидо)-3-(3- формамидо-2-(2-формилоксиэтил)-1-пиразолило(-метил-3-цефем-4- карбоксилата(син-изомер 4,7 г) в 15 мл хлористого метилена и 5 мл анизола добавляют 10 мл трифторуксусной кислоты при охлаждении льдом. После перемешивания в течение 1,5 ч смесь выливают в диизопропиловый эфир, образовавшийся осадок собирают посредством фильтрации. Этот осадок растворяют в воде, подщелачивают раствор до рН 12 водным раствором гидроксида натрия при охлаждении льдом. Смесь перемешивают при той же самой температуре в течение 10 мин и подкисляют до рН 2 раствором хлористоводородной кислоты (1) нормальным. Этот раствор подвергают хроматографированию на колонке с макропористой неионной адсорбционной смолой "Дайон Эйч-Пи-20". Целевое вещество элюируют 10% -ным диизопропиловым спиртом и лиофилизуют, получая 0,80 г 7 бета-(2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-(дифторметоксиимино)-ацетамидо(-3-) формамидо-2-(2-гидроксиэтил)-1-пиразолило(метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3250, 1770, 1655 см^-1.

ЯМР-спекстр (оксид дейтерия и пердейтеродиметилсульфоксид), б: 3,11 и 3,50 (2Н, АВ квартет, I = 18 Гц), 3,85 (2Н, мультиплет) 4,60 (2Н, мультиплет), 5,22 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 5,36 (2Н, широкий синглет), 5,81 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 6,91 (1Н, триплет, I = 71 Гцк), 7,05 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 7,18 (1Н, синглет), 8,24 (1Н, d, I = 3 Гцк), 8,44 (1Н, синглет).

П р и м е р 4. В суспензию 7 бета-(2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-(дифеторметоксиими- но)-ацетамидо/-3-/3- формамидо-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/-метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер 0,7 г) в метаноле (3,5 мл) добавляют 0,42 мл концентрированной хлористоводородной кислоты при комнатной температуре. После перемешивания при той же самой температуре в течение 2 ч смесь выливают в этилацет. Образовавшийся осадок растворяют в воде и подщелачивают его до рН 2 с помощью 5% -ного водного раствора бикарбоката натрия. Этот раствор подвергают хроматографированию на колонке с макропористой неионовой адсорбционной смолой "Дайон Эйч-Пи-20". Целевое вещество элюируют 10% -ным диизопропиловым спиртом и лиофилизируют, получая 0,41 г. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-/дифторметоксиимино/ацетамидо/ 3-/3-амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1760, 1660 см^-1
ЯМР-спектр (в тяжелой воде), б: 3,02 и 3,35 (2Н, АВ квартет, I = 18 Гц), 3.78 (2Н, мультиплет), 4,28 (2Н, мультиплет), 4,95 и 5,16 (2Н, АВ квартет, I = 16 Гц), 5,16 (1Н, дублет, 3 Гц), 6. , 86 (1Н, триплет, I = 69 Гц), 7,16 (1Н, синглет), 7,83 (1Н, дублет, I = 3 Гц).

Следующее вещество (пример 5) было получено по методике, аналогичной таковой в примере 4.

П р и м е р 5. 7 бета-2-/2-аминотиазол-4-ил/2-метоксииминоаздематидо/-3-/3-амино -2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1770, 1640 см^-1.

П р и м е р 6. В раствор 6,5 г 7бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3- амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер) 6,5 мл воды добавляют 6,5 мл двухнормальной серной кислоты при комнатной температуре. Смесь перемешивают при этой температуре, чтобы выпал кристаллический осадок. Эти кристаллы собирают путем фильтрации и промывают их ледяной водой, а затем ацетоном, получая соль серной кислоты 7бета-/2-/-2аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-амино-2- гидроксиэтил/-1-пиразолио/-метил-4-цефем-4-карбоксилата (син-изомер, 5,92 г).

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсульфоксид), б: 3,13-3,83 (2Н, мультиплет), 3,40-3,83 (4Н, мультиплет), 5,15 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 5,05 и 5,30 (2Н, АВ квартет, I = 13 Гц), 5,79 (1Н, дублеты, I = 5,0 Гц и 8 Гц), 5,88 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 6.71 (1Н, синглет), 7,28 (2Н, широкий синглет), 7,95 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 9,57 (1Н, дублет, I = 8 Гц).

П р и м е р 7. К раствору дигидрохлорида 7бета-/2-/2-формамидо-тиазол-4-ил/-2-метоксииминацетамидо/-3-/3- амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер, 2,5 г) в метаноле (12,5 мл) добавляют 0,88 мл концентрированной хлористоводородной смолы (0,88 мл) при комнатной температуре. После перемешивания при этой же самой температуре в течение 2 ч смесь выливают в этилацетат (500 мл) и образовавшийся осадок собирают путем фильтрации. Осадок растворяют в воде (100 мл) подщелачивают до рН 2 водным раствором (5% ) бикарбоната натрия. Этот раствор подвергают хроматографированию на колонке с макропористой неионной адсорбционной смолой "Дайон Эйч-Пи-20" (Торговый знак, производство фирмы Мицубиши Кемикал Индастриз). Целевое вещество элюируется 10% -ным диизопропиловым спиртом и лиофилизируется, давая 0,43 г 7 бета-/2//2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3- амино-2-/2-гидрооксиэтил/-1-пиразолио метил -3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер, 0,43 г).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1770, 1640 см^-1.

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсульфоксид), б: 3,00 и 3,30 (2Н, АВ квартет, I = 18 Гц), 3,60 (2Н, мультиплет), 3,83 (КН, синглет), 4,87 (2Н, сультиплет), 5,06 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 5,18 (2Н, широкий синглет), 5,65 (1Н, дублеты, I = 5 Гц и 8 Гц), 5,84 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 6,71 (1Н, синглет), 7.18 (2Н, широкий синглет), 7,38 (2Н, широкий синглет), 8,08 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 9,52 (1Н, дублет, I = 8 Гц).

Следующее вещество (пример 8) было получено по методике, аналогичной таковой для примера 7.

П р и м е р 8. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-/дифторметоксиимино/ацетамидо/-3- /3-амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1760, 1660 см^-1.

Препаративный пример 2.

Смесь уксусного ангидрида (44,5 мл) и муравьиной кислоты (22,3 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. К этой смеси добавляют 30 г 5-амино-1-(2-гидроксиэтил)-пиразола при 0-10^оС, смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 30 мин. Эту смесь выливают в воду, охлажденную льдом, подщелачивают ее до рН 10,5 раствором карбоната калия (40% -ным) и перемешивают при охлаждении льдом 30 мин. Смесь экстрагируют смесью тетрагидрофурана и этилацетата 6 раз. Органический слой сушат над сульфатом магния и выпаривают в вакууме, получая 30,8 г 6-формамидо-1-(2-гидроксиэтил)-пирола. Т. плавления 109-112^оС.

ИК-спектр (нуйол): 3230, 1695, 1570, 1540 см^-1.

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсульфоксид), б: 3,62-3,95 (2Н, мультиплет, 3,98-4,32 (2Н, мультиплет), 6,22 и 6,36 (1Н, каждый дублет, I = 3 Гц), 7,42 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 8,32 и 8,36 (1Н, каждый синглет).

Препаративный пример 3. К суспензии 5-формамидо-1-(2-гидроксиэтил)-пиразола (1 г) и в 50 мл ацетонитрила по каплям добавляют 0,77 мл хлорсульфонилизоцианата при температуре от -15 до -20^оС.

Эту смесь перемешивают в течение 3 ч при охлаждении льдом. К реакционной смеси добавляют 1 мл воды и оставляют ее выдерживаться в течение ночи. Раствор подщелачивают до рН 7,5 с помощью 5-нормального раствора гидроксида натрия и затем доводят рН до 8,5 однонормальным раствором гидроксида натрия.

Органический слой отделяют, и водный слой экстрагируют тетрагидрофураном. Экстракт и указанный органический слой объединяют и сушат над сульфатом магния. Растворитель отгоняют, и остаток кристаллизуется из этилацетата, давая 0,60 г 5-амино-1-(2-карбокмоилоксиэтил)пиразола.

ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсульфоксид), б: 3,83-4,35 (4Н, мультиплет), 4,80-5,18 (2Н, широкий синглет), 5,32 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 6,33-6,87 (2Н, широкий синглет), 7,08 (1Н, дублет, I = 3 Гц).

Препаративный пример 4. 5-формамидо-1-(2-карбамоилоксиэтил)пиразол (3,69 г) был получен из 5-амино-1-(2-карбамоилоксиэтил)пиразола (3,3 г) по методике, аналогичной таковой в препаративном примере 2. ЯМР-спектр (пердейтеродиметилсульфоксид), б: 4,22 (4Н, синглет), 6,17 и 6,40 (1Н, мультиплет), 6,40-6,63 (2Н, мультиплет), 7,30-7,53 (1Н, мультиплет), 8,13-8,47 (1Н, мультиплет).

П р и м е р 9. К раствору бензигидрил 7 бета-/2-/2-формамидотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-хлорметил -3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер, 1,5 г) в N, N-диметилформамид (3 мл) добавляют иодистый натрий (0,36 г) в атмосфере азота. Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин.

Затем в нее добавляют 1,42 г (5-формамидо-1-(2-карбамоилоксиэтил)пиразола, смесь перемешивают при той же самой температуре в течение 24 ч. В эту реакционную смесь добавляют смесь этилацетата (50 мл) и воды со льдом (30 млк). Выделенный органический слой промывают водой и раствором хлористого натрия и сушат над сульфатом магния. Растворитель выпаривают в вакууме и полученное соединение хроматографируют на колонке с ионно-обменной смолой Амберлит 1РА 400 (СГ СОО-типа), получая трифторацетат бензгидрил 7 бета-2-/2-формамидотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-формамидо -2-/2-карбамоилоксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер 1,60 г).

П р и м е р 10. 7 бета-2-/2-формамидодтиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-формамидо-2- 2-карбамоилоксиэтил/1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер, 1,10) был получен из трифторацетата бензгидрид 7 бета-2-/2-формамидотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/3-формамидо-2/ 2-карбамоил-оксиэтил/-1-пиразолило/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер 1,6 г) по методике, аналогичной изложенной в примере 3.

П р и м е р 11. 7 бета-2-/2-аминотиазол-4-ил/2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-амино-2-/ 2-карбамоилоксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер, 0,10 г) был получен из 7-бета-2-/2-формилотиазол-4-ил/-2-метоксиминоацетамидо/-3-/3- формамидо-2-/2-карбамоилоксиэтил/-1-пиразолил/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер) по методике, аналогичной описанной в примере 4.

ИК-спектр (нуйол): 3200-3300, 1760, 1710, 1640 см.

ЯМР (в пердейтеродиметилсульфоксид), б: 3,00-4,90 (2Н, мультиплет), 3,90-4,27 (4Н, мультиплет), 3,82 (3Н, синглет), 4,40-5,47 (5Н, мультиплет), 5,47-5,77 (1Н, мультиплет), 5,81 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 6,71 (1Н, синглет), 6,90-57,48 (мультиплет), 7,97 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 9,51 (1Н, дублет, I = 8 Гц).

Препаративный пример 5. 5-амино-1-/2-гидроксиэтил/пиразол (5 г) добавляют к 14,7 мл уксусного ангидрида при перемешивании и охлаждении льдом. Туда же добавляют 6,3 мл пиридина. Эту смесь перемешивают в течение 2 ч при 25^оС.

Реакционную смесь добавляют к смеси этилацетата (50 мл) и водного раствора хлористого натрия (50 мл). Затем туда же добавляют водный раствор бикарбоната натрия, чтобы довести рН до раствора 7,0. Водный слой экстрагируют смесью этилацетата и тетрагидрофурана. Экстракт сушат над сульфатом магния. Сульфат магния отфильтровывают и фильтрат выпаривают при пониженном давлении, получая 5,98 г 5-ацетамидо-1-(2-ацетоксиэтил)пиразола. Т. плавления 83-34^оС.

ИК-спектр (нуйол): 3270, 1750, 1670, 1565 см^-1.

ЯМР-спектр (в пердейтеродиметилсульфоксиде), б: 1,93 (3Н, синглет), 2,03 (3Н, синглет), 4,22 (4Н, широкий синглет), 6,13 (1Н, дублет, I = 2 Гц), 7,32 (1Н, дублет, I = 2 Гц), 9,76 (1Н, синглет).

П р и м е р 12. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо-3-/4-метил -3-амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолил/-метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер), был получен по методике, аналогичной описанной в примере 7.

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1765, 1660, 1605 см^-1.

ЯМР-спектр (в тяжелой воде), б: 1,97 (3Н, синглет), 3,06 и 3,37 (2Н, АВ квартет, I = 18 Гц), 3,73-3,93 (2Н, мультиплет), 3,98 (3Н, синглет), 3,19-4,43 (2Н, синглет), 5,09 (2Н, шир. синглет), 5.19 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 5,89 (1Н, дублет, I= 5 Гц), 6,96 (1Н, синглет), 7,71 (1Н, синглет).

П р и м е р 13. В суспензию 7 _{лио/-метил-3-цефем-4-карбоксилата} -метоксииминоацетамидо/-3-/3-ацетамидо-2-/2-ац(син-изомер) (1,46 г) в 7,3 мл метанола добавляют 0,51 мл концентрированной хлористоводородной кислоты при комнатной температуре. Эту смесь перемешивают в 5 ч при комнатной температуре.

Реакционную смесь добавляют к этилацетату при перемешивании и охлаждении льдом. Образовавшиеся аморфное твердое вещество сушат в вакууме, его растворяют в 40 мл воды. Водный раствор доводят до значения рН 13 с помощью 1-нормального водного раствора гидрооксида натрия при перемешивании и температуре от -3 до 0^оС и перемешивают в течение 2 ч при этой же самой температуре. Значение рН водного раствора доводят до 2 с помощью 1-нормальной хлористоводородной кислоты и подвергают раствор хроматографированию на колонке с "Дайоном-Эй-Пи-20", алюмируют 10% -ным изопропиловым спиртом. Фракции, содержащее целевое соединение, объединяют и концентрируют, чтобы удалить изопропиловый спирт. При лиофилизации получают 159 г 7 бета/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-ацетамидо -2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилата (син-изомер). Т. плавления 160^оС (с разложением).

ИК-спектр (нуйол): 3200, 1770, 1600 см^-1.

ЯМР-спектр (в тяжелой воде), б: 2,26 (3Н, синглет), 3,10 (1Н, дублет, I = 18 Гц), 3,47 (1Н, дублет, I = 18 Гц), 3,8-4,1 (4Н, мультиплет), 3,95 (3Н, синглет), 5,20 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 5,32 (2Н, синглет), 5,77 (1Н, дублет, I = 5 Гц), 6,93 (1Н, дублет, I = 3 Гц), 6,94 (1Н, синглет), 8,16 (1Н, дублет, I = 3 Гц).

Следующие соединения примеры 14 и 15 были получены по методике, аналогичной описанной в примере 2.

П р и м е р 14. 7 бета/2-/2-аминотиазол/-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/4-метил -3-амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1765, 1660, 1605 см^-1.

П р и м е р 15. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-ацетамидо -2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3200, 1770, 1600 см^-1.

Следующие вещества (примеры 16-20) были получены по методике, аналогичной описанной в примере 3.

П р и м е р 16. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3- амино-2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1770, 1640 см^-1.

П р и м е р 17. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-/дифторметоксииминоацетамидо/-3- /3-амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1760, 1660 см^-1.
П р и м е р 18. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-амино -2-/2-карбамоилоксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3200-3300, 1760, 1710, 1650 см^-1.

П р и м е р 19. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/4-метил -3-амино-2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3300, 1765, 1660, 1605 см^-1.

П р и м е р 20. 7 бета-/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоацетамидо/-3-/3-ацетамидо-2- /2-гидроксиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер).

ИК-спектр (нуйол): 3200, 1770, 1600 см^-1.

Метод испытания. Противомикробную активность вне организма определяют методом двухкратного разбавления агаровой пластинки, как описано ниже.

Одну петлю ночной культуры каждого испытуемого штамма в триптиказо-соевом бульоне (10⁸ жизнеспособных клеток на 1 мл) наносят полосами на агар сердечного экстракта (Н1-агар), содержащий постепенно изменяющиеся концентрации представительного испытуемого вещества, причем минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) выражают в единицах мкг/мл после выдерживания при 37^оС в течение 20 ч.

Испытуемое вещество. 7 бета-/2-(2-аминотиазол-4-)-2-метоксииминоацетами- до/-3-(3-амино-2- (2-гидроксиэтил)-1-пиразолио)-метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер) - вещество примера 4.

Результат испытания
Сравнительные испытания
1. Метод испытаний
Такой же, как описан выше.

2. Испытываемое соединение
Испытываемое соединение (1): 7 -/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-/дифторометокси- имино/ацетамидо/-3-/3-амино -2-/2-гидроксиэтил/-1-пиразолио-метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер) (соединение из примера 3).

Испытываемое соединение (2): 7 -/2-/2-аминотиазол-4-ил/-2-метоксииминоаце- тамидо/-3-/4-метил-3- амино-2-/2-гидросиэтил/-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер) (соединение из примера 17).

Испытываемое соединение (А): 7 -/2-/2-аминотиазолил-4-ил/-2-/дифторометок- сиимино/ацетамидо/-3- /3-амино-2-метил-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер) (соединение из примера 67 ЕР N 0223246).

Испытываемое соединение (В): 7 -/2-/2-аминотиазолил-4-ил/-2-метоксиимино- ацетамидо/-3-/4-метил-3- амино-2-метил-1-пиразолио/метил-3-цефем-4-карбоксилат (син-изомер) (соединение 89 из ЕР N 0223246).

3. Результат испытания - табл. 2.

Таким образом, предложенный способ позволяет получить соединения с более высокой антибактериальной активностью по сравнению с известными аналогами. (56) Европейский патент N 0223246, кл. С 07 D 501/46, 1987, опубл.

WO 86/00070, кл. С 07 С 501/46, опублик. 1986.

Европейский патент N 0307804, кл. С 07 D 501/46, 1989.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ЦЕФЕМА общей формулы I

где R₁ - амино-или защищенная аминогруппа;
R₂ - низший алкил или фторированный метил;
R₃ - COO ^- , карбокси или защищенный карбокси;
R₄ - гидрокси(низший)алкил или защищенный гидрокси(низший)алкил;
R₅ - амино или защищенная аминогруппа;
R₆ - водород или метил,
или его аддитивной соли трифторуксусной кислоты, его аддитивной соли серной кислоты или его соли с трифторацетатом, отличающийся тем, что осуществляют взаимодействие соединения формулы II

где R₁ и R₂ имеют указанные значения;
R₃^a - карбокси или защищенный карбокси;
Y - хлор или ацетокси,
или его соли с соединением общей формулы III

где R₄ - R₆ имеют указанные значения,
или его солью в присутствии иодида натрия, иодотриметилсилана или хлортриметилсилана и при желании в полученном соединении I, где R₁ - защищенная аминогруппа, или его аддитивной соли трифторуксусной кислоты, его аддитивной соли серной кислоты или его соли с трифторацетатом, удаляют группу, защищающую аминогруппу с образованием соединения I, где R₁ - амино, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом; в полученном соединении I, где R₃ - защищенный карбокси, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом, удаляют группу, защищающую карбокси, с образованием соединения I, где R₃ - COO ^- или карбокси, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом; или в полученном соединении I, где R₄ - защищенный гидрокси(низший)алкил, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом, удаляют группу, защищающую гидрокси, с образованием соединения I, где R₄ - гидрокси(низший)алкил, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом; в полученном соединении I, где R₅ - защищенная аминогруппа, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом, удаляют группу, защищающую амино, с образованием соединения I, где R₅ - амино, его соли присоединения трифторуксусной кислоты, его соли присоединения серной кислоты или его соли с трифторацетатом.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2