Способ фиксации нервной ткани
Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Целью изобретения является повышение качества способа. Цель достигается тем, что фиксацию проводят в изотермических условиях, при этом в начале определяют значения объема системы тканьфиксатор, далее регистрируют динамику уменьшения системы ткань-вода-этанол, а окончание фиксации определяют по полному выходу воды из ткани и замене ее на спирт, т.е. до момента стабилизации системы ткань-фиксатор . При предложенной фиксации нервная ткань не повреждается, при последующей гистологической обработке ткань сохраняет свою структуру.
СОВХОЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
- ЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГOCflATEHT СССР)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
1 (21) 4865701/14 (22) 21.06.90 (46) 30,01.93. Бюл. N 4 (71) Смоленский государственный медицинский институт (72) B.À. Глотов (73) Смоленский государственный медицинский институт (56) Волкова О.В, и др. Основы гистологии с гис гологической техникой, M,: Медицина, 1971, с.127,, (54) СПОСОБ ФИКСАЦИИ НЕРВНОЙ ТКАНИ
Изобретение относится к области нейрогистологических исследований и может найти применени» для определения окончания флксации.
Способ осуществляют следующим образом.
Фиксируемый образец биологической ткани, этанол и мерный сосудтермостатируют раздельно для приведения их к одинаковой температуре (наилучшей температурой является 20-24 С). Мерный сосуд должен иметь объемную шкалу, Фиксация проводится и ри вы бра н ной температуре, лежащей в указанном выше интервале, Для чего фиксируемый образец биологической ткани опускают на дно мерного сосуда, покрытое 5-6 слоями марли и наливают в него этанол до определенной метки на объемной шкале и герметично закрывают для исключения испарения этанола.
„„« 43 „„1792529 А3 (57) Изобретение сносится к медицине, а именно к гистологии. Целью изобретения является повышение качества способа, Цельдостигается тем, что фиксацию проводят в изотермических усл:>виях, при этом в начале определяют значения объема системы тканьфиксатор, далее регистрируют динамику уменьшения системы ткань-вода-этанол, а окончание фиксации определяют по полному выходу воды из ткани и замене ее на спирт, т.е, до момента стабилизации системы ткань-фиксатор, При предложенной фиксации нервная ткань не повреждаегся, при последующей гистологической обработке ткань сохраняет, свою структуру.
Через определенные промежутки времени, различные в зависимости от размеоов образца ткани (для образца объемом менее
1 см промежутки времени равны 10 мин), измеряют объем системы ткань-этанол и результат отображают на графике зависимости объема системы ткань-этанол от времени нахождения образца в этансле, Получаемые на графике точки плавно соединяют кривой.
Фиксируемый образец биологической ткани выдерживают в этаноле до момен1а появления на графике "плато", указывающее на полное пропитывание образца этанолом и его полную фиксацию. Образец извлекают из этанола и проводят с ним дальнейшие гистологические манипуляции.
Объемные процессы, происходящие при фиксации образца биологической ткани в этаноле, можно описать следующими объемными уравнениями;
1792529 (Vò+ Vâ} (Vс+ Vc) =-(V, + Vc)+
I 1
+ (Чв+ Vcj + (Чт+ Чв) = Чт» Чв- ДЧ;
I.
V„+ V,1 = (Ч, + Ч,1) + ДЧ11;
Чв + Чс = (Чв + Чст » AV
III, ДЧ= AV +ДЧ -ДЧ;
Формула изобретения
Составитель Л.Стебаева
Техред M.Ìoðråíòàë Корректор Т.Палий
Редактор А. Егорова
Заказ 175 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государствен» oro комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113235, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 где VT — объем сухой ткани, Чв — объем с вобод ной воды в тка ни, Чс — объем этанола, переходящего в
I ткань при фиксации, Vc — объем этанола, остаюЩегося в растворе, ф/, ДЧ, ДЧ, Д Ч вЂ” дополнения до аддитивности объемов, () — бинарная система.
Суть предложенного способа заключается в определе» ии момента уменьшения объема системы ткань-этанол на величину
ДЧ, что будет свидетельствовать об окончании фиксации, т.е. полной пропитке образца этанолом, При определении окончания фиксации определяют момент появления на графике зависимости объема системы ткань-этанол от времени прямой, лежащей параллельно оси времени(плато"), Прямая появляется в том случае, если процесс диффузии этэнола в ткань и свободной воды из ткани заканчивается: происходит полное пропитывание ткани этанолом, объем системы ткань-этанол стабилизируется, объем системы уменьшен, ra максимально теоретически возможную величину и в .зотермических условиях hV.
При различных способах регистрации изменения обьемп системы ткань-этанол в процессе фиксации. точность определения момента наступления "плато" будет различной. В любом случае момент установления
"плато" растягивается во времени, тэк как при переходе графической кривой в "плато" необходимо образец выдержать в этаноле до следующей регистрации, чтобы убедить.5 ся в истинности "плато", если при следующей регистрации объем системы ткань-этанол будет уменьшаться далее, то образец выдерживают до следующей регистрации объема системы и так до тех пор, 10 пока наступление "плато" не станет очевидным, после этого фиксацию прекращают, Пример 1, Биоптой головного мозга, изолированный от трупа, массой 1670 мг и объемом 1,6 см, 96 этанол, устройство для
3 о
15 фиксации биологической ткани со всеми принадлежностями термостатировали в течение часа при температуре 22 С, Затем в соответствии со способом, описанным выше, зарядили устройство этанолом.и через
20 каждые 10 минут регистрировали уровень фиксатора в отводном патрубке устройства.
Через 14 часов от начала фиксации на графике появилось "плато". Фиксацию окончили.
25 Способ позволяет точно определить время окончания фиксации, и ри этом не требует проведения с фиксируемым образцом каких-либо манипуляций после начала фиксации.
30 При определении окончания фиксации фиксируемый образец сохраняется.
35 Способ фиксации нервной ткани путем погружения в этанол, отличающийся тем, что, с целью повышения качества способа за счет сохранения структурных взаи моотношений, фиксацию проводят в
40 изотермических условиях, при этом вначале определяют значения объема системы ткань-фиксатор, далее регистрируют динамику уменьшения значения этой системы, а окончание фиксации определяют по стаби45 лизации этого значения.
