Способ хроматографического разделения и анализа желчных кислот
Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к биохимии. Целью является ускорение и повышение точности анализа и разделения желчных кислот. Проводят две стадии разделения на тонкослойной пластине. На первой стадии разделения осуществляют элюирование в системе хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода, а на второй стадии разделения используют ту же систему растворителя, но без воды в соотношении 55-60:32-35:13-15.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
1 (19) (I I) (яи G 01 N 30/90
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ (21) 4490029/25 (22) 03,10.88 (46) 29.02.92. Бюл. М 8 (71) Научно-исследовательский институт краевой патологии (72) Е.А.Изатуллаев (53) 543.544 (088.8) (56) Златкис А. Высокоэффективная тонкослойная хроматография. М.: Мир. 1979, с, 15-20..
Enегоth P. Thin — layer Chrom. of Юс ale.
Ь Lipid Chrom analysis. US., New-Jork., Вазед
М. 1976, р. 819-856.
Изобретение относится к хроматографическому разделению и анализу тонкослойной хроматографией липидов в живых. организмах, в частности желчных кислот.
Известен способ разделения и анализа тонхослойной хроматографией смесей веществ путем нанесения пробы на пластину с сорбентом и разделения в потоке элюента.
Известен также способ разделения и анализа желчных кислот тонкослойной хроматографией путем нанесения пробы на пластину и элюирования в системе растворителей хлороформ-метанол-ледяная уксусная кислота-вода.
Однако известный способ характеризуется недостаточным отделением фосфолипидов от желчных кислот и близким расположением некоторых кислот к фронту растворителей. (54) СПОСОБ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО
РАЗДЕЛЕНИЯ И АНАЛИЗА ЖЕЛЧНЫХ
КИСЛОТ (57) Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к биохимии. Целью является ускорение и повышение точности анализа и разделения желчных кислот. Проводят две стадии разделения на тонкослойной пластине. На первой стадии разделения осуществляют элюирование в системе хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода, а на второй стадии разделения используют ту . же систему растворителя, но без воды в соотн.ошении 55 — 60:32 — 35:13 — 15.
Целью изобретения является ускорение, упрощение анализа и повышение точности определения.
Способ осуществляют следующим образом.
Пробу цельной желчи наносят на стартовую линию пластины с сорбентом и помещают в камеру с системой растворителей хлороформ-метанол-ледяная уксусная кислота-вада (65:25:11:5). После прохождения фронтом растворителей места нанесения проб на 1,0-1,5 см пластину высушивают и опускают в другую камеру с системой растворителей хлороформ-метанол-ледяная уксусная кислота в соотношении
55-60:32-35:13-15 противоположным первой стадии разделения краем, затем высушивают с подогревом, опрыскивают спиртовым раствором фосформолибденовой кислоты и прогревают при Т = 100—
120 С в течение 1 — 2 мин. Кислоты проявляются в виде синих пятен, фосфоли1718434
Составитель Л. Жаркова
Техред ММоргентал Корректор М. Шароши
Редактор С.Лисина
Заказ 609 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственмо-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 пиды разделяются на фракции и не накладываются на кислоты.
Проявленные пятна денситометрируют на спектрофотометре с отсечением фона, По соотношению пиков денситограмм фракций пробы и стандартов рассчитывают количественное содержание в желчи отдельных желчных кислот. Фракции фосфолипидов находятся у линии старта и тоже определяются.
При данном способе.нет необходимости в псе.чварительной экстракции.
Формула изобретения
Способ хроматографического разделения и анализа желчных кислот в тонком слое сорбента путем нанесения пробы на пластину и злюирования в системе растворителей хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода. отличающийся тем, что, с целью
5 ускорения, упрощения анализа и повышения точности определения, дополнительно проводят разделение в направлении, противоположном разделению на первой стадии, причем на второй стадии разделения
10 элюирование проводят в системе растворителей хлороформ-метанол-ледяная уксусная кислота при соотношении компонентов 55-60:32-35:13-15 соответственно.