Способ консервирования гемопоэтических клеток эмбриональной печени человека
д) А 01 !! 1/02
«
1
1
1
«Ю« « .< 4 <«"Д ! а
S ф (21) 4 772894/14 .(22) 22. 11,89 (46) 23.01.92. F ë. 3 (71) )He TèòóT f1po ë<" ì криобиологии криоие ицины АН УССР (72) Г. С . Л збынце ва, В. И. Грищенкг,, И,А.Вотякова, С.Т.Олейник, Э.И.Обо"-!i, Г.В.Герасименко и А.А.Э; волока (53) 6 12,015(088.8) (54) .ÏОСОВ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ГЕИОПОЭТИЧЕСКИХ КЛЕТОК ЭМБРИОНАЛЬНОЙ, ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА
Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для низкотеипературного консервирова:. я гемопоэтических клеток эмбриональной печени.
Цель изобретения — псвншение сохранноси гемопоэтических клеток эмбриональной печени, Пример. Суспензию геиопоэги» еских клето <, вылеленную из эмбриональной печени, смешивают 1: 1 с
<0 и 20 -ными растворами криопротектора ДИСО, приготовленньм на растворе
Хенкса, до получения концентрации
ДМСО 5 и 104, затем разливают в цилиндрические пластиковые контейнеры с инициаторами кристаллообразования по 1,5 ил, гериетизируют и помецают в ku. .àðó устр -йства программного охлаждения (УОП 6000 000). Время экспозиции легок при комнатной температуре 20 !-<,н. Взвесь охлаждают г, три -.«тапа. н. первом с0 скоростью
1 С/и.ч! д» -,3,5 С, на втором 0,3 С/ о со.- о
2 (57) Изобретение относится к биологии и медицине, Цель изобретения по:; !шение сохр,.нности гемопоэтических клето » эмбриональной печени . Клетки замораживают в присутствии крио ротекгора 5-104-ного дииетилсульфсксида в три этапа: на первом со cvnростью 1,0-1,4 град/мин до (-3,5)(-4) С, на втором 0,3-0,5 град/иин цо (-7)-(-8) С на третьем 4t о
6 град/мин до (-80) - (-196) С.
/иин до -7 С, на третьем 5оС/иин до
О
-t96 /С отогрев производят в BopR ной бане при 40 С
Сохранность клеток определяют путем эксплуатации в агар 100 000 клеток на чашку Петри и подсчета суммы колоний и кластеров (КОЕ-ГМ), выпосших в культуре на 8- 1О сут.
Способ консервирования гемопоэтических клеток эибриональной печени человека обеспечивает высокую сохранность КОГ-ГМ, которые образуют в агаре колонии и кластеры в таком же количестве, как и натичный материал и в те же сроки на 7 сут. формула изобретения
Споссб консервирования геиопоэтических клеток эмбриональной печени человека путем инкубирования в присутствии криопротектора дииетилсульфоксида, замораживая я с послелуюции оттаиванием, о т л и ч а ю j
1 С ..4z
° ° . ° .
Составитель Jl.!<онюхова
Техрел М. Дидик
Редактор О,Головач корректор H. Ýð/1eé
Заказ 2 1Ъ
ТИраи Подписное
ВНИ11ПИ Государственного комитета по иэобретениям и открытиям при ГКИТ СССР
113 135, москва, <-35, Раушс . эя наб., д. 4/5
Прочэводственно-издательский комбинят "Пате -"„г. Ужгород, ул. Гагар. на,101
qем, то, с < j -. п;:.;".: "" со
З ЪЮ (- ° . - P (° ъ
-.с вл",ю в три э, зп,! и,. .", это: Ihcj
pj=pp a. Эт" g ; »;) .. ия "Т СО СКО; О»
<-е- . ст ь 1 C / è:,.; /О.=3,, > с, н в с,,r. м э . пе
c;j сi:г, стью 0,3 С/мин ДΠ— j С на э тре I j<-i "i j,,пе гО око достаю g С/мин -,о
-106" Ñ.
