Способ прогнозирования течения интегументных форм красной волчанки

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Изобретение относится к медицине , а .именно к дерматовенерологии, и может применяться для определения длительности ремиссии интегументных форм красной волчанки. Цель изобретения - повышение точности предлагаемого способа за счет определения длительности ремиссии. Для этого в сыворотке крови, взятой до начала лечения , в иммуноферментном анализе определяют антитела к нейраминидазе. В зависимости от полученных результатов определяют характер дальнейшего течения болезни. Положительный эффект предлагаемого изобретения заключается в том, что точность определения длительности ремиссии повышается до 90,9-92,8% по сравнению с прототипом- 56 определением антител к лактатдегидрогеназе. (Я

СОЮЗ ССВЕТСНИХ

СС(ф1ДЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (191 (11) (gg) g G 0 1 N 33 / 53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 М3 4 lp & Юд

:Т \+ -(„0

К АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4469851/14 (22) 02.08.88 (46) 15.12.91. Бюл. ¹ 46 (71) Нижегородский медицинский институт им. С.М.Кирова и Нижегородский научно-исследовательский кожно-венерологический институт (72) Т.А.Главинская, А.В.Резайкина и B.Ä.Êîìàðîâà

° (53) 615.373 (088.8) (56) Система комплемента. Сб.н.тр.

Всесоюзн. гематологического научного центра Кировского НИИ гематологии и переливания крови, М., 1988, с. 106107. ($4) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ

ИНТЕГУИЕНТНЫХ ФОРМ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКИ (57) Изобретение относится к медициИзобретение относится к медицине, а именно к дермато-венерологии, может применяться для определения длительности ремиссии интегументных форм красной волчанки (ИКВ) °

Цель изобретения вЂ” повышение точности способа за счет определения длительности ремиссии.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу, включакщему определение в сыворотки крови антител против внутриклеточных ферментов выявляют в. сыворотке крови антитела . к нейраминидазе и при их наличии прогнозируют длительность ремиссии в ,пределах 4-9 мес, а при отсутствиивЂ” более. 9 мес °

/ не, а .именно к дерматовенерологли, и может применяться для определения длительности ремиссии интегументных форм красной волчанки, Цель изобретения вЂ” йовышение точности предлагаемого способа эа счет определения длительности ремиссии. Для этого в сыворотке крови, взятой до начала лечения, в иммуноферментном анализе определяют антитела к нейраминидаэе. В зависимости от полученных результатов определяют характер дальнейшего тече- ния болезни. Положительный эффект предлагаемого изобретения заключается в том, что точность определения длительности ремиссии повышается до, 90,9-92,87. по сравнению с прототипом- Е определением антител к лактатдегидрогеназе.

Способ осуществляется следукицим образом.

При поступлении у больного берут, кровь из вены натощак в количестве

5-6 мл и после 15-минутной инкубации в термостате при 3.7 С центрифугируют и отделяют образовавшуюся сыворотку.

Полученную таким образом сыворотку разводят сорбентом (мясопептонным бульоном и т.д.).по предварительно установленному титру. Ставят иммуноферментный тест (ИФА). В качестве твердофазного носителя применяют полистироловые планшеты с 96 лунками .

Пластины .сансибилизируют коммерческим препаратом нейраминидазы, нехолерных. вибрионов, в разведении по титру в

1698779, количестве 0,2 мл, растворенным в, дистиллированной воде с последующей инкубацией в течение 18-20 ч при комнатной температуре. После трехкратного отмывания в физиологическом растворе с твином-20 на высушенные плашки наносят испытуемые сыворотки (по

0,2 мл), разведенные по титру s сорбенте и выдержанные в термостате при, 37 С в течение 1 ч. Плашки помещают о в термостат при 37 С на 30 мин. После зтого плашки промывают, высушивают, наносят по 0,2 мл конъюгата и инкубируют в термостате в течение 30 мин.

Конъюгатом служат сухие кроличьи антитела против иммуноглобулинов человека, меченные пероксидазой хрена, растворенные в сорбенте и в изотоническом pacTBopet

1: 1. Индикатором является 5-аминоса" лициловая кислота с 0,05 -ной Я О .

При каждой постановке реакции ставят контроли: контроль положительной сыворотки (АГ+СВ+КТ+СБ), контроль отри- 25 цательной сыворотки (АГ+СВ+КТ+СБ), контроль субстрата (АГ+ФР+ФР+СБ), конторль конъюгата (АГ+ФР+КТ+СБ).

Кроме того, для определения специфичности полученных результатов : ставили следующие контроли: плашки без нейраминидазы + конъюгат + сыворотка больного; плашки без нейраминидазы +

+ сыворотка больного с положительной реакцией с последующим истощением

I препаратом нейраминидазы + конъюгат,!. 35 плашки без нейраминидазы + нейрамини-, даз + конъюгат. После приливания субстратной смеси контроли должны быть все отрицательными.

Реакцию учитывают визуально или проводят инструментальную оценку. В лунках планшета, где прошла реакция, появляется окрашивание от светло- до темно-коричневого. В лунках, где проводилось исследование отрицательной сыворотки, цвет субстрата светлоили темно-бежевый.

При визуальной оценке результатов

ИФА бесцветный.и светло-бежевый суб- страт соответствует отрицательным ре- >0 зультатам, бежевый, темно-бежевыйвЂ”

1 кресту (отрицательный результат), . .бежевый, коричневый - 2 крестам, 4 светло-коричневый вЂ” 3 крестам, ко сс ричневый и темно-коричневый - 4 крес-, 5 гам.

2"крестовые и выше результаты счи;али положительными, т.е. определяли наличие антител к неираминидазе и длительность ремиссии в пределах 49 мес.

Пример 1. Б-й, С-в, 30 лет, находился в дерматологической клинике с 12.03 по 23.04.87 по поводу дискоидной красной волчанки. В сыво» ротке крови обнаружены антитела против нейраминидазы, прогноэирующие длительность ремиссии 4-9 мес. Проведено лечение. Выписан со значительща улучшением клинических проявлений.

Прогноз подтвердился дальнейшим течением болезни. Обострение наступило через 6 мес после первой выписки.

Пример 2. Бй Бн, 47лет., находился в клинике с 20.01 по

16.03.87. При поступлении в сыворот ке крови зарегистрировано отсутствив антител к нейраминидазе, что прогна зировало -длительность ремиссии более

9 мес и наличие антител к лактатдегидрогеназе. Проведено лечение. Больной выписан с исчезновением клиничес ких проявлений. Длительность ремиссии подтвердилась катамнестическим наблюдением. Ремиссия болезни наблюдается более .2 лет.

В настоящее время предлагаемым способом прослежена .длительность ремиссии у 25 больных ИКВ (3 женщины и

22 мужчины). Длительность заболевания от 1 года до 17 лет, возраст больных от 20 до 60 лет.

Исследования обработаны статистически с применением критерия Пирсона-Х (хи-квадрат) .

Из 25 больных ИКВ антитела к нейраминидазе, позволяющие определять длительность ремиссии в пределах 49 мес, обнаружены у 14, при дальнейшем наблюдении длительность ремиссии подтвердилась у,13 (точность способа

92,8 ), в то время, как положительные результаты по выявлению антител к лактатдегидрогеназе,(прототип) были лишь у 4 больных с длительностью ре-, миссии 4-9 мес (точность способа прототипа 30,8 ). Следовательно, точность определения длительности ремиссии с помощью предлагаемого способа повышается (Х = 7,6 р (0,01).

Отрицательные результаты по выявлению антител к нейраминидазе, поэволяющие прогнозировать длительность ремиссии более 9 мес, были у 11 больнЫх. Продолжительность такой ремиссии подтвердилась у 10 больных ИКВ

1698779

Составитель П. Бонарцев

Редактор Л.Веселовская Техред g.дидык

Корректор Л.Обручар

Заказ 4391 . Тираж . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по. изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Рауаская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина, 101 (точность способа 90,9%). Отрицательные результаты прототипа зарегистрн4 рованы .у этих больных лишь в 2 случаях (точнссть прототипа 20,0%).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность при onpe t ° .

;(делении длительности ремиссии более

9 мес (Х = 7,1; р (0,01).

Формула и з о б р е т е н и я

Способ прогнозирования течения ин тегументных форм красной волчанки путем иммунологического исследования сыворотки и выявления антител к фер менту с последукицим анализом, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности за счет определения длительности ремиссии, выявляют антитела к ферменту нейраминидазе и при их наличии определяют длительность ремиссии в пределах 49 мес, а при их отсутствии вЂ” более

9 мес.

Изобретение относится к медицине , преимущественно к педиатрии, может быть использовано для предупреждения осложнений острых респираторных инфекций у детей

Способ определения адгезии лейкоцитов // 1697008

Изобретение относится к клинической иммунологии, а также для диагностики специфической сенсибилизации лейкоцитов у обследуемых лиц

Способ диагностики острого кишечного заболевания, вызываемого условно-патогенными энтербобактериями у детей // 1697007

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики острой кишечной инфекции, вызванной условно-патогенными энтеробактериями у детей

Способ получения меченных астатом-211 моноклональных антител // 1695757

Изобретение относится к радиохимии и радиотерапии, а именно к получению меченных 1 моноклональных антител (МКАТ), и может быть использовано в ядерной медицине для избирательной доставки чистого 2 к опухолям при лечении раковых образований

1-аминонафталин-5-сульфамиды в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз и 1- бензилоксикарбониламинонафталин-5-сульфамиды в качестве полупродуктов для получения 1-аминонафталин-5-сульфамидов // 1695635

Способ иммуноферментного определения миоглобина // 1691755

Изобретение относится к иммунодиагностике , в частности к иммуноферментным способам определения миоглобина

Способ проведения точечного иммуноферментного анализа // 1691754

Изобретение относится к методам исследования , применяемым в биологии и медицине , в частности к проведению точечного иммуноферментного анализа (ТИФА )

Способ определения активности антителообразующих клеток // 1691753

Изобретение относится к иммунологии и может найти применение в клинической практике для оценки состояния гуморального иммунитета и в биотехнологии

Способ оценки эффективности лечения ревматоидного артрита // 1691752

Изобретение относится к медицине, преимущественно к ревматологии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения ревматоидного артрита Целью изобретения является повышение точности оценки

Способ диагностики аллергии // 1691751

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями

Способ диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных детей // 2101707

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных

Способ выявления высокоаффинных поли- и моноклональных антител к водонерастворимым гаптенам // 2102080

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к методам иммунохимического определения гаптенов (ксенобиотиков) в образцах биологического происхождения и объектах окружающей среды, и может быть использовано для выявления высокоаффинных поли- и моноклональных антител к водонерастворимым гаптенам

Иммуногенная композиция против боррелиоза лайма, способ иммунизации млекопитающего против боррелиоза лайма, способ получения белка pc borrelia burgdorferi, диагностический агент для обнаружения b.burgdorferi и способ обнаружения антител к b.burgdorferi // 2102081

Изобретение относится к предотвращению болезни Лайма у млекопитающих

Устройства для автоматического проведения иммуноанализа за несколько последовательных этапов по меньшей мере одного биологического вещества из множества биологических образцов, способ и реактив для применения указанных устройств // 2102758

Изобретение относится к устройству для автоматического проведения иммуноанализа за несколько последовательных этапов по меньшей мере, одного биологического вещества из множества биологических образцов, а также к способу и реактивам для использования указанного прибора

Способ обнаружения или количественного определения аналита в образце // 2102759

Изобретение относится к анализам и, в частности к катализируемому осаждению репортера через активированный конъюгат для усиления детектируемого сигнала, вследствие чего улучшается детекция и/или количество аналита в образце

Способ обнаружения или количественного определения аналита в образце // 2102759

Способ определения биологически активных веществ в жидкостях и устройство для его осуществления // 2102760

Изобретение относится к области медицины, медицинской техники, ветеринарии, экологии и может быть использовано для определения биологически активных веществ в любых биологических жидкостях, окружающей среде, пищевых продуктах, в частности в диагностике вирусных, бактериальных, паразитарных и соматических заболеваний, а также для контроля эффективности лечения

Способ диагностики спаечной болезни брюшины у детей // 2103689

Изобретение относится к медицине, а именно к детской хирургии и клинической иммунологии, и может быть использовано для диагностики спаечной болезни брюшины у детей, оперированных по поводу острого аппендицита

Способ определения функциональной активности лейкоцитов при беременности // 2103690

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и может быть использовано для оценки состояния иммунной системы беременной женщины

Способ диагностики хронического простатита // 2103691

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для диагностики хронического простатита