Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга

 

Изобретение относится к медицине, а именно к нейробиологии Целью является получение полного отдела пириформного отдела мозга. Цель достигается тем, что специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида, иссекают отдел миндалевидного комплекса. При этом угол иссечения устанавливают от 18-20° к продольной оси мозга. Способ позволяет получить пириформную долю мозга с сохраненными нейтральными связями

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 G 01 N 1/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4282584/14 (22) 09.07.87 (46) 23.09.91. Бюл, N. 35 (71) Башкирский государственный университет им, 40-летия Октября (72) Л,Б, Калимуллина и С.M. Федотов (53) 616-0.89,9(088,8) (56) Митюшов М.И. и др. Переживающий срез мозга как объект нейрофиэиологического и нейрохимического исследования,—

Л.: Наука, 1986, с. 28.

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейробиологии.

Целью является полное выделение миндалевидного комплекса пириформной доли мозга, Способ осуществляют следующим образом, Пириформная доля мозга включает в себя как часть миндалевидный комплекс, представляющий собой совокупность поверхностно расположен н ых структур обонятельной коры и глубинно расположенных ядер.

Для удаления этой части мозга предложен резец с емкостью в форме объемного образования — эллиптического параболоида, который позволяет получить в комплексе как обонятельную кору. так и глуббино-расположенные ядра миндалевидного комплекса.

После декапитации и извлечения мозга иэ черепа его располагают базальной по,, Я ÄÄ 1679246 А1 (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к нейробиологии, Целью является получение полного отдела пириформного отдела мозга. Цель достигается тем, что специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида, иссекают отдел миндалевидного комплекса. При этом угол иссечения устанавливают от 18 — 20 к продольной оси мозга, Способ позволяет получить пириформную долю мозга с сохраненными нейтральными связями, верхностью кверху. Устройством из пириформной доли мозга иссекают кусочек ткани, имеющий форму эллиптического параболоида с продольным размером, равным 5 мм. Иссечение проводят под углом

18 — 22 (оптимально 20 ) к продольной оси мозга.

Иссеченный кусочек ткани помещают основанием на столик, имеющий охлаждение, и разделяют с помощью вибротома на срезы, толщина которых варьируется в пределах 220-350 мкм.

Полученные срезы переносят в первую порцию инкубационной среды, в которой выдерживают 30 мин (преинкубация). В качестве инкубационной среды используют бикарбонатную среду Кребса-Рингера, в состав которой входят следующие компоненты, ммоль.л-1: NaCI 118; KCt 4,7; СаС12 2,5;

КНРО41,2; MgS041,2; NaНСОз25; глюкоза

10. Инкубационную среду при комнатной температуре насыщают газовой смесью, со1679246

Составитель Л. Стебаев

Техред М.Моргентал Корректор Э. Лончакова

Редактор Е. Пап п

Заказ 3203 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская нвб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 держащей 957. Ор и 5ф, СО2, С момента извлечения мозга из черепа до перемещения срезов в инкубационную среду должно пройти не более 5 мин, I

Нейрофиэиологические исследования проводят на срезах, которые после преинкубации помещают в свежую порцию инкубационной среды (" рабочая порция").

Фиксацию срезов (устранение их смещения при перемещении инкубационной среды) обеспечивают с помощью помещения их между двумя нейлоновыми сеточками. Для

-исследования срезов используют комплекс устройств и приборов, . предназначенных как для обеспечения длительного переживания срезов, твк и регистрации электрической активности компонентов нервной ткани. Под контролем микроскопа к различным структурам миндалевидного комплекса вводят стеклянные микроэлектроды с диаметром кончика до 10-20 мкм. Регистрируют вне- и внутри-клеточную активность и фокальные потенциалы в структурах палеокортекса (перивмигдалярная кора, ядро латерального обонятельного тракта) и ряда ядер миндалевидного комплекса (базомедиальное. медильное, кортикальное, базолатеральное, эндопириформные). Полученные результаты характеризуют электрофиэиологические ответы различных структур, а также их своеобразие, обусловленное взаимодействием различных образований миндалевидного комплекса, сохраняющих целостность и комплексность в составе срезов.

Морфологический контроль эффективности иссечения пириформной доли мозга и констатацию топографии введенного микроэлектрода осуществляют после завершения регистрации электрофизиологиМеских ответов путем окрашивания срезов гистологическими методами (крезиловым фиолетовым и гематоксилином-эозином).

Изучение микропрепаратов показало, что способ, реализуемый с помощью специ. ального устройства, обеспечивает изолированное выделение миндалевидного комплекса, а иссекаемые кусочки и срезы этого образования мозга полностью сохраняют свою структурную органиэацию.

5 Пример. Из мозга после выделения предлагаемым устройством иссекали под углом 20 к продольной оси мозга часть не более 5 мм . Предварительно делали разрез продольно с уровня перекреста зрительных

10 трактов вдоль медильной границы комплекса, Далее режущую поверхность, находящуюся на переднем крае резца, приводили в сопрокисновение с поверхностью мозга так, чтобы основание резца, стоящего верти-

15 кально, пришлось нэ уровень Inclsura

olfactorla. После этого резец погружали в ткань мозга на глубину выступа до 1,5 мм.

Затем положение резца меняли до 45 к поверхности мозга и устанавливали режу20 щую кромку до 90 к поверхности мозга.

Затем резец вводили наклонно вниз до полного заполнения резца тканью мозга. Из биоптата готовили срезы, которые помеща- . ли в питательную среду. Среды использова25 ли в дальнейшем для нейробиологических исследований. Морфологический и физиологический контроль срезов позволил установить наличие сохранных связей нервных клеток пириформной доли мозга.

30 Способ позволяет выделить полностью миндалевидный комплекс пириформной доли мозга с сохраненными нейтронными связями и использовать переживающие срезы в нейробиологических исследованиях.

Формула изобретения. Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга путем ис40 сечения ткани с последующей инкубацией в питательной среде, отличающийся тем, что, с целью полного выделения образования иссечение проводят по форме эл-.

1 липтического парвболоидв, при этом угол

45 иссечения уствнавливаютот18до 22 кпро. . дольной оси мозга.