Способ приготовления гистологических пленочных препаратов, расслоенных на пластины

 

Изобретение относится к способам приготовления пленочных препаратов. С целью одновременного выявления сосудов, нервов и соединительнотканного состава, импрегнацию осуществляют в 23-25%-ном растворе азотнокислого серебра при 37-38°С в течение 30-35 мин, проводят через аммиачное серебро с восстановлением в 0,5-1 %-ном растворе кислого формалина.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4407036/14 (22) 07.04,88 (46) 07.09,91. Бюл.N. 33 (7 Ф) Курганский научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической ортопедии и травматологии (72) Н.С.Шеховцева (53) 615.475(088.8) (56) Куприянов В.В.. Пути микроциркуляции, Кишинев, 1969, с.10-16.

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии и анатомии, и может быть использовано для изучения морфологических изменений, возникающих в пленочных препаратах, при моделировании различных заболеваний на животных, ведущих к утолщению оболочек (пленок) органов, Целью изобретения является получение максимального выхода высокой информативности пленочных препаратов с одновременным выявлением сосудов, нервов и соединительнотканного состава,а также сокращение времени импрегнации.

Предлагаемый способ реализуют следующим образом.

Свежие, тотальные полоски фасций, взятые вдоль оси голени, в расплавленном виде закрепляют на плотном картоне и фиксируют от 14 сут до 1 года в 10=,ь-ном растворе нейтрального формалина (рН 7,3-7,5), приготовленного на отстойной воде промывают в проточной воде 6-12 час и ополаскивают в дистиллированной воде, промокают фильтровальной бумагой и оставляют в 80 спирте на 25-30 мин, Ополаскивают (2-3 с) „„5U „„1674808 А1 (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПЛЕНОЧНЫХ ПРЕПАРАТОВ, РАССЛОЕННЫХ НА ПЛАСТИНЫ (57) Изобретение относится к способам приготовления пленочных препаратов. С целью одновременного выявления сосудов, нервов и соединительнотканного состава, импрегнацию осуществляют в 23-25$-ном растворе азотнокислого серебра при 37-38 С в течение 30-35 мин, проводят через аммиачное серебро с восстановлением в 0,5-1 -ном растворе кислого формалина. дистиллированной водой, слегка осушают фильтровальной бумагой, Помещают в свежеприготовленный раствор 23-25) -ного раствора аэотнокислого серебра при 3738 С в термостате на 30-35 мин в закрытых стаканчиках (бюксах). Ополаскивают от- 2 стойной (кипяченой, остуженной до комнатной температуры) водой, проводят каждую пластину отдельно через 5 стаканчиков 2 ьного раствора формалина (рН 7,3-7,5), Ополаскивают 0,5-1 мин дистиллированной водой, слегка осушают фильтровальной бумагой и погружают в аммиачное серебро (приготовленное перед его применением) на 3-4 мин, затем проводят через 0,5-1ф,ный раствор кислого формалина при рН

6,5-7,0 до приобретения коричневатого цвета.

Пример 1. Собака М 8312 (Интактное животное, Контроль). После эвтаназии брали полоски фасций вдоль оси голени, в расправленном состоянии закрепляли на плотном картоне, фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина в течение 75 дн (ежемесячно меняя формалин при той же концентрации), промывали в течение

1674808

Составитель А. Древаль

Редактор M. Бланар Техред М.Моргентал Корректор С. Черни

I Pl

Заказ 2950 Тираж 428 Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина. 101

12 ч в проточной воде и расслаивали на пластины, толщиной не более 100 мкм, Затем промывали в дистиллированной воде

25 мин, промокали фильтровальной бумагой, оставляли в 80 спирте на 35 мин. После этого быстро проводили через дистиллированную воду (2-3 с), слегка осушали фильтровальной бумагой и помещали в 25 -ный раствор аэотнокислого серебра при 38 С в термостате на 30 мин в закрытых стаканчиках (бюксах). Пластины преобретали желтовато- бежевый оттенок. Ополаскивали в отстойной воде (кипяченой, остуженной до комнатной температуры), проводили через 5 стаканчиков 27-ного раствора формалина (рН 7,3-7,5), ополаскивали дистиллированной водой 0,5 мин, слегка осушали фильтровальной бумагой и погружали в аммиачное серебро на 3 мин (готовят перед применением). Проводили через 0,5-1$-ный раствор кислого формалина (рН 6,5-7,0), до приобретения пластинами коричневого оттенка.

Для прекращения импрегнации пластины переносили на 10 мин в аммиачную воду, приготовленную на дистиллированной воде в соотношении 70; 80; 96(1); 96(TT);

100, Просветляли в толуоле, заключали в канадский бальзам, тщательно расправляли каждую пластину, плотно прижимая к стеклу. При микроскопии выявляется сосудистое русло, пучки волокон основного слоя и сопровождающие нервные волоконца.

Пример 2, Методика выполнения способа строго соответствует и риведен ному. Отличие состояло лишь в том, что используют 237ь-ный раствор аэотнокислого серебра при температуре 37 С. При микроскопическом исследовании одновременно

5 выявляют сосуды микроциркулярного русла, соединительно тканые структуры и нервные волокна.

Пример 3. При соблюдении всех условий предварительной подготовки при10 меров 1 и 2 при использовании 26 -ного азотнокислого серебра волокна основного слоя импрегнируются неравномерно, сосуды с явной передоэировкой окраски от темнокоричневого до черного цвета.

t5 Пример 4. Снижение концентрации серебра в растворе до 22 с сохранением других параметров приводило к неравномерной импрегнации звеньев сосудистого русла и слабому выявлению пучков волокон

20 основного слоя.

Формула изобретения

Способ приготовления гистологических пленочных препаратов, расслоенных

25 на пластины, путем фиксации формалином. промывки в воде и окраски в растворе азотнокислого серебра, отличающийся тем, что, с целью одновременного выявления сосудов нервов и соединительнотканно30 го состава, импрегнацию осуществляют в

23-25 -ном растворе азотнокислого серебра при 37-38 С в течение 30-35 мин, проводят через аммиачное серебро с восстановлением в 0,5-17ь-ном растворе кисло35 го формалина,