Способ определения азота, окисленного в растении
Изобретение относится к сельскому хозяйству , в частности к агрохимии, к способам определения форм азота в растениях. Целью изобретения является повышение точности определения. Определение окисленного азота осуществляют путем отбора пробы растения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде, содержащей восстановленный азот меченый N, гомогенизации пробы, экстракции водорастворимых соединений, осаждения белка, фильтрации, после чего в пробу добавляют окись магния и кипятят. Далее пробу последовательно обрабатывают ионообменными смолами КУ-2-4 и ДС-За и восстанавливают окисленный азот путем паровой дистилляции аммиака после введения окиси магния и сплава Деварда. Способ по изобретению позволяет повысить точность определения окисленного азота более чем на 37 % 1 табл сл
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (51)5 А 01 6 7/00
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4670916/13 (22) 31.03.89 (46) 30.04.91. Бюл. М 16 (71) Московская сельскохозяйственная академия им, К, А. Тимирязева (72) Н. A. Савидов, Б, А. Ягодин и И. В. Верниченко (53) 631.811.1(088,8) (56) Ягодин Б. А. и Верниченко И. В. Возможность окисления аммонийного азота в тканях растений до нитратов (опыты с N).
Известия АН СССР. Сер. "Биологическая", 1984, N. 2, с. 268-272. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗОТА, ОКИСЛЕННОГО В РАСТЕНИИ (52) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к агрохимии, к способам определения форм азота в растениях.
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к агрохимии, к способам определения форм азота в растениях.
Целью изобретения является повышение точности определения.
Пример. Растения картофеля высаживают в стерильные пробирки с 5 см стандартной среды Мурас иге — Скуга, содержащей 4 мг азота в форме (NH4)s04 с обогащением 5N 96,3 ат. ь, и культивируют в стерильных условиях в течение 2 мес. 3атем отбирают пробу свежих листьев картофеля массой 0,5 г, растирают в фарфоровой ступке, переносят в стеклянный стакан, емкостью 200 см с 40 см дистиллированной воды и выдерживают на паровой бане в течение 10 мин, после чего в стакан вводят раствор CuS04 и осторожно, при
„)5U(, 1644811 А1
Целью изобретения является повышение точности определения. Определение окисленного азота осуществляют путем отбора пробы растения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде. соержащей восстановленный азот меченый
N, гомогениэации пробы, экстракции водорастворимых соединений, осаждения белка, фильтрации, после чего s пробу добавляют окись магния и кипятят. Далее пробу последовательно обрабатывают ионообменными смолами КУ вЂ” 2-4 и ДС-За и восстанавливают окисленный азот путем паровой дистилляции аммиака после введения окиси магния и сплава Деварда. Способ по изобретению позволяет повысить точность определения окисленного азота более чем на 37,: 1 табл. M тщательном перемешивании — раствор О
Na0H, образовавшийся осадок отфильтро- ф, вывают, В полученном экстракте определя- фь, ют содержание нитратов 0р потенциометрическим методом с помощью ионоселективного электрода и ономера. Затем е фильтрат вводят 0,2 г М90 и кипятят в течение 5 мин, упаривают по 5 см, переносят в центрифужные пробирки емкостью,Л
10 см и центрифугируют со скоростью 5000 об/мин в течение 5 мин. Центрифугат наносят на колонку, заполненную смолой КУ вЂ” 2—
4, последовательно соединенной с колонкой с ДС вЂ” За и фильтруют со скоростью
0,5 см /мин до объема фильтрата 30 смз.
Обработанный экстракт переносят в реакционную колбу кварцевого аппарата
"полумикрокьельдаль", в которую после1644811 довательно вводят 0,2 r. окиси магния и 0,2 г сплава Деварда;и сразу проводят паровую дистилляцию со скоростью отгона 7,5 см, э
Определяют изотопный состав полученного аммиака на масс-спектрометре, после чего расчетным путем с учетом ранее определенного содержания нитратов в растении определяют количество окисленного в растениях азота, Результаты испытаний способа.по изобретению приведены е таблице, Для того, чтобы рассчитать точность определения окисленного азоте в 15,1 г сухих листьев картофеля (т. е. на 1000 растений), использовали следующив данные; содержа- 15 ние нитратов — 1,72 ; избыток обогащения
15Й сернок№слого аммония, введенного в питательную среду в начала культивирования растений картофеля — 95,2 ат.ф; избыток обогащеи№я Н нитрвтного азота растений, определенного в конце вегетации предлагаемым способом — 0.661 ат.ф, и в прототипе — 0,095 ат, $. Далее рассчитыва- . ли следующее общее количество нитратного азота
5 количество азота, окисленного в растениях согласно предлагаемому способу
95,2 — 185,8 (мкг/1000 растений);
10 точность известного способа (принимая точность предлагаемого способа за 100 ) 185,8 100 -635 g
292,4
Ка«видно иэ приведенного расчета, при использовании способа определения окисленного в растении азота согласно изобре20 тению повышается точность определения более чем на 37 .
25 Способ определения азота, окисленного в растении, включающий отбор пробырастения, культивируемого s стерильных условиях на питательной среде, содержащей восстановленный азот, меченый И, гомо1
30 гениэацию пробы. экстракцию водорастворимых соединений, осаждение белке, фильтрацию, восстановление азота. окисленного врастении,,и масс-спектрометрический анализ аммиака на содержение И, 15
35 о т л и ч à ю шийся тем, что, с целью повышения точности определения, после фильтрации в пробу вводят окись магния, кипятят пробу и обрабатывают последовательно ионообменными смолами KY-2- и ДС40 За, а восстановление азота, окисленного в растении; осуществляют путем введения в пробу окиси магния и сплава Деварда и перовой дистилляции аммиака, 16,1 1,72 1ЕЕ„2Е., „... „>
100 где 1000 — коэффициент перевода граммов в милиграммы; количество избыточного 5И; содержа-. щегося в нитратах согласно из ному спо. собу
290,0 0,095 1000
- 278,4 (мкг,/1000 растений); количество азота, окисленного в растениях согласно известному с особу — 292,4 (мкг/1000 растений);
95,2 количество избыточного И, содержащегося в нитратах согласно предлагаемому способу
290,0 0,061 1000 f00
= 176,9 (мкг/1000 растений);
Формула изобретения о
С5
Iv o
Ф
У С5
0
О С5
С5
С.}
CO
Cl
Ф о
X
Ф с С} Ч
CV W в cO
C4 C»I со о о о с
Р
)Я
Z
Iv
Ф
Ф I> о
CO х
С5
С5
I со 2 о ой
Ф о
С5
Q.
I»
З
1
Q о
О х ОО а.О, х х
Фgv
}- X о
Ф
IФ о
У
S } с о
О С5
У m
О
CO
O.
Ф
Ф о х
Ф с
Р
X
2. С5
О.
I»
}»
co m
} О Ф
Ф 5о.
5 о
CL
S а с
} о
ID о
Б о
LO
-o а
I»
S х
С5
l о
Ф
Z о о с
X
Im о со о
COCD 1.
CC} з
I»
СЛ о
CO
CL о
l о
X
Ф
С»
S
ЪС о с}
}С5 о . C7} о
OI а
С
О Ф
ФЕ ф }о CO х }c а о к
I- z
ЙФ
I»
z o.
m x
Б
z, Jl о с
v S о Ф
l о
Ф о
Ф
z.
Ф
Ф
С
Ф о.
С о
Z с}5
CL о х
}- }С5 Ф
}Яоа
CO С» Ф }- Ф Z Ф Ф Фо С5 С5 а о Ф Е S а О х }- x С5 Х ° 3(т о С5 Ф Ф Ф о <О c5 v. О с5 О с5 ms@ vSu С5 С5 zха Ф О О }С u a Z С О з а Ь с m !- Е 2 а o IQ C т Е }-О ХО а О, ° х Ф В Ф }С СЭ CD C0 С С в о в О С О О О С С Ф t» СО I Е еое О =О С С О -5© СО е» аCO СЧ СЧ поп О СЧО ОО С» M CO5О ОСОВ Ф CA С"Ъ О О О СЧ -О t CZ} С} } оо } ССР X > z о сЛУ 1644811