Способ определения 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-( @ -карбоксифенилацетамидо)- пенициллановой кислоты

 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к определению 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(α-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты. Цель - повышение точности, селективности определения и сокращение времени проведения способа. Получение ведут путем обработки анализируемой пробы раствором нитрата калия в конц. H<SB POS="POST">2</SB>SO<SB POS="POST">4</SB>, разбавления реакционной смеси водой. Процесс ведут с последующей обработкой полученной смеси раствором 2,3,5-трифенилтетразолия при PH 9, окрашенный продукт экстрагируют трихлорметаном и фотометрируют. Способ в 1,5-2 раза сокращает время проведения анализа и повышает точность определения (относительная ошибка уменьшается с 4% до 1,86%). 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СООИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„„BU „„1617336

А1 (51)5 Г 01 N 21/78

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1: .1.1: г т

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР . (21) 4661578/30-04 22) 13. 03.89 (46) 30.12.90. Бюл. Р 48 (71) Курский государственный медицинский институт (72) В,К.1Чорманов и Е.П. Дурицын (53) 543.42.063 (088.8) (56) Off.is M., Malaf V. Extrardnh

sqektrofotometricka stanoveni че

fërmàñåvtikà analyse. IV.

Nova extrac>cne spektrofotometr.icka stanoveni peni< illinu а oxytetracyklinu. — Ces Рагт., 1986, В. 35, 4" 3, 1. i99-121.

Фурсов А.Ф. Фотоколориметрическое определение феноксиметилпенициллина (пенициллина ФАУ). — Аптечное дело, 1962, ia 3, с. 63. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 6-(ФЕНОКСИАЦЕТАМИДО)-ПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ КИСЛОТЫ

И ДИНАТРИЕБОЙ СОЛИ 6-(КгКАРБОКСИИзобретение относится к аналитической химии, в частности к анализу б-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(g карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты и может быть применено в заводских контрольно-аналитических лабораториях, центральных заводских лабораториях химических предприятий.

Цель изобретения — повышение точности, селективности определения и сокращение времени проведения способа.

ФЕНИЛАЦЕТАГПЩО) -ПЕН1П(ИЛЛАНОВОЙ

КИСЛОТЫ (») Изобретение относится к аналитической химии, в частности к определению 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(-карбоксифенилацетамидо) †пенициллановой кислоты, Цель — повышение точности, селективности определения и сокращение времени проведения способа. Получение ведут путем обработки анализируемой пробы раствором нит— рата калия в конц. H SO<, разбавления реакционной смеси водой. Процесс ведут с последующей обработкой полученной смеси рас",вором 2,3,5-трифенилтетразолия при рН 9, окрашенный продукт экстрагируют трихлорметаном и фотометрируют. Гпособ в 1,52 раза сокращает время проведения анализа и повышает точность определения (относительная ошибка уменьшается с 4 до 1,862). 3 табл.

Пример 1. Определение 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты.

1. Качественное определение.

Около 2 мг 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты помещают в выпарительную чашку, вносят 0,5 мл

10Х-ного раствора нитрата калия в концентрированной серной кислоте и перемешивают содержимое чашки до полного растворения прореагировавraeA 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты. К полученному раствору прибавляют при перемешивании

1617336

1 мп води и порциями 10%-ный раствор гидроксидя натрия, перенося содержимое чашки в стеклянный стаканчик и одновременно таким образом нейтра5 лизуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН. Затеи прибавляют 5 мл универсального буфера, доводя реакцию среды до рН 9, и 4 мл 0,15%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида. Образующийся продукт экстра, гируют 10 мл трихлорметана. Слой трихлорметаня окрашивается в желтый цвет. Чувствительность реакции

2,5 мкг/мл.

2. Количественное определение.

Методом изомолярных серий и насыщения установлено, что 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановая кислота и 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид ,реагируют в молярном отношении 1:1. !

:Максимумы поглощения продукта реакции (раствор в трихлорметане) нахо,дятся при 374 и 415 нм. 25

Построение калибровочногб графика.

В шесть выпарительных чашек поме щяют 0,25; 0,50; 1,00; 1,50; 2,00 и

I2,50 мл 0,05%-ного ацетонового раст-! вора 6- (феноксиацетамидо) -пе ницилла, íîâîé кислоты и испаряют раствори тель до получения сухих остатков. В .каждую чашку вносят 0,5 мл 10%-ного

:раствора нитрата калия в концентриро,ванной серной кислоте и перемешива ют содержимое чашек до полного раст( ворения прореагировавшей 6-(феноксиацетямидо)-пенициллановой кислоты.

К полученным растворам прибавляют при перемешивании 1 мл воды и пор- 40 циями 10%-ный раствор гидроксида натрия, перенося содержимое чашек в стеклянные стаканчики .и одновременно таким образом нейтрализуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН. Затем прибавляют 5 мл универсального буфера (доводят реакцию среды до рН 9) и

4 мл 0,15%-ного раствора 2, 3,5-трифенилтетразолия хлорида. Образую50

Щийся продукт экстрагируют трихлориетаном дважды по 10 мл. Экстракты

Объединяют в мерной колбе емкостью

25 мл и доводят трихлорметаном до метки. Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют на,фото55 электроколориметре КФК-2 при длине волны 400 нм (светофильтр Р 3) в кювете с толщиной рабочего слоя

50 мм. Раствором для сравнения служит экстракт, полученный в контрольном опыте. По результатам измерений строят калибровочный график. Светопо глощение окрашенных ра створов подчиняется закону Бугера-ЛамбертаБера в интервале концентраций 550 мкг/мл. Методом наименьших квадратов расчитывают уравнение калибровочного графика, которое в данном случае имеет вид. D = 0,01596 С +

+ 0,01901, где D — оптическая ппотность, С - концентрация анализируемого вещества в фотометрируемом растворе, мкг/мл °

Методика количественного определения, Около 0,05 r (точная навеска)

6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты растворяют в мерной колбе емкостью 50 мл в ацетоне, 0,75 мл полученного раствора вносят в выпарительную чашку и дальнейшие операции осуществляют по схеме, описанной для построения калибровочного графика. Определение количественного содержания 6-(феноксиацетямидо)-пенициллановой кислоты проводят по уравнению калибровочного графика и пересчитывают на навеску. Результаты определения и метрологические характеристики представлены в табл. 1.

Пример 2. Определение динатриевой соли 6-(g-кярбоксифенилацетамидо)-пеницилляновой кислоты.

1. Качественное определение.

Околб 2 мг динатриевой соли 6-(06-кярбоксифениляцетя чидо)-пенициллановой кислоты помещают в выпарительную чашку, вносят 0,5 мл 10%-ного раствора нитрата калия в концентрированной серной кислоте и перемешивают содержимое чашки до полного растворения прореагировавшей динатриевой соли

6-Я-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты. К полученному раствору прибавляют при перемешивании

1 мл воды и порциями 10%-ный раствор гидроксида натрия, перенося содержимое чашки в стеклянный стаканчик и одновременно таким образом нейтрали.зуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН, Затем прибавляют 5 мл универсального буфера, доводя реакцию среды до рН 9, и 4 мл 0,15%-ного раствора

2,3,5-трифенилтетразолия хлорида. Образующийся продукт экстрагнруют 10 мл

16173 трихлорметана. Слой трихлорметана окрашивается в желтый цвет. Чувствительность реакции 0,8 мкг/мл, 2. Количественное определение.

Методом изомолярных серий и насыщения установлено, что динатриевая соль 6- (<-кар бок сифенилацетамидо)—

-пенициллановой кислоты и 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид реагируют в молярном отношении 2:1. Максимум поглощения продукта реакции (раствор в трихлорметане) находится при

375 нм.

Построение калибровочного графика.

В пять выпарительных чашек вносят

0,25; 0,50; 1,00; 1,50 и 2,00 мл стандартного (0,0257.-ного) этанольного раствора динатриевой соли 6-(g-карбоксифенилацетамидо)-пенициллано- 20 вой кислоты и испаряют растворитель до получения сухих остатков. В каждую чашку вносят 0,5 мл fOX-ного растраствора нитрата калия в концентрированной серной кислоте и перемешива- 25 ют содержимое чашек до полного растворения прореагировавшей динатриевой соли 6-(2 †карбоксифенилацетами)-пенициллановой кислоты. К полученным растворам прибавляют при переме- 30 шивании 1 мл воды и порциями 10 -ный раствор гидроксида натрия, перенося содержимое чашек в стеклянные стаканчики и одновременно таким образом нейтрализуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН. Затем прибавляют 5 мл универсального буфера, доводя реакцию среды до рН 9, и 4 мл 0,157.-ного раствора 2, 3,5-трифенилтетразолия хло- 40 рида ° Образующийся продукт экстрагируют трихлорметано:1 дважды по 10 мл.

Экстракты объединяют в мерной колбе емкостью 25 мл и доводят трихлорметаном до метки. Оптическую плотность 45 окрашенных растворов измеряют на фотоэлектроколориметре КФК-2 при длине волны 400 нм (светофильтр Р 3) в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм.

Раствором для сравнения служит экстракт, полученный в контрольном опыте.

По результатам измерений строят калибровочный график. Светопоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Вера в интер55 вале концентраций 2,5-20, 0 мкг/мл.

Методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение калибровочного графика, которое в данном случае имеет

36

6 вид D = 0,01873 С + 0,09732, где D— оптическая плотность, С вЂ” концентрация анализируемого вещества в фотометрируемом растворе, мкг/мл.

Методика количественного определения.

Около 0,025 г (точная навеска) динатриевой соли 6-(с †карбоксифенилацетамидо)-пениниллановой кислоты растворяют в этаноле в мерно". колбе емкостью 50 мл 0,5 мл полученного раствора внося: в выпарительную чашку. Этанол испаряют и дальнейшие операции осуществляют по схеме, описанной для построения калиб» ровочного графика. Определение количественного содержания динатриевой соли 6-(g,-êàðáoêñèôåíèëàöåòàìèäî)-пенициллановой кислоты проводят по уравнению калибровочного графика и пересчитывают на навеску. Результаты определения и метрологические характеристики представлены в табл.2.

Предлагаемый способ по сравнению с известным повышает селективность определения. В отличие от известного он позволяет анализировать 6 †(феноксиацетамидо)-пенициллановую кислоту и динатриевую соль 6-(c . †êàðáoêñèôåнилацетамидо)-пенициллановой кислоты в присутствии бензола, алкилбензолов, галогенбензолов, производных бензойной кислоты, не содержащих нитрогрупп рибофлавина. Определению не мешает ряд веществ, содержащих в своей структуре одну или несколько нитрогрупп (D-(- -трео-1-п-нитрофенил-2-"дихлорацетиляминопропандиол-1,3; 2,4-динитрохлорбензол; 3,5 †динитро-6-хлорбензойная кислота), а также различные неорганические соединения, обладающие собственной окраской.

Предлагаемый способ в 1,5-2 раза сокращает время проведения анализа и повышает точность определения (относительная ошибка уменьшается с 4 до 1,86Х), Сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов представлена в табл.3.

Формула изобретения

Способ определения 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(k-карбокснфенилацетамидо) -пенициллановой кислоты

1617336,шения точности, селективности определения и сокращения времени осуществления способа, в качестве цвето5 реагента используют раствор 2 3 5Ф У

-трифенилтетразолия, обработку цветореагентом ведут при рН 9, перед фотометрированием окрашенный продукт экстрагируют трихлорметаном. путем обработки анализируемой пробы раствором нитрата калия в концентр рованной серной кислоте, разбавл ния реакционной смеси водой, обраб тки цветореагентом в щелочной сред с последующим фотометрированием п лученного раствора, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повыt

1О

Т аблица 1

Результаты количественного определения б-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты

Найдено

Метрологические характеристики

Взято, г

r Х

98,06

100,29

97,45

101,49

101,57

98, 72

Таблица 2

Результаты количественного определения динатриевой соли 6-(A-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты

Найдено

Взято, г

Метрологические характеристики г (100,00

97,64

101,56

99,84

101,01

101, 18

0 05040

0,04855

0 05050

0,04880

0,05030

0,05070

0,02545

0,02470

0,02585

0,02175

О, 02480

0,02410

0,04942

0,04869

О, 04921

О, 04953

О, 05109

0 05005

0,02545

О, 02412

0,02625

0,02171

О 02505

0,02438

X = 99,60

G =, 1,77

Gy = 0,72

1,85

А = 1,86

= 99,6011,86

Х= 100 21

С = 1,43 (j<= 0,58

09Г 1,50 Е = 100,21+1,48

161 7336

Таблица 3

Сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов

Ср ав нив аемые пар аме тры

Известный способ

Предлагаемый способ

Способ не позволяет

Селек тив ность

Продолжительность одного определения

Относительная ошибка (ха-. рактеристика точности), Х

15-18 мин

30-35 мин

- 4

+1,85

Составитель С.Хованская

Техред H.дидыкКорректор С.Черни

Редактор А. Огар

Заказ 4115 Тираж 510 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðoä, ул. Гагарина, 101

Способ позволяет селективно определять 6-(Аеноксиацетамидо)-пенициллановую кислоту и динатриевую соль 6-(с(-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты в присутствии бензола, алкилбензолов, галогенбензолов, производных бензойной кислоты, не содержащих нитрогрупп, рибофлавина, Определению не мешает ряд нитросоединений: D-(-)-трео-1-п-нитрофенил-2-дихлорацетиламинопропандиол-1,3; 2,4-динитрохлорбензол; 3,5-динитро-6-хлорбензойная кислота, а также различные неорганические вещества, обладающие собственной окраской селективно определять

6- (феноксиацетамидо)—

-пенициллановую кислоту и динатриевую соль 6-(pL-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты в присутствии бензола, алкилбензолов, галогенбензолов, некоторых производных бензойной кислоты, не содержащих нитрогрупп, рибофлавина. Определению мешает ряд нитросоединений: D-(-)-трео-1-и-нитрофенил-2-дихлорацетиламинопропандиол-1,3; 2,4-динитрохлорбензол; 3,5-динитро-6-хлорбензойная кислота, а также различные неорганические вещества, обладающие собственной окраской