Среда для поддержания жизнеспособности эмбрионов крупного рогатого скота

 

Изобретение относится к питательным средам для биологических объектов и может быть применено в сельском хозяйстве, животноводстве, эмбриологии, медицине. Целью изобретения является повышение стабильности и экономичности среды, а также повышение выхода развившихся эмбрионов. Среда изготовлена на основе фосфатно-солевого буфера с добавлением в качестве единственного энергетического субстрата α-кетоглютаровой кислоты (α-КГ) при следующем соотношении ингредиентов, мас.%: хлористый натрий 80,34-81,73

хлористый калий 2,00-2,06

фосфат калия однозамещенный 2,00 - 2,06

фосфат натрия двузамещенный 13,73 - 13,90

хлористый магний 0,36 - 0,42

хлористый кальций 0,46 - 0,99

α-КГ 0,015 - 0,22

тридистиллят остальное. PH среды 7,3 - 7,4

осмотическое давление 280-290 мосм/кг.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК щ)5 С 12 И 5/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPblTHRM

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4495763/31 — 3 (22) 15.07.88 (46) 15.12.90. Him . Р 46 (71) !!ГУ им. М.В.Ломоносова (72) Е.В.Трошко, В.A,Ãîëè÷åíêoB и В.A.Àðòþøêîâà (53) 578 ° 085.23 (088 ° 8) (56) Ham R.G. An improved nutrient

solution for diploid chinese hamster

and humen Cell lines. — Fxper, Cell.

Рез., 1963, 29, !". 3, 5 15-526.

Трошко Е.В., Гумина И.П., Андреева Л.Г.Способ изготовления питательнои среды для вымывания и культивирования эмбрионов млекопитающих.

Сельскохозяйственная биология, 1985, Р 8, 110-115. (54) СРЕДА ДЛЯ ПОДПЕРЖАНИЛ 1 ИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЭИБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО

СКОТА (57) Изобретение относится к питаИзобретение относится к питательным средам для биологических объектов и может быть применено в сельском хозяйстве, животноводстве, эмбриологии, медицине.

Целью изобретения является повышение стабильности и экономичности среды. для этого используют новую среду фосфатно-солевую с L-кетоглюторатом (ФС-КГ) . Среда, содержит вес.7..

Хлористьп! натрий 80,32 — 81,73

Хлористый калий 2,00 — 2,06

„, 80„„1613488 A 1

2 тельным средам для биологических объектов и может быть применено в сельском хозяйстве, животноводстве, эмбриологии, медицине. Целью изобретения является повышение стабильности и экономичности среды, а также повышение выхода развившихся эмбрионов. Среда изготовлена на основе фосфатно-соленого буфера с добавлением в качестве единственного энергетического субстрата L-кетоглютаровой кис— лоты (L КГ) при следующем соотноше-. нии ингредиентов, мас.7.: хлористый натрий 80,34-81, 73; хлористый калий

2, 00 — 2, 06; фосфат калия однозамещенный ?, 00 — 2, 06; фосфат натрия двузамещенный 13,73 — 13,90; хлористый магний 0,36 — 0,42; хлористый кальций 0,46 — 0,99; L-КГ 0,015

0,22; тридистиллят остальное, рН среды 7,3 — 7,4; осмотическое давление 280 — 290 мосм/кг.

Однозамещенный фосфат калия 2,00 — 2,0б

31вузамещенный фосфат натрия 13,73 — 13 90 ллористьп магний О, 36 — 0,4 2

Хлористый кальций 0,46 — 0,99

L-КГ (Е-кетоглюторат) 0,015 — О, 22

Тридистиллят Остальное рН среды 7,3-7,4, осмотическое давление 280-290 мосм/кг. Среда более стабильна ° Из таблицы видно, что в течение 2 лет среда не теряет своих первоначальных свойств (выход жизнеспособных эмбрионов) .

1613488

Время сохранности среды в растворе, мес

Ср еда

1 — 5 6 7 — 11 12 24

Прототип ФССД

Предлагаемая среда ФС-КГ

Ср еда

Прототип ФССД

53-55

Пр едла;.аемая ср еда ФС-КГ

82-84

2,00

13, 00

0,32

0,42

0,01

13, 90

0,42

Процент развития эмбрионов от морулы да бластоцисты в предлагаемой среде значительно выше, чем в прототипе:

Количество эмбрионов белых беспородных мышей, развившихся с морулы до бластоцисты,7.

Пример 1. Эембрионы крупного рогатого скота (KPC) вымывают у донора на стадии морулы раствором ср еды с оста ва, вес . Е:

Хлористый натрий 80,34

Хл ар и с т ый кали и 2,00

Одвэзамещенный фосфат калия

Двузамещенный фосАат натрия 13, 73

Хлористый магний 0,36 .лористьп кальций 0,46

L -КГ 0,015

Затем эмбрионы инкубируют в той же среде в течение 2-4 ч. Часть вымытых эмбрионов микроскопируют и регистрируют отсутствие морфологических изменений, после чего полноценные эмбрионы трансплантируют самке-реципиенту (корове) . Выход развившихся эмбрионов 827..

Пример 2. Эмбрионы KPC вымывают у донора на стадии морулы растворам предлагаемой среды состава, вес.И:

Хлористый натрий 81,73

Хларистый калий 2,06

Однозамещенный фосфат калия 2,06

Двузамещенный фосфат натрия

Хлористый магний

Хлористый кальций 0,99

L-КГ 0,022

Дальнейшие операции проводят согласно примеру 1, регистрируют отсутствие морфологических изменений и трансплантируют эмбрионы самкам-реципиентам (коровам) . Выход развившихся эмбрионов 847..

Пример 3. Эмбрионы КРС вымывают у донора на стадии морулы ра25 cTBQPQM сР еды cocTB BB Bec . Ж:

Хл ористый натрий 79, 00

Хлористый калий 2, 12

Одно замещенный фос— фат калия 2, 12

Двузамещенный фосфат натрия 14,46

Хлористый магний 0,48

Хлористьп кальпий 1,44

L-КГ 0,29

Затем эмбрионы инкубируют в той

35 же среде в течение 2-4 ч. Часть вымытых эмбрионов ми крас копируют, регистрируют морфологические нарушения в эмбрионах, поэтому их трансплан40 тацию реципиенту не проводят.

Пример 4. Эмбрионы КРС вымывают у донора на стадии морулы раствором среды состава, вес.%:

Хлористый натрий 82,35

Хлористый калий 1,93

Однозамещенный фосфат калия 1,93

Двузамещенный фосфат натрия

Хлористый магний

Хлористый кальций

L-КГ

Дальнейшие операции проводят согласно примеру 3, регистрируют морфологические нарушения в эмбрионах, поэтому их трансплантацию реципиенту не проводят соотношении ин80,32 — 81, 73

2,00 — 2,06

2,00 — 2,06

13,73 — 13,90 . О, 36 — 0,42

0,46 — 0,99

0,015 — О, 22

Остальное

Корр е кт ор И . Эрд ейи

Зака з 386 7 Тираж 485 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

5 1613488

Формула и з обр ет ения Среда для поддержания жизнеспособности эмбрионов крупного рогатого

1 скота, содержащая хлористый натрий, хлористый калий, однозамещенный фосфат калия, двузамещенный фосфат натрия, хлористый магний, хлористый кальций, отличающаяся тем, что, с целью повышения стабильности и экономичности, среда дополнительно содержит L-кетоглюторат

Составитель И.Тареева

Редактор О.Спесивых Техред М.Дидык (L-КГ) при следующем гредиентов, мас.Е:

Хлористый натрий

Хлористый калий

Одно замещенный фосфат калия

Двузамещенный фосфат натрия

Хпористый магний

Хлористый кальций

L-кетоглюторат

Тридистиллят