Способ определения устойчивости кукурузы к вредителям

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения - повышение производительности труда и снижение трудоемкости. Для определения устойчивости кукурузы к вредителям используют гомогенат гусениц вредителей данной культуры. Навеску в 100-200 мг растирают в ступке с кварцевым песком с 5 мл фосфатного буфера и разбавляют буфером из расчета 20 мг в 1 мл. Полученную вытяжку настаивают при 4°С, центрифугируют 10 мин при 6000 об/мин. Смесь из 2 мл центрифугата, 2 мл фосфатного буфера, 2 мл парафенилендиамина вносят в кюветы спектрофотометра, используя в качестве субстрата пирокатехин. Расчет ведут по времени, за которое раствор достигает заданной оптической плотности по формуле А=D<SP POS="POST">.</SP>Α<SP POS="POST">.</SP>4/T, где D - заданная оптическая плотность

α - отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки в мл к весу навески в г

4 - степень постоянного разведения в реактивной смеси

T - время, с.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

\ (5!)5 А 01 Н 1/04 6

,, ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

D ХаХ4 (21) 4640040/30-13 (22) 19.01,89 (46) 07.12.90, Бюл. ¹ 45 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений (72) H.À.Âèëêîâà и Л.С.Иващенко (53) 631.52(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

¹ 405500, кл, А 01 G 7/00, 1974. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ КУКУРУЗЫ К ВРЕДИТЕЛЯМ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения . повышение производительности труда и снижение трудоемкости. Для определения устойчивости кукурузы к вредителям используют гомогенат гусениц вредителей

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений.

Цель изобретения — повышение производительности труда и снижение трудоемкости.

Способ осуществляют следующим образом.

Для оценки образцов кукурузы используют гомогенат гусениц стеблевого мотылька, хлопковой совки и других вредителей (предварительное замораживание исключается). Навеску в 100-200 мг растирают в, ступке с кварцевым песком с 5 мл фосфатного буфера и разбавляют буфером из расчета 20 мг в 1 мл. Полученную вытяжку,, 0„„1611280 А1 данной культуры. Навеску в 100 — 200 мг растирают в ступке с кварцевым песком с 5 мл фосфатного буфера и разбавляют буфером из расчета 20 мг в 1 мл. Полученную вытяжку .настаивают при 4 С, центрифугируют

10 мин при 6000 об/мин, Смесь из 2 мл центрифугата, 2 мл фосфатного буфера, 2 мл парафенилендиамина вносят в кюветы спектрофотометра, используя в качестве субстрата пирокатехин. Расчет ведут по времени, за которое раствор достигает заданной оптической плотности по.

D ХаХ4 формуле А—

t, где D — заданная оптическая плотность; а — отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки, в мл к весу навески в г; 4-степень постоянного разведения в реактивной смеси; t — время, с. настаивают при 4 С, центрифугируют 10 мин при 6000 об/мин, Смесь из 2 мл центрифугата, 2 мл фосфатного буфера, 2 мл парафенилендиамина вносят в кюветы спектрофотометра или ФЭК, используя в качестве субстрата пирокатехин. Расчет ведут по времени, за которое раствор достигает заданной оптической плотности по формуле где D — заданная оптическая плотность, равная в данном случае 0,15;

Q — отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки, в миллилитрах к весу навески в граммах;

1611280

4 — степень постоянного разведения в реакционной смеси;

t — время, с.

Проведение анализа возможно в течение всего года с использованием полевого и лабораторного материалов, 20

Составитель Л.Марченкова

Техред.М. Моргентал Корректор Л.Пилипенко

Редактор Н,Тупица

Заказ 3780 Тираж 437 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Пример 1. Для анализа используют гусеницы вредителя старших возрастов, питающиеся на устойчивых образцах кукурузы. Навеску взвешивают и растирают в ступке с кварцевым песком в фосфатном буфере рН,7,4 1/15 M из расчета 20 мг ткани в 1 мл буфера, Раствор настаивают 20 мин при 4 С, затем фильтруют или центрифугируют 10 мин при бООО об/мин, К 2 мл полученного фильтрата (центрифугата) прибавляют 2 мл фосфатного буфера рН 7,4 1/15 M и 2 мл

0,02%-ного раствора парафенилендиамина, 2ту смесь вносят в опытную кювету прибора (ФЭК или спектрофотометр); в контрольную кювету добавляют к этой смеси 2 мл воды, а в опытную 2 мл 1%-ного раствора пирокате-. хина, Заданная оптическая плотность 0,15, По секундомеру отмечают время, за которое опытный раствор достигает этой плотности, далее расчет ведут по формуле. Критерием устойчивости служит активность полифенолоксидазы, выраженная в усл, ед./с/ги имеющая пределы 1,4-2,0.

Пример 2. Для анализа используют гусеницы вредителя старших возрастов, питающиеся на неустойчивых к вредителю образцах кукурузы, и осуществлют операции по примеру 1, Критерием неустойчивости служит активность фермента, выраженная в усл, ед./с/г и имеющая пределы 0,4 — 0.7.

5 Анализ показал, что исследуемые образцы характеризуются различным антибиотическим воздействием (физиологический барьер) на гусениц вредителя.

Предлагаемый способ по сравнению с

10 известным менее трудоемкий, обеспечивает более экономичное и быстрое определение устойчивости, так как исключает дополнительную обработку биологического материала, Анализ устойчивости образцов

15 можно проводить круглогодично, используя полевой и лабораторный материалы, Производительность труда возрастает при этом в

2 раза.

Формула изобретения

Способ определения устойчивости куку-, рузы к вредителям, включающий измерения биохимического показателя, по которому судят об устойчивости, отличающийся

25-тем, что, с целью повышения производительности труда и снижения трудоемкости, в качестве биологического показателя измеряют активность фермента полифенолоксидазы насекомых-вредител ей, п ита ющихся

30 на изучаемых сортообразцах, при этом к устойчивым относят те образцы, у которых показатель активности фермента

1,4-2,0 усл.ед./с/г,