Способ выявления серотонина на гистологическом препарате

 

Изобретение относится к медицине, а именно нейрогистологии. Целью изобретения является повышение точности способа за счет более полного выявления прототипа. Цель достигается тем, что препараты нервных узлов предварительно обрабатывают в 0,1-0,25 % растворе резерпина в течение 15-30 мин, далее инкубируют в 2% растворе глиоксиловой кислоты на фосфатном буфере с PH 3,0-5,5. Содержание серотонина определяют при люминисцентной фотометрии с использованием длины волны 532±12 нм.

СОЮЗ СОНЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСагЬЛИК (19) (II) 4 70 Al

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ь Ф 1.э.l! iu Е.,"-;, 1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4335618/28-14 (22) 30. 11 .87 (46) 23. 09. 90. Бюл. 1(35 (71) Ленинградский государственный педагогический институт им. А.И. Герцена (172) А.П. Пуговкин, В.А. Даринский и А.Б. Казарин (53) 616-0.89.9 (088.8) (56) Швалев В.Н., Жучкова Н.И. Архив анатомии гистологии и эмбриологии, 1979, 76,6, 114-116. (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ СЕРОТОНИНА НА

ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ

Изобретение относится к области м едицины.

Целью изобретения является повышение точности способа эа счет более полного выявления серотонина по мес- ту тканевой локализации.

Способ осуществляют следующим образом.

Биологическую ткань (нервные узлы) монтируют на предметные стекла. Далее их обрабатывают 0,1%-0,25%-ным раствором резерпина в течение 15—

30 мин. Затем образцы промывают в физиологическом растворе и помещают на

20 минут в 2%-ный раствор глиоксиловой кислоты на фосфатном буфере с рН 3,0 — 5,5. Образцы подсушивают под струей воздуха, а затем переносят в о термостат с температурой 90-100 С на

5 мин. После прогревания в термостате пробы заключают в вазелиновое масло или полистирол и изучают под люминесцентным микроскопом в падающем (Д1)5 G 01 N 1/28, А 61 В 10/00

2 (57) Изобретение относится к медицине, а именно нейрогистологии. Целью является повышение точности способа за счет более полного выявления серотонина в клетках и ткани. Цель достигается тем, что препараты нервных ysлов предварительно обрабатывают в

0,1-0,25%-ном растворе резерпина в течение 15-30 мин, далее инкубируют в 2% — ном растворе глиоксиловой кислоты на фосфатном буфере с рН 3,5-5,5.

Содержание серотонина определяют при люминеспентной фотометрии с использованием длины волны 532 + 12 нм. свете со светофильтрами ФС-1-4 и

БС 8-2 с диапазоном источника света в пределах 380-540 нм и с запирающими светофильтром ЖЗС-19 или ЖС 18-2 с длиной волны не менее 470 нм).

По интенсивности свечения клеток определяют содержание серотонина.

Пример 1. Исследованы нейроHbl дорэальных ядер шва. Готовили криостатные срезы. Далее их помещали в 0,1%-ный раствор резерпина на 15 мин, затем помещали в 2%-ный раствор

/ глиоксиловой кислоты

При люмчнесцентно-микроскопическом исследовании (максимум свечения при длине волны 532 T- 12 нм) промерялось не менее 20 клеток. Содержание серотонина в них равно 16,9*0,61 ус.ед.

Пример 2. Исследованы нейроны Ретциуса. Образцы ткани монтировали на стекло. Далее обрабатывали в

0,25%-ном растворе резерпина и 2%-ном

1594370

Составитель Л. Стебаева

Редактор К. Бобкова Техред Я.яндык Корректор И. Кучерявая

Заказ 2822 Тйраж 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,103 растворе глиоксиловой кислоты. При люминесцентной микроскопии клетки Ретциуса ярко Флуоресцируют. Фотометрический просчет позволил выявить в них содержание серотонина в пределах

21,5+0,54 усл.ед.

Способ позволяет более полно выявить серотонии в клетках и ткани организма, что повышает точность его определения до 90-100Х по сравнению со способами, основанными на биохимическом определении..

При предлагаемом способе фпуорес15 ценция серотонина более четкая на нефлуоресцирующем Лоне. формула изобретения

Способ выявления серотонина на гистологическом препарате путем инкубации в среде, содержащей раствор глиоксиловой кислоты, термостатирования препаратов при 90-100 С с послеР дующим фотометрическим определением серотонина по люминесцентному свече нию, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет более полного выявления серотонина s клетках и ткани, препараты перед инкубацией обрабатывают

0,1-0,257-ным раствором резерпина в течение 15-30 мин, а раствор глиоксиловой кислоты используют с рН 3,0-5,5.