Способ получения личинок ii возраста нyроdеrма воvis de geer

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к ветеринарной паразитологии. Целью изобретения является повышение выхода личинок (Л). При культивировании Л им создают условия, приближенные к организму крупного рогатого скота. Л помещают в трехслойную плотную питательную среду и содержат в термостате при 37,5-39,5°С. Это позволяет увеличить выплод личинок до 70-90%.

СОКИ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (1% (И) 10 А1 (5g)$ А 01 К 67/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4374358/30-13 (22) 29. 12. 87 (46) 15.04.90 Бюл. 3".- 14 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной .энтомологии и арахнологии (72) В.З.Ямов, 11.Н.Евстафьев и Г,И.Метелица (53) 616, 995. 7 (088. 8) (56) Веез1у W.N. Some recent wore

on the biolopi of the ox warble Hypoderma - .Parasitol, 1962, 52 (Suplemene) 13.

Bees ly M.>. Observations on the development of. Hypoderma bovis de Geer (Diptera Oestridae in the bovine

host — Research in Veter Sci., 1962,3, 203-208.

Изобретение относится к ветеринарной паразитологии и может быть использовано для направленного отбора биологических и химических ларвицидов, получения личинок II возраста подкожного овода, изучения биологии и физиологии этих насекомых.

Цель изобретения — повьппение выхода личинок.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Личинок собирают в .январе в спинно-мозговых каналах после убоя животных. Отбирают только зре.лых, т.е. личинок, содержащих в пищеварительном тракте протеолитический фермент, который легко просматривается с наружной стороны личинки в виде продолговатого темно-зеленого пред2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИЧИНОК II ВОЗРАСТА HYPODERMA BOVIS DE GEER (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к ветеринарной паразитологии. Целью изобретения является повышение выхода личинок (Л).

При культивировании Л. им создают условия, приближенные к организму крупного рогатого скота. Л. помещают в трехслойную плотную питательную среду и содержат в термостате при 37, 5- о 1

39,5 С. Это позволяет увеличить выплод личинок до 70-907. мета, напоминающего форму личинки, только в 3-4 раза меньше ее.

CA

При культивировании личинкам созда- ф ют условия, приближенные к организму крупного рогатого скота, для чего их помещают в плотную многослойную пита-, d тельную среду каждый слой которой отУ личается от предыдущего не только количественным составом, но и плотностью. 5то позволяет личинкам испольэовать свои биологические свойства и не только самостоятельно передвигаться к поверхности культуры,но и уходить из й. того места, где накопилось много метаболитов,потому что повьппенная концентрация метаболитов отрицательно влия ет на жизнедеятельность личинок.Температура в термостате должна быть

1556610

37,5-39,5 С, т.е. нормальная температура тела крупного рогатого скота.

10 зрелых личинок I возраста извлекают из спинно-мозговых каналов у крупного рогатого скота после убоя.

Обмывают раствором стрептомицина с температурой 30 С и рН 7,2 и помещают на дно цилиндра, высота которого

24 см, а диаметр 25 мм. Затем налива- 10 ют 20 мл (примерный объем занимаемый 10 личинками в эпидуральном жире) питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2 — первый слой, состоящий из следующих компонентов, мас.%: агар

0,65, среда 199-85,85; инактивированиая сыворотка крови крупного рогатого скота 13,5.

Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной темпе- 2< ратуре на 2 ч. После того, как питательная среда затвердеет, осторожно ! .наслаивают на ее первый слой, наливая .по стенке цилиндра, второй слой 10 мл .16,5 см или примерная длина пути личинки из спинно-мозгового канала pv мышц, питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2, состоящий из следующих компонентов, мас.%: агар 1,05, среда 199-85,45; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого ско та 13,5, Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч. После того, как питательная среда затвердеет, осторожно наслаивают на второй-слой, наливая по стенке цилиндра третий слой 10 мл или 1,2 см примерная длина пути личинки от мышц до поверхности

1 кожи, питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2, состоящей из о 40 следующих компонентов, мас.%: агар

1,65; среда 199-81,85 инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 16,5. Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч. После эатвердеваиия питательцой среды на третий слой наслаивают 2 мл вазелинового масла для предупреждения проникновения микрофлоры и высыхания

50 среды и помещают в термостат при

38,5 С. Ежедневно визуально просматривают личинок, находящихся в цилиндре, и на 38 день обнаруживают, что часть личинок почти подошли к поверх- 55 ности питательной среды. Вазелиновое масло осторожно отсасывают пипеткой, поверхность питательной среды высушивают фильтровальной бумагой и увлажняют раствором стрептомицина. Еще через два дня на поверхности питательной среды выходят 5 личинок, спустя

10 дней — еще 4 личинки. Еще через

10 дней вышедшие 9 личинок переходят во II возраст. Выплод их составляет

90%.

Пример 2. 10 зрелых личинок

I возраста Н.bovis извлекают из спинно мозговых каналов у крупного рогатого скота после убоя, обмывают раствором стрептомицина с температу" о рой 30 С и рН 7,2 и помещают на дно цилиндра, высота которого 24 см, диаметр. 25 мм. Затем наливают 20 мл питательной среды (первый слой) с температурой 30 С и рН 7,2, состоящий из следуюцих компонентов, мас.%: агар 0,5; среда 199-87,5; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 12. Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч.После того, как питательная среда затвердеет, осторожно наслаивают на ее первый слой, наливая по стенке цилиндра второй слой (100 мл) питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2, состоящий из следующих компонентов мас.%: агар 0,9; среда 199-87,1; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 12. Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч.

После того, как питательная среда затвердеет, осторожно наслаивают на второй слой, наливая по стенке цилиндра третий слой (10 мл) питательО ной среды с температурой 30 С и рН

1 !

7,2, состояций из следуюцих компонентов, мас.% . агар — 1,5; среда 19983,5; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 15 ° Ци- . линдр с личинками и питательной средой оставляют при комнтаной температуре на 2 ч. После затвердевания питательной среды на третий слой наливают 2 мл вазелинового масла и помещают в термостат при 37,5 С. Ежедневно визуально просматривают личинок, находящихся в центре, и на 38-й день обнаруживают, что часть личинок почти подошли к поверхности питательной среды. Вазелиновое масло осторожно отсасывают пипеткой, поверхность питательной среды высушивают фильтроt вальной бумагой н увлажняют раство15-18

Составитель В.Романова

Техред, М.Дидык Корректор В.Гирняк

Редактор М.Недолуженко

Заказ 671 Тираж 447 Подписное

ВНИИПИ Государственного комнтета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

5- 15566 ром стрептомицина. Еще через два дня на поверхность питательной среды выходит 3 личинки, спустя 10 дней— еще 6 личинок. Еще через 1О дней из вышедших 9 личинок 7 переходят во

II возраст. Выплод их составляет 70Х.

Применение предлагаемого метода позволяет выращивать личинок в условиях, приближенных к организму животного, в плотной, питательной среде, увеличить выплод личинок EI возраста с единичных до 907.

Формула изобретения

Способ получения личинок II возраста Hypoderma bovis de Свет, включающий приготовление жидкой питательной среды, внесение ее в сосуд для культивирования с последующим помещением 20 в него личинок I возраста и инкубированием в термостате, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью увеличе10 6 ния выхода личинок, гомешают на дно сосуда, последовательно вносят и выдерживают до затвердения питательные среды следующего состава, мас,Ж:

Агар 0,5-0,8

Среда 199 84,2-87,5

Инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 12-15

Агар 0,9-1,2

Среда 199 83,8-87,1 Инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 12-15

Агар 1,5-1,8

Среда 199 80,2-83,5

Инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота