Способ определения скороспелости хлопчатника
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции хлопчатника на скороспелость. Цель - повышение эффективности селекции за счет сохранения и последующего выращивания ценных генотипов. Отбор скороспелого селекционного материала проводят по показателям фотохимической активности хлоропластов из листьев недельных проростков, при этом скороспелость тем больше, чем выше фотохимическая активность хлоропластов. 2 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН (51) 5 А 01 Н 1/04
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4353429/31-13 (гг) 04 01 88 (46) 07.04.90. Бюл. 13 (71) Институт экспериментальной биологии растений АН УЗССР (72) С,M. Газиянц и О.Ж. Жалилов (53) 631 ° 521(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
М 904580, кл. А 01 С 7/00, 1980. (54) СПОСОВ ОПРКДЕЛЕНИЯ СКОРОСПЕЛОСТИ ХЛОПЧАТНИКА (57) Изобретение относится .к сельскоИзобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции хлопчатника на скороспелость.
Цель изобретения — повышение эффективности селекции за счет сохранения и последующего выращивания данных генотипов.
Способ осуществляют следующим образом.
Выращивают хлопчатник до фазы семядольных листьев (или до фазы 4-5 настоящих листьев) в условиях теплицы или лабораторной комнаты в тарных ящиках с почвой.
Выделяют нативные хлоропласты и определяют реакцию Хилла, скорость которой определяет фотохимическую активность хлоропластов.
Выделяют нативные хлоропласты. Листья или высечки листьев, взятые сверлом (2 г), промывают дистиллированной водой, выдерживают 15 мин при температуре тающего льда, растирают в ступке, залив 10 мл среды выделения. Состав среды: 0,3 M NaC1; 0,5 М
2 му хозяйству, в частности к селекции хлопчатника на скороспелость. Цель повышение эффективности селекции за счет сохранения и последующего выращивания ценных генотипов. Отбор скороспелого селекционного материала проводят по показателям фотохимической активности хлоропластов из листьев недельных проростков, при этом скороспелость тем больше, чем выше фотохимическая активность хлоропластов.
2 табл. сахароза; 0,05 М трис-НС1 - буфер (рН 7,81; 1 ;-ный поливинил пирролидин; 3 ь-ный бычий сывороточный альбумин. Гомогенат продавливают через два слоя плотного капрона, центрифугируют 3 мин при 3,5 тыс.g. Осадок, представляющий собой фракцию нативных хлоропластов, ресуспендируют в среде выделения. Суспензию хлоропластов немедленно используют для анализа. Процедуры по выделению хлоропластов проводят по холоду и занимают 10-12 мин °
Проведение реакции Хилла. Хлоропласты инкубируют на свету в среде следующего состава: 520 м M NaC1;
225 мМ трис-НС1-буфер (рН 7,8), 6 мМ феррицианид калия, хлорофилл по 70100 мкг в пробу. Объем реакционной смеси 3 мл.
Колбы с реакционной смесью термостатируют при 30 С в стеклянной ванне и освещаются снизу зеркальной лампой накаливания мощностью 500 Вт, дающей интенсивность освещения 50 тыс. лк.
1554836
Таблица!
Фотохимическая активСорт
Скороспелость, дн ность
4-5 настоящие листья семядол ь ные листья
118,4
156,0
128,3
129 0
122,4
112,6
120,3
101,7
107,2
Ташкент-6
Чимбай-3010
Экспресс-1
КК-2056
С-4727
Ташкент-1
108-ф
133
С-460
169,7
153,7
158,2
161,0
147,6
143,2
142,6
130,4
123,3
121
123
126
126
127
134
138
141
НСР, = 3,6
5,1
Реакция начинается добавлением
s колбы по 0,5 мл суспензии хлоропластов ° Хлоропласты инкубируют в течение 6 мин при перемешивании. Затем реакцию останавливают добавлением в каждую колбу 1 мл 0,103-ной трихлоруксусной кислоты и выключением света. Кислотный экстракт переливают в центрифужные пробирки и центрифугируют 5 мин при 5-6 тыс. об./мин для осаждения белков. Прозрачный раствор спектрофотометрируют при длине волны 420 нм против контроля. Контрольные пробы ставят аналогично опытным, но инкубируют в полной темноте.
Из суспензии хлоропластов берут
nb 0,5 мл для определения содержания хлорофилла в 801-ном ацетоне. Cðåäняя продолжительность опыта 1 ч. В опыте используют 2-3 варианта при трехкратном повторении.
Нами были проведены определения реакции Хилла у контрастных по скороспелости образцов вида G hirsutumL25 (девять сортов) .и у вида С. barbaden
se (восемь сортов). Исследования проводили на семядольных и на 4-5 настоящих листьях.
В табл, 1 показана Фотохимическая активность хлоропластов (мкМ К,Ге(СИ),/
/мг хлорофилла в 1 r) у различных по скороспелости сортов вида G. hirsutum, а в табл. 2 - сортов вида G. barbadense.
Из табл. 1 и 2 следует, что самые высокие значения ФХА у скороспелых форм, а у сортов с более поздним созреванием уровень ФХА заметно ниже, что характерно для обоих изученных видов.
Проростки, выращенные в бумажных стаканчиках с почвой или в ящиках с почвой, после использования одного листа для анализа были высажены в поле и из них получили хорошо развитые растения.
Метод определения ФХА листьев несложен в проведении. Продолжительность опыта 1 ч ° В каждом опыте можно проанализировать три образца. В день один лаборант может провести
4-5 опытов, т,е. проанализировать
12-15 образцов. Метод может быть использован в любом селекционном учреждении, имеющем биохимическую лабораторию.
Формула изобретения
Способ определения скороспелости хлопчатника, включающий измерение биологических показателей растений, по значению которых судят о скороспелости, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности селекции за счет сохранения и последующего выращивания ценных генотипов, в качестве биологического показателя измеряют фотохимическую активность хлоропластов из листьев недельных проростков, при этом скороспелость тем больше, чем выше фотохимическая активность.
1554836
Таблица 2
Скороспелость, дн фотохимическая активность
Сорт свмядоль- 4-5 настояные щие листья листья
НСР> = 4,2
Составитель А. Сизов
Редактор А, Козориз Техред М.Ходанич Корректор Н.Ревская
Заказ 512 Тираж 434 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035., Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина,101
Карши-2
С-6030
С-6040
С-6037
Ашхабад-25
5904-И
2 и 3
Гиэа-47
89,3
94,2
84,3
83,1
64,4
77,7
67,9
65,0
117,4
113,0
109 3
114,0
107 3
102,5
96,4
90,5
133
139
148
156
159


