Смесь для анализа оптических свойств митохондрий

 

Изобретение относится к физиологии, биотехнологии и может быть использовано в селекции и растениеводстве для исследования характеристик клеточных органоидов. Цель - повышение разрешающей способности смеси. Поставленная цель достигается тем, что смесь для анализа оптических свойств митохондрий, содержащая солянокислый трис, хлорид калия, сукцинат натрия, дополнительно содержит лектин при следующем соотношении компонентов в пересчете на сухое вещество, мас.%: солянокислый трис 25,672 - 26,185, хлорид калия 60,717 - 61,929, сукцинат натрия 11,573 - 11,803, лектин 0,083 - 2,038, при этом все сухое вещество в растворе составляет 1,203 - 1,227 мас.%, остальное вода. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„,1540

Ai (51) 5 А 01 G 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4402358/30-13 (22) 04 . 04 . 88 (46) О? .02,90. Бюл. ¹ 5 (71) Всесоюзный научно-исследователь-. ский институт риса (72) Э. Г. Лвакян, Н. Г. -Туманьян, Н, Е. Алешин, Е. М. Сорочинская и Е, П. Ллешин (53) 531 . 3 (088.8) (56) Plant Physiol, 1968, v, 43, N 1, р .. l 21-1 24, (54) СМЕСЬ ДЛЯ АНАЛИЗА ОПТИЧЕСКИХ

СВОЙСТВ МИТОХОНДРИЙ (57) Изобретение относится к физиологии, биотехнологии и может быть использовано в селекции и растениеводИзобретение относится к физиологии, биотехнологии и может быть использоняно н селекции и растениеводстве для исследования физико-химических, биофиэических и других параметров клеточных органоидов..

Иелью изобретения является повьш ение разрешающей способности смеси.

Смесь для анализа оптических свойств митохондрий, содержащая солянокислый трис, хлорид калия, сукцинат натрия, дополнительно содержит лектин при следующем соотношении компонентов, 7. от сухого вещества в растворе (табл. 1).

Пример 1. Растения риса сорта Краснодарский 424 выращивают н водной культуре до возраста двух настоящих листьев.

Иэ полученных проростков методом седиментянии выделяют митохондрии. стве для исследования характеристик клеточных органоидов. Цель изобретения — повышение разрешающей способности смеси. Поставленная пель достигяется тем, что смесь для анализа оптических свойств. митохондрий, содер жящая солянокислый трис, хлорцц калия, сукцинат натрия, дополнительно содержит лектин при следующем соотношении компонентов в пересчете на сухое вещество, мас.7: солянокислый трис 25,672-26,185, хлорид калия

60,717-61,929, сукцинат натрия 11,573l!,803; лектин 0,083-2,038, при этом все сухое вещество н растворе состанляет 1,203-1,227 мас.X,oñòàëüíoå вода. 2 табл.

Митохондрии помещают в контрольном варианте в известную инкубационную смесь, содержащую 0,02 М солянокислого триса, 0,1 М хлорида калия и 4

0,012 М сукцинатя натрия, Компоненты СиР распределяются следующим образом, X 4 от сухого вещества. солянокислый Ю трис 20,206, хлорид калия 61,978, Q() сукцинат на грия 11,816, все сухое вещество в растворе 1,202, остальное вода .

В экспериментальном варианте митохондрии помещают в предлагаемую инкубационную смесь, которая содержит нсе ингридиенты смеси и рисовый пектин.

Компоненты распределяются следующим образом,. Х от сухого вещества. солянокислый трис 26,204, хлориц калия 61,975, сукиинат натрия 11,813, ) 540728 лектин О, 008. Сухого вещества в растворе 1 202. Затем измеряют динамику изменения on тиче ской плотно с ти вследствие сжатия.:митохондрий в инкубационной смеси. Измерения проводят на спектрофотометре при длине волны

520 мм в течение ) 0 мин, регистрируя показания каждую минуту. За показатель изменения оптических свойств ми- 10 тохондрий принимают величину„ рассчитываемую по следующей формуле

h X (— — — 1) «)003

Еп

Е о . где ЛЖ вЂ” изменение оптических свойств)5 митохондрий;

Eо — первоначальная onтическая плотность, Е„ - оптическая плотность в каждую последующую минуту (от

1 мин до IO мин) .

Пример 2. Условия проведения эксперимента аналогичны примеру 1, но содержание компонентов в предлагаемой смеси следующее, X от сухого ве- 25 щества. солянокислый трис 26,)85, хлорид калия 61,929, сукцинат натрия

11,803, лектин 0,083, сухого вещества в растворе 1,203, остальное — вода. 30

Пример 3. Условия проведения экспе римен та аналогичны on исанным

1в примере 1 но содержание компонентов в предлагаемой смеси следующее, % от сухого вещества: солянокислый, трис 26,098, хлорид калия 61,723, сукцинат натрия 11,765, лектин 0,4)4, остальное — вода. Сухого вещества в, растворе 1,207, Пример 4. Условия проведения 40 эксперимента аналогичны описанным н примере 1, но содержание компонентов в предлагаемой смеси следующее, X от сухого вещества: солянокислый трис

25,672, хлорид калия 60,717, сукцинат 45 натрия )),573, лектин 2,038, сухого вещества в растворе 1,227, остальное — вода.

Пример 5. Условия проведения эксперимента аналогичны описанным в примере 1, но содержание компонентов в предлагаемой смеси следующее, X от сухого вещества. солянокислый трис

24,)94, хлорид калия 57,220, сукцинат натрия 10,906, лектин 7,680, сухого вещества в растворе 1,302, остальное— вода.

В табл. 2 приведена динамика оптических свойств митохондрии d 7. при использовании инкубационной известной и предлагаемой смесей.

Как следует из представленньм втабл. 2 экспериментальных данных, использование инкубационной смеси статистически достоверно увеличивает размах колебаний динамики изменения оптических свойств митохондрий при сжатии последних.

При этом размах увеличивается в

2-3 раза, т.е. в 2-3 раза повышается разрешающая способность измерения оптических свойств и достоверность этого измерения. Оптимальной концентрацией лектина при этом является

0,4147, концентрация. 0,0087 и 7,68X ° являются зanредельными.

Таким образом, использование предлагаемой инкубационной смеси позволяет получать достоверные оптические характеристики митохондрий, необходимые для оценки исходного материала в селекции, для оценки физиологического состояния организмов в полевых вегетационных и лабораторных условиях.

Компоненты предлагаемой смеси доступны в любой физиолого-биохимической лаборатории, приготовление не требует особьм условий или оборудования.

Ф о р м у л а изобретения

Смесь для анализа оптических свойств митохондрий,. содержащая водный раствор солянокислого триса, хлорида калия и сукцината натрия, о т— л и ч а ю щ а я с я . тем, что, с целью повышения разрешающей способности смеси, она дополнительно содержит лектин при следующем соотношении компонентов, X от сухого вещества в растворе

Солянокислый трис 25,672-26,185

Хлорид калия . 60,717-61,929 . Сукцинат натрия 1) 573-)1,803

Лектин 0,083 — 2,038, при этом все сухое вещество в растворе составляет 1,203-1,227 Mac.X, остальное — вода.

Таблица 1

154 0728

Компоненты

Содержание компонентов минимальное оптимальное максимальное

26, 098

61,723

11,765

0,414

1,207

26,) 85

6),929

11,803

2, 038

1,227

25,672

60,717

11,573

0,083

1,203

Солянокислый трис

Хлорид калия.

Сукцинат натрия

Лек тин

Вся смесь в воде,X

Таблица 2

Смесь известная АЕ

Предлагаемая (указана концентрация лектина, мас.X от СВ}

0,008

0,083

0,414 2,038

7,680 е С

Составитель А.Сизов

Редактор Г, Гербер Техред А. Кравчук

Корректор И.Эрдейи

Заказ 238 Тираж 475 Подписное

9НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, ))осква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. агари

Э! 11 . ага ина 101. 3,25

4,28

5,10

5, 20

5,23

5,27

5,28

5,28

5,28

5,28

3,27

4,28

5 12

5,2)

5,25

5,28

5,30

5,31

5,31

5,31

4,34

5,28

6,35

6,44

6,49

6,51

6,5)

6,5)

6,5)

6,57

8,70

10,50

11,35

Il,40

11,45

11,45

11,45

)l,45

1),45

ll,75

9,0

10,50

ll 40

11,40

11,50

11,51

11, 51

11, 60

11,60

12, 00

9,0

10,51

l 1,4)

11,41 !

),50

1) 50

) 1,51

11,60

12, 00

l 2 00