Способ определения триамтерена

 

Изобретение относится к аналитической химии. Целью изобретения является увеличение селективности определения триамтерена в присутствии эндогенных веществ, расширение круга объектов, доступных для количественного анализа, и уменьшение себестоимости . В способе проба обрабатывается насыщенным раствором хлорида цинка в ацетоне с последующим возбуждением флуоресценции раствора на длине волны 370 нм и регистрацией флуоресценции при 440 нм. Способ пригоден для определения триямтерена в лекарственных средствах, биологических жидкостях , организма человека и животных и в воздухе производственных помещений предприятий - изготовителей, 2 табл. о а

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

C0UHAЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1

09) 0l) (51)5 G О! N 21/64

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

flO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (46) 07. 08, 92. Бюл Р 29 (21) 4345050/25 (22) 18.12.87 (7l) Курский государственный медицинский институт (72) А.А.Хабаров и В.М.Иванов (53) 543.42 (088.8) (56) Люминесцентный анализ. Под ред.

М.А,Константиновой Шлезингер. М., 1 ИФМЛ, 1961,с.41 45.

Авторское свидетельство СССР

И 1076833, кл. G 01 Н 33/48, 1980. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИАМТЕРЕНА (57) Изобретение относится к аналитической химии. Целью иэобретения является увеличение селективности опредеИзобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения триамтерена, и может быть использовано для идентификации и количественного определения данного соединения в лекарственных средствах с целью контроля их качества, биологических жидкостях организма при фармакокинетических исследованиях и воздухе производственных помещений предприятий при санитарном контроле.

Целью изобретения является повышение селективности определения в присутствии эндогенных веществ, расширение круга объектов, доступных для ко- личественного анализа, и уменьшение себестоимости.

Максимум собственной флуоресценции триамтерена в ацетоне 420 нм. Такой максимум (или же близкий к нему) ления триамтерена в присутствии эндогенных веществ, расширение круга объектов, доступных для количественного анализа, и уменьшение себестоимости. В способе проба обрабатываетск насыщенным раствором хлорида цинка в ацетоне с последующим возбуждением флуоресценции раствора на длине волны 370 нм и регистрацией флуоресценции прн 440 нм. Способ пригоден для определения триамтерена в лекарственных средствах, биологических жидкостях организма человека н животным н в воздухе производственных помещений предприятий — изготовителей, 2 табл. флуоресценции имеют некоторые эндогенные вещества организма человека и лекарственные средства, назначаемые одновременно с триамтереном (табл.1)

В растворе хлорида цинка сдвиг максимума происходит только при наличии триамтерена эа счет образования внутрикомплексного соединения препарата с цинком, в чем выражается повькпение селективности способа. Эндогенные вещества, такие как панангин, аспаркам, тривиэит-К, адельфан, резерпии, курантил, не изменяют флуоресцентных свойств в присутствии цинка.

Максимум возбуждения флуоресценции 370 нм, излучения - 440 нм. Интенсивность флуоресценции не изменя" ется в течение 48 ч.

В ацетоне растворимость триамтерена в 1000 раз ниже, чем в насыщен153349 1 ном растворе хларида цинка (табл.2), поэтому, чтобы приготовить 100 мл раствора, нужно взять навеску препарата не более 0,0002 r, минимальная же аналитическая навеска при использовании аналитических весов, которые используются в контрольно-аналитических н центральных заводских лабораториях, должна быть не менее 0,05

О,l r. Увеличение растворимости приводит к существенному уменьшению количества необходимого ацетона и уменьшению себестоимости анализа.

Линейная зависимость между кон- 15 центрацией триамтерена и относительной интенсивностью флуоресценции наблюдается в интервале О,OOI á мкг/мл.

Чувствительность определения составляет 0,001 мгк в 1 мл аналиэируемого 20 раствора, 0,05 мкг в 1 мл крови.

П р и и е р. 1. Качественное определение триамтерена.

К 1-2 мкг порошка или мелкоиэмельченных таблеток триамтерена, помещен- 25 ных в пробирку, прибавляют 5 мл ацетона, встряхивают и наблюдают при облучении раствора УФ-светом длиной волны 370 нм фиолетовую флуоресценцию, которая переходит в голубую при 30 прибавлении I мл насыщенного раствора хлорида цинка, что указывает на содержание в исследуемой пробе триамтерена.

Пример 2. Количественное определение триамтерена в таблетках триампур.

150 г (точная навеска) мелкоиэмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл, приливают 80 мл 40 насыщенного раствора хлорида цинка в ацетоне и извлекают триамтерен путем встряхивания в течение 5 мин, Объем доводят до метки, фильтруют, отбрасывая первые 20 мл фильтрата. 45

I мл полученного раствора разбавляют в 100 раз иасыщеннъщ раствором хлорида цинка. Измеряют интенсивность флуоресценция исследуемого и стандартноГО растворов на флуориметре "Квант- 50

5".

Содержание триаитереиа х, г, в таблетке в пересчете на средний вес вычисляют по формуле

Х 55

n » -n b где п интенсивность флуореюценцнн стандартного раствора, Х1

Ъ и, — интенсивность флуоресценции исследуемого раствора, Х; и — интенсивность флуоресценции контрольного раствора, Х;

С вЂ” навеска триамтерена для стандартного раствора, г; а — средний вес таблетки, г;

Ь вЂ” навеска таблеток, r.

Реэультаты определения триамтерена в таблетках триампур хорошо совпадают с результатами, полученными при анализе по научно-технической документации.

Приготовление стандартного раствора триамтерена.

0,025 r (точная навеска) триамтерена растворяют в 100 мл насыщенного раствора хлорида цинка в ацетоне. мл полученного раствора разбавляют в 100 раэ раствором хлорида цинка.

Концентрация препарата " 2,5 мкгlмп.

Пример Э. Определение триам» терена в крови человека.

О,I мл крови, взятой иэ пальца больного, помещают в центрифужную пробирку на 10 мл, прибавляют 3,9 мп ацетона, перемешивают в течение 5 мин и центрифугируют 5 мин при 4000 об/

/мин, Надосадочную жидкость сливают в пробирку и наблюдают при облучении раствора УФ-светом длиной волны

370 нм фиолетовую флуоресценцию, переходящую в голубую при прибавлении

1 мп насыщенного раствора хлорида цинка. Полученный раствор флуориметрируют на флуориметре "Квант-5".

Концентрацию триамтерена в крови х, мкг/мл, вычисляют по формуле е

П! П, x ---"--а С 50 п — n я О ! где n — интенсивность флуоресценции исследуемого раствора, Х;

n — интенсивность флуоресценции стандартного раствора,Z; и - интенсивность флуоресценции контрольного раствора, Х;

С - концентрация стандартного раствора, мкгlмл, 50 — коэффициент разведения.

1»олучены хорошие результаты при определении триамтереиа в крови (искусственная смесь).

Пример 4. Количественное определение триамтерена в воздуха рабочей эоны промышленных предприятий.

Исследуемый воздух просасывают че рев фильтр АФА-ВП-IO. Фильтр с отобранной пробой переносят в стакан и

I 5334 9 I

Т а б л и ц в збу кЦвет Алуоресц. в ацетоне

Длина волны регистр,, нм

Длина волны вет флуор р-ре хло йда цинка

Соединение регист рации, нм

365

Тримтерен

Фурвсемид

Триптофан

Тирознн

Бринальдикс

Фиолетовая 420

Фиолетовая 4)5

Фиолетовая 400 .

Фиолетовая 400

Фиолетовая 4I5

4I5

4I5

Голубая

Фиолетовая

Фиолетовая

Фиолетовая

Фиолетовая извлекают трнамтерен !О мл насыщенного раствора хлорнда цицка в ацетоне. Полученный раствор флуорииетрируют.

Концентрацию тривмтерена х в воздухе, мг/м, определяют по формуле и -no а Ь х о по « у где п, - показания флуориметра для исследуемого раствора; п1,п - показания флуориметрв соответственно для стандартного и контрольного раст15 воров; в " концентрация стандартного раствора, мкг/ил;

Ь - общий объем исследуемого раствора, мл;

6 - объем исследуемого раствора, взятого для анализа, мп I у - объем стандартного раствоf ра, взятого для внализа,мл; 25 у - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным услонням, л.

Таким образом, в способе повышается селективность определения триамтерена в присутствии эндогенных веществ>. расанряется круг объектов, доступных

I для количественного анализа (лекарственные средства, воздух производственных помещений), и уменьшается себесто кчость анализа sa счет повышенна растворимости препарата и умень. веник количества используемого ацетона .

Данные о флуоресценцни соединений, которые могут присутствовать в исследуемом растворе одновременно с триамтереном, показаны в табл.l.

Влияние хлорида цинка на растворимость триамтерена в ацетоне показано в табл.2.

Формула и з о б р е т е и и я

Способ определения трнвитерена, включающий обработку пробы органическии реактивом и регистрацию флуоресценции полученного раствора, по величнне которой определяют количество триамтерена, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью увеличения селективности определения в присутствии эндогенных. веществ, расширения круга объектов, доступных для количественного анализа, н уменьшения себестоимости, анализируемую пробу обрабатывают насыщенным раствором хлорида цинка в ацетоне, воэбуищвют флуоресценцню раствора нв дпине волны 370 нм и регистрируют интенсивность флуоресценции на длине волны

440 нм.

1533491

Таблица 2

Навескв с препарата, мг

Содержание препарата, мг

В ацетоне, В нас. р-ре

100 мл хлорида цинка, 100 мл

П р и и е ч а и и е. Величины навесок веяты с учетом содер кения триамтерена в объ- ектах,приводииых в примерах определения, Состав ител» K. Хвдатовв

Техред M.Äèäíê Корректор

Редактор С.Кузнецов

Н Луче рявая

Заказ 3469 Тиран Подписное ,ВКИИПИ Государственного комитета но изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР ъ 113035, Носква, Ж-35 ° Рауаская наб., д. 4/5

Проивводственно-издательский комбинат Патент", r.Óèãîðîä, ул. Гагарина,101

300

0,2

0,2

0,19

0,21

b,21

0,19

0,21

200