Способ определения активности трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к медицине , в частности, гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нарушения пищеварения. Цель изобретения - повышение точности способа за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения. Для этого биоптат слизистой оболочки тонкой кишки (5-12 мг) помещают в 3 мл охлажденного раствора Рингера и проводят последовательную десорбцию ферментов в шюттель-аппарате. К 0,5 мл полученного смыва биопсионного материала добавляют 1 мл веронал-мединалового буфера с рН 8,6 и 2 мл 40 мг% раствора бензоил-DL-аргинин-п-нитроанилида в буферном растворе (вероналовом) с рН 9,2. Эту смесь инкубируют при 37°С в течение 1 ч., после чего добавляют 0,5 мл 0,5 N раствора HCL для прекращения реакции. С помощью спектрофотометра определяют оптическую плотность на длине волны 410 нм. В качестве контроля вместо смыва берут 0,5 мл раствора Рингера и 0,5 мл 0,5 N HCL добавляют сразу после раствора субстрата. Далее биоптат гомогенизируют, отделяют супернатант, инкубируют в тех же условиях и определяют состояние мембранного пищеварения. Активность трипсина определяют по формуле, приведенной в описании изобретения. Активность трипсина рассчитывают как сумму полученных активностей. Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения активности трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта по сравнению с известным на 50% за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, что, в свою очередь, позволяет улучшить диагностику целого ряда гастроэнтерологических заболеваний и оценить эффективность лечения.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (193 (11) (б(1 4 С 01 N 33j48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4099846/28-14 (22) 18.07.86 (46) 15.09.89. Бюл. ¹ 34 (75) О.И.Яхонтова (53) 616.07(088.8) (56) Масевич Ц.Г., Уголев А.N. и Забелинский Э.К, Методика изучения пристеночного пищеварения в клинических условиях, вЂ” Тер. арх., 1967, № 8, с. 53-57, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ, ТРИПСИНА В БИОПСИОННОМ МЛТЕРИЛЛЕ

ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА (57) Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нарушения пищеварения. Цель изобретения вЂ” повышение точности спо. соба за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, Для этого биоптат слизистой оболочки тонкой кишки (5-12 мг) помещают в

3 мл охлажденного раствора Рингера и проводят последовательную десорбцию ферментов в шюттель-аппарате.

К 0,5 мл полученного смыва биопсионного материала добавляют 1 мп веронал-мединалового буфера с рН 8,6 и

2 мл 40 мгХ раствора бензоил-DI-ap.Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностйки нарушений пищеварения.

Цель изобретения вЂ” повышение точности способа за счет дополнительной

2 гинин-и-нитроанилида в буферном растворе (вероналовом) с рН 9, 2. Эту смесь инкубируют при 37 С в течение

1 ч, после чего добавляют 0 5 мл .0,5 N раствора НС1 для прекращения реакции. С помощью спектрофотометра определяют оптическую плотность на длине волны 410 нм. В качестве контроля вместо смыва берут 0,5 мл раствора Рингера и 0,5 мл 0,5 N НС1 добавляют сразу после раствора субстрата. Далее биоптат гомогениэируют, отделяют супернатант, инкубируют в тех же условиях и определяют состояние мембранного пищеварения.

Активность трипсина определяют по формуле, приведенной в описании изобретения. Активность трипсина рас" считывают как сумму полученных активностей. Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения активности трипсина в биопсинном материале желудочно-кишечного тракта по сравнению с известным íà 50Х эа счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, что, в свою очередь, позволяет улучшить диагностику целого ряда гастроэнтерологических заболеваний и оценить эффективность лечения, оценки состояния мембранного пищеварения.

Способ осуществляется следующим образом.

Получают биоптат слизистой оболочки тонкой кишки, последний помещают

Р= 1000 мед/мг, (А-В) 2 К, р

Фо рмула из о 6 ре тения

Составитель Г.Чуич Редактор М.Келемеш Техред И.Верес Корректор С.Черни

Заказ 5535/47 . Тираж 789

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Ужгород, ул. Гагарина, 101

3 1508151 в охлажденный раствор Рингера (3 мл, T= +2-4 С) и производят десорбцию ферментов в шюттель-аппарате. К

0,5 мл полученного смыва приливают

1 мл веронал-мединалового буфера с рН 8,6 и 2 мл 40 MrX раствора бензоил-DL-аргинин-п вЂ” нитроанилида в вероналовом буферном растворе с рН 9,2 и смесь инкубируют при 37 С в течеиние часа. После этого в смесь добавляют 0,5 мл 0,5 Ы раствора НС1 для прекращения реакции и спектрофотометрируют при длине волны 410 нм на спектрофотометре СФ вЂ” 4, В качестве 15 контрольной пробы вместо смыва берут

0,5 мл раствора Рингера и 0,5 мл

0,5 N раствора НС1 добавляют сразу после раствора субстрата, Расчет производят по формуле 20 где А вЂ” оптическая плотность опытного раствора;

В вЂ” оптическая плотность контрольного раствора;

2 вЂ” пересчет на 1 мл смыва;

К вЂ” коэффициент оптической плстности, равный 0,6;

К вЂ” коэффициент разведения смыва, равный 0,16; мг вЂ” пересчет на 1 мг ткани биоптата;

1000 вЂ” пересчет на миллиединицы. 35

Активность трипсина определяют как сумму полученных активностей, Пример 1. При определении активности трипсина (вес биоптата

9 мг, коэффициент разведения К =0,16) 40 получены результаты A=0,032; В=0,01Т,"

P=l7,5 мед.

Пример 2. При определении активности трипсина: вес биоптата б мг;

К =0,16; А=0,003; В=0,001; Р=2,5 мед. 45

Для 11 здоровых (добровольцев) и

23 больных с поражением тонкой кишки было проведено определение активности трипсина по предлагаемому способу.

В результате получены следующие данные: активность трипсина на уровне

12-перстной кишки в норме 4,1 0,4 и при патологии 3,0 0,3; для проксимального отдела тощей кишки в норме

3,7 0,3 и при патологии 2,7 0,2, Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность определения активности трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта по сравнению с известным на 507. за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, что приводит к улучшению диагностики целого ряда гастроэнтерологических заболеваний и позволяет оценить эффективность проводимого лечения .

Способ определения активности трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта, включающий инкубацию биоптата в физиологичесФ ком растворе с добавлением бензоилDL-аргинин-п-нитроанилида, обработку пробы соляной кислотой с последующим фотометрированием продуктов реакции при длине волны 410 нм, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повьппения точности способа за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, биоптат предварительно обрабатывают для десорбции трипсина, полученный после обработки раствор инкубируют при рН 8,6 в течение 1 ч и определяют в нем активность трипсина, далее биоптат гомогенизируют, отделяют супернатант, инкубируют в тех же условиях, определяют состояние мембранного пищеварения, а активность трипсина рассчитывают как сумму полученных активностей.

Изобретение относится к медицинской биохимии, а именно к способам определения содержания прекалликреина в плазме крови

Способ подготовки препаратов для иммунофлюоресцентного исследования // 1508128

Изобретение относится к медицине

Способ диагностики передозировки инсулина у детей и подростков, больных сахарным диабетом // 1506356

Изобретение относится к педиатрии и эндокринологии

Способ диагностики обострения хронического рецидивирующего панкреатита // 1506355

Изобретение относится к области медицины , в частности, к гастроэнтерлогии

Способ определения нарушений синтеза -цепей глобина в клетках костного мозга больных b -талассемией // 1505190

Изобретение относится к медицинской генетике и касается способов определения нарушений синтеза глобина в клетках костного мозга

Способ определения величины кровопотери при закрытом повреждении органов брюшной полости // 1504594

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения величины кровопотери при закрытых травмах органов брюшной полости

Способ дифференциальной диагностики эндогенной и невротической депрессии // 1504593

Изобретение относится к медицине, а именно к способам медицинского обследования больных с диагностическими целями и может быть использовано при санаторном и курортном лечении больных заболевания суставов, а также при амбулаторном и стационарном лечении

Способ определения изоэлектрической точки биологической ткани // 1504592

Изобретение относится к области биологии и медицины - к способам определения изоэлектрической точки биологических тканей и может быть применено в практике клинических, химико-токсикологических, ветеринарных лабораторий, а также при изолировании веществ из биологических объектов на заводах химико-фармацевтической промышленности

Способ определения агрегации тромбоцитов // 1504591

Изобретение относится к медицине, к способам диагностики и контроля за эффективность лечения заболеваний, связанных с нарушением системы гемостаза

Способ определения индивидуальной чувствительности к фармакотерапии при железодефицитной анемии // 1504590

Изобретение относится к области клинической медицины , в частности, гематологии

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750