Способ определения воды в биологических объектах
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
151) с(G -01 N 24/I О
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4019670/31-25 (22) 1О. 02.86 (46) 23.05.88.Вюл. 11 19 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР (72) В.А.Моисеев, С.Х.Межидов и О.А.Нардид (53) 538.113 (088.8) (56) Керова И.К. Применение мочевины в офтальмологической практике.
Вестник офтальмологии, 1965, Ф 6, с.65-68.
Авторское свидетельство СССР
И 830212, кл. G 01 N 24/10, 1981. (54) СПОСОГ> ОПРЕДЕ. 1ЕНИЯ ВОЛЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОВЬЕKTAX
„,SU„„! 397813 (57) Изобретение относится к биологии и может быть использовано для изучения влияния физико-химических факторов на биологические объекты.
Цель изобретения — определение изменения количества внутриклеточной воды. В контрольный и опытный образцы суспензии клеток вводят иминоксильный радикал в конечной концентрации
-3 -4
2 ° 10 — 10 моль/л и парамагнитную соль К )Fe(CN) g в конечной концентрации 0,09-0,1! моль/л, после чего регистрируют спектры ЭПР контрольного и опытного образцов и по соотношению интенсивностей спектров ради калов определяют изменение количества внутриклеточной воды.! 397813
Составитель А.Федоров
Редактор В.Данко Техред Л.Олийнык Корректор М,демчик
Заказ 2599/42 Тираж 847 Подписное
ВПИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно †полиграфическ предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4
Изобретение относится к биологии и может быть использовано для изучения влияния физико-химических факторов на биологические объекты.
Цель иэобр тения — определение чзменения количества внутриклеточной воды.
Способ осуществляют следующим образом. 10
В контрольный и опытный образцы
"суспенэии клеток вводят иминоксильный радикал 2,2,6,6-тетраметил-4-оксопиперидин-1-оксил в ко-э нечной концентрации 2 10
10 + моль/л и парамагнитную соль
К (Fe(CN) 1 в конечной концентрации
0,09-0,11 моль/л и снимают спектры
ЭПР. Затем сравнивают иптенсивность спектров в контрольном и опытном 20 образцах. Интенсивно.ть спектра ЭПР радикала пропорциона.|ьна кс-.ичеству радикала внутри клеток и, соответственно, количеству воды в них. Поэтому изменение количества воды опреде25 ляют по формуле
h-hr
O - — — — — — -100, .h где h,,h„ — интенсивность спектров
ЭПР радикала для контрольного и опытногo образцов, соответственно.
Пример. Суспенэию зритроцитов35 отмыли от лейкоцитов физраствором путем центрифугирования в течение
20 мин при 3000 об/мин. После этого к части суспензии добавили 1:1 раствор, содержащий 4 10 моль/л имино- 40 ф ксильного радикала 2, 2, 6, 6-тетраметил-4-оксопиперидин-1- оксила и
0,1 моль/л парамагнитной соли.
Образец в капилляре поместили в о резонатор спектрометра ЭПР и при 4 С сняли спектр контрольного образца.
Затем к другой части суспенэии в таком же соотношении добавили раствор, содержащий кроме иминоксильного радикала (4 ° 10 моль/л) и парамагнитной соли (0,1 моль/л) ЗОХ ПЭО-1500, и аналогичным образом сняли спектр
ЭПР радикала. Интенсивность спектра контрольного образца h 86 отн.ед., опытного h, 57 отн.ед. Таким образом, количество воды в клетке уменьшилось на ЗОХ.
Испытания показали, что предложенный способ позволяет определить изменение количества воды внутри клетки с достаточно высокой точностью (+15K) Формула изобретения
Способ определения воды в биологических объектах, заключающийся во введении в контрольный и опытный образ цы парамагнитной соли K> (F е (CN) ) и снятии спектров ЭПР радикалов, путем определения соотношения количества воды в контрольном и опытном образцах, отличающийся тем, что, с целью определения изменения количества внутриклеточной воды, в контрольный и опытный образцы, представляющие собой суспензии клеток, вводят дополнительно иминоксильный радикал 2,2,6,6-тетраметил-4-оксо-, пиперидин-1-оксил в конечной концентрации 2.10 — 10 моль/л, а парамагнитную соль К э )Fe(CN)< вводят в конечной концентрации 0,09
0,11 моль/л и по соотношению интенсивностей спектров ЭПР контрольного и опытного образцов определяют изменение количества воды.
