Способ определения содержания плазминогена в плазме крови

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к способам определения биологически активных соединений (БАС), предназначено для гематологии, физиологии, биохимии кардиологии. Цель изобретения - повышение точности способа при определении БАС у животных. Для зтого к плаз- -ме крови крысы,.разведенной физиологи ческим раствором в соотношении 1:7- 1:24, добавляют одинаковое количество взятых в равных соотношениях растворов эуглобулиновой фракции, которую выделяют из плазмы крови человека и разводят боратным буфером до 25-75%- ной концентрации, и стрептокиназы в концентрации 150-400 ME. Способ позволяет определить соединение плазминогена у человека и животны {. с S

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1

„.SU„„1386902 (51) 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4025196/28-14 (22) 21.02.86 (46) 07.04.88. Бюл. М 13 (71) МГУ им. М.В. Ломоносова (72) Е.Е. Шимонаева и Г,В,Андреенко (533 612 ° 115(088.8) (56) Хватов В.Б., Петренко О.А. Получение специфического субстрата вЂ” плаэминогена человека для количественного определения активатора плазминогена, в плазме крови внезапно умерших.

Проблемы гематологии и переливания крови, 1975, Ф 6, с. 57-60, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ

ПЛАЗМИНОГЕНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ (57) Изобретение относится к способам определения биологически активных соединений (БАС), предназначено для гематологии, физиологии, биохимии, кардиологии. Цель изобретения вЂ” повы.шение точности способа при определении БАС у животных. Для этого к плазме крови крысы,,разведенной физиоло" гическим раствором в соотношении 1:71:24, добавляют одинаковое количество взятых в равных соотношениях раст« воров эуглобулиновой фракции, которую выделяют из плазмы крови человека и разводят боратным буфером до 25-757ной концентрации, и стрептокиназы в концентрации 150-400 ME. Способ позволяет определить соединение плазминогена у человека и животных.

1386902

Изобретение относится .к способам определения биологически активных соединений и может быть использовано в гематологии, физиологии биохимии, кардиологии.

Целью изобретения является повышение универсальности и точности способа при определении у животных.

К плазме крысы, разведенной физио- 10 логическим раствором в соотношении

1:7-1:24, добавляют одинаковое количество взятых в равных соотношениях растворов эуглобулиновой фракции, которую выделяют из плазмы крови человека известным способом и разводят боратным буфером до 25-75%-ной концентрации, и стрептокиназы в концентрации 150-400 ME.

Пример 1. Плазму крысы раэ- 20 водят физиологическим раствором в соотношении 1:7, т.е. концентрация плазминогена соответствует верхней границе допустимого диапазона, К 0,1 мл разведенной плазмы добавляют 0,05 мл 25 (400 ME) стрептокиназы и 0,05 мл

75%-ной эуглобулиновой фракции иэ плазмй человека, инкубируют 10 мин при комнатной температуре, добавляют

5%-ный раствор казеина, смесь инкубируют 3 ч при 38 С, реакцию останавливают хлорной кислотой, центрифугируют при 12 тыс. об/мин и спектрофо. тометрически определяют продукты расщепления казеина плазмином.уровень .плаэминогена в плазме крыс получают равным 26 КЕ.

Пример 2 Плазмы крысы разводят физиологическим раствором в соотношении 1:24, т.е. концентрация плазминогена соответствует нижней границе допустимого диапазона. К 0,1 мл разведенной плазмы добавляют 0,05 мл (150 NE) стрептокиназы и 0,05 мл

25%.-ной эуглобулиновой фракции иэ плазмы человека, инкубируют 6 мин при комнатном температуре, добавляют

ЗЕ-ный раствор каэеина, смесь инкубируют 1 ч при 36 С, реакцию останавливают хлорной кислотой, центрифугируют 50 при 8 тыс.об/мин и определяют продукты расщепления казеина на спектрофотометре. Уровень плаэминогена получают равным 22 КЕ.

Пример 3, Плазму крысы разводят физиологическим раствОром в ccl отношении 1:19, т.е. концентрация плаэплаэминогена соответствует среднему значения диапазона. К 0,1 мл разведенной плазмы добавляют 0 05 мл (200 МЕ) стрептокиназы и 0,05 мл

50 -ной эуглобулиновой фракции, инкубируют 7 мин при комнатной температуре, добавляют 4 .-ный раствор каэеина, смесь инкубируют 2 ч при 37 С, реакцию останавливают хлорной кислотой, центрифугируют при 10 тыс.об/мин и спектрофотометрически определяют продукты расщепления казеина плазмином. Уровень плазминогена получают равным

27 КЕ, что соответствует. максИмальному значению концентрации плазминогена в плазме крыс.

Повышение точности способа достигается тем, что добавление в пробу, содержащую стандартные количества стрептокиназы, такой же конструкции эуглобулиновой фракции человека приводит к образованию постоянных количеств активатора, а также подбором соответствующего разведения исследуемой плазмы. Это дает возможность получать точные и хорошо воспроизводимые результаты с высокой статистической достоверностью, которые отражают истинное содержание плазминогена в крови.

Повышение универсальности достигается тем, что использование эуглобулиновой фракции человека устраняет видовую специфичность стрептокинаэы и позволяет определять содержание плазминогеиа не только в крови человека, но и в крови целого ряда животных, Это особенно важно для тех видов, у которых резко выражена видовая специфичность и определение содержания плаэминогена со стрептокинаэой практически невозможно.

1?езультаты определения содержания плазминогена в крови человека и животных предложенным способом: человек

17 KE + 0,5; кролик вЂ” 19 KE + 0,3; собака вЂ” 20 КЕ + 0,3; крыса вЂ” 24,5 КЕ +

+0,3; бык - 11 KE 1 0,1, Ф о р м у л а и э о б р е т е н и я

Способ определения содержания плазминогена в плазме крови, заключающийся в обработке разведенной физиологическим раствором плазмы крови растворами стрептокиназы и добавлении казеи:а, инкубации, добавлении хлорной кислоты с последующим спектрофотомет138б902

Составитель Н. Литвиненко

Техред Л.Сердюкова Корректор С. Черни

Редактор О. Юрковецкая

Заказ 1491/43 Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 е рированием надосадочной жидкости,о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения универсальности и точности способа при определении у живот-

5 ных, плазму разводят физиологическим раствором в соотношении 1:7-1:24, добавляют смесь равных количеств 25

75Х-ной эуглобулиновой фракции крови человека и 1 50-400 МЕ стрептокиназы.

Способ определения содержания плазминогена в плазме крови

Изобретение относится к области биохимии и медицины и может быть использовано для определения концентрации гемоглобина в крови

Способ исследования функций митохондрий // 1386900

Изобретение относится к биохимии, биофизике, точнее к биоэнергетике, предназначено для изучения in vitro механизма действия фармакологических и других биологически активных веществ на окислительное фосфорилирование и другие функции митохондрий

Устройство для раздельного отбора последовательных потоков мочи у сидящего пациента при взятии проб для лабораторного и бактериологического исследования // 1384219

Изобретение относится к медицине и направлено на повьшение точности отбора последовательных потоков мочи

Способ стабилизации синаптосом // 1383204

Изобретение относится к физикохимической биологии, касается способа устранения повреждения биологических мембран, вызванных действием фосфолипаз, и предназначен для оптимизации длительного хранения препаратов биологических мембран

Способ дифференциальной диагностики форм бронхиальной астмы // 1381398

Изобретение относится к медицине , точнее к пульмонологии,- аллергологии , касается обследования больных различными формами бронхиальной астмы (БА)

Способ моделирования острой ишемии сердца // 1381397

Способ определения индивидуальной чувствительности к профилактической вакцинации у детей // 1381396

Изобретение относится к медицине , точнее к педиатрии, предназначено для предупреждения осложнений в поствакцинапьном периоде

Способ диагностики ревматизма путем выявления ревматического анамнеза // 1380441

Изобретение относится к меди1у1- не, а именно к иммунологическим способам прогнозирования и диагностики заболеваний, в частности ревматизма

Способ определения холестерина в крови // 1379738

Изобретение относится к медицине , точнее к электрохимическим способам анализа концентрации холестерина в крови путем измерения тока ферментных реакций при электролизе

Способ диагностики пиелонефрита // 1379737

Изобретение относится к области медицины, а именно к уронефрологии

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750