Способ диагностики гломерулонефрита

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к медицине . Цель изобретения - диагностирование в ранние сроки путем определения уровня прекалликреина в крови Для этого в пробирку на водяной бане при 25°С вносят равные части плазмы и суспензии каолина (10 мг/мл). Смесь отбирают в пробирки, содержащие. 0,05 М мединалового буфера, рН 7,6, добавляют протаминсульфат и инкубируют пробы 15 мин при 35°С. Затем добавляют 20%-ную трихлоруксусную кислоту (ТХУ). В контрольные пробы протаминсульфат вносят после ТХУ.После осаждения нерасщепившегося протаминсуяьфата ТХУ пробы центрифугируют 45 мин при 5000 об/мин. Затем пробирки с отобранным ТХУ-центрифугатом держат 60-120 с на кипящей водяной бане, повторно центрифугируют 15 мин при 5000 об/мин. В прозрачном центрифугате определяют содержание аргинина . Количество аргинина в пробах служит мерой активированного прекалликреина . Уровень прекалликреина в плазме здорового человека 178,81 t10 мкмоль/л.мин. При уровне ниже 130 мкмоль/л.мин делают вывод об активации калликреин-кининовой системы крови, вызванной наличием аутоиммунного процесса в почке, и диагностируют гломерулонефрит. (Л оэ 00 со

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

PECflYEiflHH (19) (11) (Я) 4 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3733404/28-14 (22) 28. 02, 84 (46) 23.06.87. Бюл, 1(23 (71) Киевский научно-исследовательский институт урологии и нефрологии (72) Е.И.Кримкевич, Н.М.Петрунь и Е.И.Кучеренко (53) 612.015:616.6 (088.8) (56) Биохимические методы исследования в клинике./ Под ред. А.А.Покровского. вЂ” М.: Медицина, 1969, с.61. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения вЂ” диагностирование в ранние сроки путем определения уровня прекалликреина в крови, Для этого в.пробирку на водяной бане при

25 С вносят равные части плазмы и

0 суспензии каолина (10 мг/мл) . Смесь отбирают в пробирки, содержащие

0,05 М мединалового буфера, рН 7,6, 1 910 А1 добавляют протаминсульфат и инкубируют пробы 15 мин при 35ОС. Затем добавляют 207-ную трихлоруксусную кислоту (ТХУ) . В контрольные пробы протаминсульфат вносят после ТХУ.После осаждения нерасщепившегося протаминсулъфата ТХУ пробы центрифугируют

45 мин при 5000 об/мин. Затем пробирки с отобранным ТХУ-центрифугатом держат 60-120 с на кипящей водяной бане, повторно центрифугируют 15 мин при 5000 об/мин. В прозрачном центрифугате определяют содержание аргииина. Количество аргинина в пробах служит мерой активированного прекалликреина. Уровень прекалликреина в плазме здорового человека 178,8 +

+ 10 мкмоль/л.мин, При уровне ниже

130 мкмоль/л,мии делают вывод об активации калликреин-кининовой системы крови, вызванной наличием аутоиммунного процесса в почке, и диагностируют гломерулонефрит.

1 131

Изобретение относится к медицине и может использоваться для диагностики гломерулонефрита.

Цель изобретения вЂ,диагностирование в ранние строки, что достигается за счет определения уровня прекалликреина в крови, Способ осуществляют следующим образомм.

В полиэтиленовую пробирку, помео щенную на водяную баню-при 25 С,вносят 0,2 мл плазмы и 0,2 мл суспенэии каолина (1 0 мг/мл). После контакта плазмы с каолином в течение 1 мин отбирают по 0,2 мл смеси в пробирки, содержание 0,4 мл 0,05 M мединалового буфера, рН 7,6; Добавляют 0,2 мл

I7.-ного протаминсульфата и инкубируо ют пробы 15 мин при 35 С, после чего реакцию останавливают, добавляя

0,8 мл 20Х-ной трихлоруксусной кислоты (ТХУ). В контрольные пробы протаминсульфат вносят после ТХУ. После осаждения нерасщепившегося протаминсульфата трихлоруксусной кислотой пробы центрифугируют 45 мин при

5000 об/мин.

После этого пробирки с отобранным

ТХУ-центрифугатой погружают в кипящую водяную баню на 60-120 с, охлаждают и повторно центрифугируют при

5000 об/мин 15 мин, В прозрачном центрифугате определяют содержание аргинина по реакции Сакагучи. Для этого к 1 мл цеитрифугата добавляют

1 мл дистиллированной воды, 1 мл

0,027-ного раствора оксихинолина, 1 мл 10Х-ного раствора едкого натра.

Через 2 мин добавляют 0,2 мл 1Х-ного. раствора NaBrO спустя 15 с вЂ” 1 мл

40Х-ного раствора мочевины, по истечении 45 с вЂ” 1 мл дистиллированной воды. После каждого добавления очередного реактива пробы тщательно пе" ремешивают. Спустя 10 мин определяют оптическую плотность раствора при

508 нм на спектрофотометре илн на

ФЭКе при светофильтре Ф 5 в кювете

10 мм, сравнивая опытную пробу с контрольной.

Количество аргинина в пробах служит мерой активированного прекалликреина, Активность прекалликреина выражаwr в микромолях аргинина, отщепленного от протаминсульфата 1 литром плазмы крови за 1 минуту, по формуле

Рх Ч, х 1000

xVxt xM где P вЂ” количество аргинина в пробе, 5 мкг;

V вЂ” общий объем пробыв млэ

V. объем плазмы в пробе, мл; о

t, вЂ” время инкубации при 35 С, мин; вЂ” время преинкубации при 25 С, мин;

М вЂ” молекулярная масса аргинина;

1000 вЂ” пересчет на l л плазмы.

При расчете уровня прекалликреина учитывается разность между содержанием аргинина в плазме, активированной в течение 1 мин и неактивированной.

Уровень прекалликреина в плазме здорового человека составляет 178,8+

+ +11,0 мкмоль/л.мин.

Снижение уровня прекалликреина ниже 130 мкмоль/л.мин свидетельствует об активации калликреин-кининовой системы крови, вызванной наличием аутоимунного процесса в почке, 1

Пример l. Больной С., 1968 r, -рожд., Р ист.болезни 629. Содержание общего белка, определенное известным методом 81,4 г/л вЂ” нормальный уровень, Параллельно исследованный предлагаемым способом уровень прекалликреина 97,3 мкмоль/л,мин

35 понижен, Клинический диагноз: острый гломерулонефрит, т.е. предложенный способ позволяет провести необходимую диагностику на раннем этапе и раньше назначить патогенетическую

40 терапию, Формула изобретения

Способ диагностики гломерулонефрита путем исследования белка плазмы крови, отличающийся тем, что, с целью диагностирования в ранние сроки, плазму обрабатывают каолином, инкубируют полученную

50 смесь с протаминсульфатом, далее добавляют трихлоруксусную кислоту, полученный супернатант кипятят в течение 60-120 с, после чего в нем определяют уровень прекаллекреина и

55 при значении его менее 130 мкмоль/

/л.мин диагностируют гломерулонефI рит.

Изобретение относится к обработке металлов двалением, а именно к конструкциям штампов для безоблойной штамповки

Способ прогнозирования течения герпетиформного дерматита дюринга // 1317361

Изобретение относится к области медицинь1 и предназначено для дерматологии

Способ определения днк в клетках // 1317360

Изобретение относится к цитохимии и предназначено для количественного определения ДНК в клетках микроорганизмов методом проточной цитофлюорометрии

Способ диагностики туберкулезного пародонтита // 1317306

Способ получения культуры эмбриональных клеток лейдига // 1317305

Изобретение относится к медицине , точнее к цитологии

Самофиксирующийся пневматический байонетный прижим // 1316778

Изобретение относится к устройствам для зажима деталей при обработке и может быть использовано на сварочных кантователях

Способ диагностики сердечной недостаточности // 1314269

Изобретение относится к медицине , точнее к кардиологии

Способ обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы и донных отложениях // 1314268

Изобретение относится к области медицинской паразитологии, а именно к способам санитарно-гельминтологического обследования объектов внешней среды

Способ фиксации образцов биологических тканей для гистологического исследования // 1314251

Изобретение относится к гистологии

Способ определения плотности жидкой биологической среды // 1312483

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750