Способ определения устойчивости растений к вирусным заболеваниям

СОВХОЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SUÄÄ 1288949 А i

151> 4 А 01 6 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Аг В

А, ° В

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ,(2T} 3855667/30-15 (22) 24. 12.84 (46) 15.10.87. Бюл. ¹ 38 (71) Институт почвоведения и фотосинтеза АН СССР и ИГУ им. M.Â. Ломоносова (7 2) Е .П. Супонева, Б.А. Киселев и M.Е.Ладыгина (53) 581.2(088.8) (56) Быстрых Е.Е. Некоторые особен— ности электронно-транспортной цепи фотосинтеза табака. Автореферат диссертации. М,, 1971, с. 5 7. (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К ВИРУСНЫМ ЗАБОЛЕВАНИЯМ, включающий заражение растений вирусом, выделение биоорганических компонентов из листьев растений и определение их физиолого-биохимических показателей, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью сокращения времени, трудозатрат и расхо— да материалов, выделение биоорганических компонентов из листьев растений проводят экстракцией 967-ным этиловым спиртом, содержащим 0,050,2 моль LiCL а в качестве физиолого-биохимических показателей используют нолярограмму и оптическую плотность, причем об устойчивости растений к вирусным заболеваниям судят по величине коэффициента устойчивости, определяемого по формуле где К вЂ” коэффициент устойчивости в относительных единицах;

А и А — оптические плотности экст l рагирования биоорганических компонентов из зараженных и контрольных растений соответственно в относительных единицах;

В и  — высоты полярографической

2 волны для зараженного и контрольного растений, мм, при этом при К < 1 растение относят к устойчивым к вирусному заболеванию, а при К 1 — к неустойчивым.

А2 В|

К =—

А, В>

i 128

Изобретение относится к биологии, в частности к диагностике устойчивости растений к фитопатогенным поражениям, и может быть использовано в селекционной практике для отбора новых сортов растений на устойчивость к вирусной инфекции.

Целью изобретения является сокра— щение времени, трудозатрат и расхода материалов.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример. Исследуют растения табака двух видов: Nicotiana tabacum, I сортов Трапезонд-93 и Самсун 4-28, неустойчивых к вирусу табачной моза.ики (ВТМ), сорта Самсун 3073, устойчивого к ВТМ, и Niconiana glutinosa, устойчивого к BTM а также растения сои сорта Приморский 494, неустойчивого к вирусу мозаики сои (ВМС).

Растения выращивают до появления листьев четвертого яруса. Затем от растения отделяют листья 2-4 яруса, обрабатывают их вытяжкой из системно пораженного ВТМ растения и помещают во влажную камеру (на 24-28 ч).

Через 24-48 ч (до появления видимых симптомов заболевания) из зараженных листьев готовят вытяжку следующим образом: навеску 0,5 г зараженных листьев растирают в 10 мл 967-ного этиловorо спирта, содержащего

0,05-0,2 моль LiCl (или другой ней— тральной соли) в течение 2-3 ж н при комнатной температуре (18-25 С).

Концентрация соли ниже 0,05 моль недостаточна для обеспечения электропроводности раствора при полярографических измерениях; повышение концентрации LiCl вьппе 0,2 моль приводит к изменению экстрагируемости липидных и белковых веществ из листьев.

Затем вытяжку фильтруют. После этого 3-5 мл вытяжки помещают в полярографическую ячейку и из раствора удаляют кислород продувкой инертным газом (азот, аргон или гелий) в течение 8-10 мин. Затем снимают по8949 2 лярограмму обескислороженного раствора в диапазоне потенциала от 0,8 до 1,5 В относительно насыщенного каломельного электрода при комнатной

5 о температуре (18-25 С) со скоростью

0,5 В/мин на полярографе ОН-102 (BHP)

Скорость 0,5 В/мин подобрана экспериментально. Высоту полярографической

1g волны В„ (мм) замеряют при потенциале от 1,5 до 1,4 В. Параллельно с этим оставшуюся часть вытяжки помещают в кювету для оптических измерений и при длине волны 652 нм опре15 деляют оптическую плотность А„ в относительных единицах Я,Холл, К.Рао.

Фотосинтез.М.: Мир, 1983, с. 44) на спектрофотометре СФ-14.

В качестве контроля используют

20 вытяжки из здоровых растений, для ко торых также определяют высоту полярографической волны В (в мм) и опти- ческую плотность А в относительных единицах.

Измерив высоты полярографических волн (В, и В ) и оптическую плотность (А, и А ) вытяжек, рассчитывают коэффициент устойчивости по уравнению

В таблице приведены средние значения, рассчитанные из трех-пяти изЗ5 мере„ий

Как видно из таблицы, значение

К 7 1 для N.tabacum сортов Трапезонд93 и Самсун 4-28, что свидетельству40 ет о том, что эти сорта неустойчивы к ВТМ, в то время как для сорта Самсун 3073 и N.81.п 1 поза K l, что свидетельствует о том, что данные растения устойчивы к ВТМ. Для сои

45 сорта Приморский 494 К ) l что ха9 рактеризует этот сорт как устойчивый к ВМС.

Зти данные по устойчивости различ. ных сортов табака и сои к вирусной инфекции соответствуют известным данным.

1288949

Определение коэффициента устойчивости растений к вирусным заболеваниям

A, ° отн.ед.

Аг отн.ед.

В,, мм

Объект

N.tabacum, сорт

Трапезонд-93

1,07

0,83

1,18

123

N.glutinosa

1,01

1,12

l 29

0,95

N.tabacum, сорт

Самсун 4-28

85,5 103

71,5

1,12

N.tabacum, сорт

Самсун 3073

89,8

78,5

68

0,96

Соя, сорт

Приморский 494

158

177,5

82

Составитель И.Марченко

Техред А.Кравчук

Корректор С. Черни

Редактор Е.Корина

Тираж 627

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Заказ 4938

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4