Способ определения концентрации акрилонитрила

 

Изобретение относится к медицине , а именно к профпатологии. Цель изобретения - повышение чувствительности и точности способа за счет концентрирования акрилонитрила из воздуха путем барботирования через этаШСРСОЮЯГТДЯ 3 13 ;:jr ( kRbj;f;(«T 1ЛАЯ нол. Готовят раствор с препаратами люциферазы, альдегида, кислорода, зтанола. Добавляют к этому раствору восстановленный флавинмононуклеатид (ФМНН), регистрируют вспышку света и измеряют максимальную интенсивность свечения /3„. Определяемый ингибитор растворяют в этаноле, вносят в реакционную смесь с этанолом в конечной концентрации 0,58-0,65%, люциферазой 1,55-4,5 мкг/мп перед добавлением ФМНН вместо этанола. Измеряют н известных концентраций определяемого вещества. Строят калибровочную кривую, по оси абцисс ее откладывают § концентрацию акрилонитрила, а по оси ординат .. Измеряют OM, сравнивая ее с калибровочной кривой, определяют концентрацию акрилонитрила в воздухе . 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ВСГСОЮЗ -И Я

13 .,::,13

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС P

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3712169/28-14 (22) 15..03.84 (46) 15.11.86. Бюл. В 42 (71) Институт биофизики СО АН СССР и Красноярский государственный медицинский институт (72) В.А.Кратасюк, Р,И.Кручинина, А.M.Êóçíåöoâ, В.В.Иванов и А.М.Фиш (53) 615.9 (088.8) (56) Hastings J.M. Biochemistry 1975, ч.14, У 19, рр. 4310-4316. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИИ КОНЦЕНТРАЦИИ

АКРИЛОНИТРИЛА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к профпатологии. Цель изобретения — повышение чувствительности и точности способа за счет концентрирования акрилонитрила из воздуха путем барботирования через эта„„SU„„270658 А 1 g 4 501 N 21/76 С 12 Q 1/66 нол. Готовят раствор с препаратами люциферазы, альдегида, кислорода, этанола. Добавляют к этому раствору восстановленный флавинмононуклеатид

{,ФМНН ), регистрируют вспышку света и измеряют максимальную интенсивность свечения 1„ . Определяемый ингибитор растворяют в этаноле, вносят в реакционную смесь с этанолом в конечной концентрации 0,58-0,653, люциферазой

1,55-4,5 мкг/мл перед добавлением

ФИНН вместо этанола. Измеряют q для известных концентраций определяемого вещества, Строят калибровочную кривую, по оси абцисс ее откладывают концентрацию акрилонитрила, а по оси ф ординат *. Измеряют 3> сравнивая ее с капибровочной кривой, определяют концентрацию акрилонитрила в воздухе. 2 табл.

1 1 2

Изобретение относится к медицине, а и менно к пр офп атоло гии .

Цель изобретения — IIoBbBllpHHB чувствительности и точности способа.

Способ осуществляют следующим образом, Готовят раствор, содержащий препар ат люциферазы (содержание люцифераэы 1,55-4,5 мкг/мп), альдегид и кислород. Определяемый ингибитор, растворенный в зтаноле, вносят в реакционную смесь (конечная концентрация этанола в реакционной смеси

0,58-0,65%) . При добавлении к этому раствору восстановленного флавинмононуклеотида (ФМНН ) регистрируют вспышку света и измеряют максимальную интенсивность свечения

Измеряя максимапьную интенсивность свечения 3 для заведомо известных концентраций определяемого вещества, строят калибровочную кривую, по оси абцисс которой откладывают концентрации акрилонитрила, а по оси ординат—

Далее, измеряя j „ee с калибровочной кривой, определяют концентрацию акрилонитрила в воздухе, Пример. Для определения концентрации акрилонитрила строят калибровочную кривую. Для этого готовят. раствор, содержащий 50 мкл

0,00057.-ного миристинового альдегида, 20 мкл препарата люциферазы (1,4 мкг), 5 мкл этанола и 200 мкл

0,1 N фосфатного буфера, рН /,,О,Свечение начинается при добавлении к этому раствору 500 мкл ФМНН (6 х х 10пИ).

Д в реакционыой смеси без ве щества 100 отн.ед. Ошибка измерения 2-3%. Растворенный в этаноле акрилонитрил вносят в реакционную смесь перед добавлением ФИНН .

При внесении в реакционную смесь

10;20;30;50;80 и 100 мг/л акрилонитрила 3„ равно 84,4; 64,9; 55„8; 41,5;

22,1; 13 отн,ед. соответственно. По этим данным строят калибровочную кривую. При анализе неизвестных количеств акрилонитрила вещество концент— рирувт из воздуха путем его барботи— рования через 5 мп этанола со скоростью 35 мэ/ч, в течение 5, 15, 45 мин. 7„ при добавлении 5 мкл этих растворов акрилонитрила 66,4; 34,2;

24,7 отн.ед. При сравнении измеренных величин с калибровочной кривой

70658

S0

30 получают соответственно 19; 60;

78 мг/л, что соответствует 17,6;

3,07, 0,74 мг/м акрилонитрила, В табл, 1 приведены примеры реа. лизации способа при разном содержании люцифераэы в реакционной смеси, Иэ табл. 1 видно, что при уменьшении содержания люциферазы, увеличивается чувствительность способа.Однако, при уменьшении количества люциферазы ниже 1,2 мкг, уменьшается точность анализа, поэтому оптимальным для способа является интервал

1,2-3,5 мкг люциферазы (1,55

4,5 мкг/мл), В табл,2 приведены примеры реализации способа при разном содержании этанола в реакционной смеси, Чувствительность способа практически не изменяется при варьировании количества этанола в реакционной смеси от 4,5 до 5 мкл. Однако, при добавлении этанола меньше 4,5 мкл, увеличивается ошибка измерения, К тому же этанол в количестве больше 5 мкл изменяет величину максимальной интенсивности свечения, при этом уменьшается чувствительность анализа. Поэтому оптимальными для способа являются 4,5

5 мкл этанола 0,58-0,657.

Высокая точность определения акрилонитрила обеспечивается его растворением в этаноле °

Точность измерения в предлагаемом способе + 2-3% а в известном спосо— бе + 26,2%, т,е, точность измерений увеличивается почти в 10 раз, Фор мул а и з о б р е т е ни я

Способ определения концентрации акрилонитрила путем добавления пробы с акрилонитрилом в реакционную смесь, содержащую альде гид, восстановлен п»й ,лавинмононуклеотид и люциферазу, с последующим измерением максимальной интенсивности свечения, величина которой обратно-пропорциональна концентрации акрилонитрила, о т л и ч ающий ся тем, что, с целью повьппения чувствительности и точности способа, содержание люцифер азы составляет 1, 55-4, 5 мкг/ьы, олр едез1яемое вещество концентрируют барботированием через этанол, а в реакционную смесь дополнительно «водят в конечной концентрации О, 58-0, 65% . з l 270658 4

Т аблица 1

Чувствительность и точность анализа акрилонитрила в зависимости ат концентрации люциферазы, Концентрация этанола фиксирована—

0,657,.

Ошибка, 7

Количе0,7

0,9

+20

1,0

1-1?,2

1,29

1,2

1,55

7,7 3

1,4

1,8

t2,5

". 2 ° 1

1,5

1,95

+2,4

1,74

2,25

3,5

4,5

2 ф 5

19,7

+2,4

5,0

221

3,9 - в 7

317,4

411,1

9,0 2,2

18

Таблиц а 2

Чувствительность и точность анализа акрилонитрила в зависимости от количества этанола.

Концентрация люциферазы 1,8 мкг/мп.

Концентрация этанола, Е

КсличестОшибка, Е во зтанола в пробе, мкл

+8,5

0,52

4,25

0,55

+7 3

4,5

0,58

4,75

+3,1

0,61

0,65

t 310 3,7

0,67

5.?5

017

Ъ:4,1

5 5

ВНИИПИ Заказ 6236/46 Тираж 778 Подписное

Произв.-п злигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ство лю циферазы в пробе, мкг

Концентр а ция люци фераэы, мкг/мл

Чувствительность акрилонитрила, мг/л

Чувствительность акрилокитрила, мг/г