Способ дифференциации r-форм холерных вибрионов от l-форм и их ревертантов
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ R-ФОРМ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ ОТ L-ФОРМ И ИХ РЕВЕРТАНТОВ путем исследования взвеси исследуемых микроорганизмов, о тличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, возбуждают собственную флуоресценцию микробной взвеси ультрафиолетовым светом длиной волны 365 нм, свет флуоресценции резистируют в диапазоне 400-580 нм и дифференциацию проводят по интенсивности с тарной собственной флуоресценции взвеси.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ Ю|МСМ РЕСПЮЛИН
09) (И) (51.)4 С 12.Й 1/20, С 12 Q 1/04, С 12 и 1:63
Щф удоу» „е лъ
ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТЕ
К ABTOPCHOIUIY СВИДЕ ГЕЛЬСТВУ
a_#_33ip 4Т,„. ú Ô„А (54)(57 ) .СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ й-ФОРМ
ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ OT L-ФОРМ И ИХ
РЕВЕРТАНТОВ путем исследования взвеси исследуемых микроорганизмов, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, возбуждают собственную флуоресценцию микробной взвеси ультрафиолетовым светом длиной волны 365 нм, свет флуоресценции резистируют в диапазо- не 400-580 нм и дифференциацию проводят по интенсивности суммарной собственной флуоресценции.взвеси.
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21 ) 3756770/28-13 (42) 20.06.84 (46) 30,03,88. Бюл. У 12 (71) Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский прожвочумный!институт (72) Ю.МЛомов и Л.А.Голубкова (53) 576.8.093.1 {088.8) (56) Механизмы и диапазон изменчи- вости холерных вибрионов. Ростовское . книжное издательство, 1981, с.166167.
НИЯ ":1.;, t
1198952
Дифференциация R-,L-форм и ревертантов Ь-форм холерного вибриона в зависимости от интенсивности собственной флуоресценции
Интенсивность собственной фяуоресценции, Х рмы .Штаммы Ревертан- L-формы ты 1."форм
Шт
6691
l2,2 4616
22,5
74,8
10,6
9,4.80,7
82,0
23,2
2.1,6
1899
С-У!
4617
4608
97,4
98,3
3933
66 R
3!!9/Зб
18,9
20,8
9,4
3119/34 1, 7
31!9/32 9,9
95,2
90,8
3943
4661!
9,7
22,6 .
64,9
94,0
3!19/6 .11,5, 306
3119/7 !1,7 692
2! ° 9
21,6
Средняя х е 22
Средняя х 86
Ошибка средней пж3,6
Ийш. Средняя М !!
Оаибка средвей ще 0,35
Ошибка средней а 0,3! .
Изобретение относится к области медицины, в частности эпидемиологии.
Целью изобретения является ускорение и упрощение способа.
Пример. 1 з колоний, подозрительных на R"ôîðìó, выращенных на
1,5Х-ном агаре Мартена на)чашках
Петри, покрытых стерильными полупроницаемыми целлофановыми дисками, готовят взвесь на фосфатном буфере с концентрацией 1 млрд.м.кл в 1 мл.
Повышение концентрации микробной взвеси гасит флуоресценцию, а понижение до 500 тыс. снижает интенсивность 15 собственной флоуресценции. Целлофановые диски используют с целью изоляции колоний от примесей питательной среды, Суспензии живых бактерий разливают в .стандартные кюветы по 8 мл. 20
В качестве контроля, по которому настраивается прибор используют фосфатный буфер и при расчете интенсивности свечения взвесей величина флуоресценции буфера вычитается. Суммар- 25 ная собственная флуоресценция микробных взвесей измеряется на электронном флуориметре ЗФ 3МА при длине волны возбуждающего свете 365 мн, а свет флуоресценцин .регистрируется 30 при длинах волн в диапазоне 400580 нм, Об интенсивности флуоресценции судят по показаниям мйкроамперметра.
Время осуществления способа 18 ч.
В работу были взяты 9 штаммов
R-форм холерных вибрионов, агглютинирующихся до титра и полутитра
"R0"-холерной диагностической сывороткой - Ч.Eltor 6691, 1899, С-71, 66 R, 3119/36, 3119/37, 3119/32, 3119/7, 3119/6 и.9, штаммов 1 -форм холерных вибрионов - V.Eltor 4616, 4617э 4608в 3933э 3935в 3943 4661в
306 и 691; и 9 штаммов равертантов
L-форм.
Результаты определения приведены в таблице.
Интенсивность суммарной собственной флуоресцении в пределах 1141,3 достоверно свидетельствует о наличии в пробе R-форм, в пределах 22 1,5— о наличии ревертантов L-форм, а в пределах 86 11,7 -1 -форм холерных вибрионов, !
Наличие достоверной разницы. между
R-формами, L-формами и ревертантами
L"ôîðì холерных вибрионов позволяет использовать этот способ для дифференциации атипичных форм холерного вибриона как вспомогательный лабораторный тест.
