Штамм @ @ свбдо-141,используемый для изучения лизогенной конверсии у @ @
Штамм Pseudomonas pseudomallei СВБДО-141 (коллекция Саратовского научно-исследовательского противочумного института Микроб), используемый для изучения лизогенной конверсии у Pseudomonas pseudomallei.
СОЮЭ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ABTOPCH0INY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3664671/28-13 (22) 24. 11. 83 (46) 07.08.85. Бюп. В 29 (72) А.Л.Буланцев, И.И.Денисов и Т.П.Орлова
:(71) Волгоградский научно-исследова- . тельский противочумньЖ институт (53) 576.8.093. 1(088.8) (56) 1. Томов А.Ц. и др. Лизогения у рода Nalleomyces. ЖМЭИ, 3978, Ф 8, с. 102-105 (прототип).
„„SU„„1171524 A (s))4 С 12 N 15/00 (С 12 N 1/16 .
С 12 k 1:72) (54) ШТАММ PSEUDOMONAS PSEUDOMALLEI
СВБДО-14 1, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ
ЛИЗОГЕННОЙ КОНВЕРСИИ У .PSEUDOHONAS
PSEUDOMALLEI. (57) Штамм Pseudomonas pseudomallei
СВБДО-141 (коллекция Саратовского научно-исследовательского противочумного института "Микроб" ), используемый для изучения лизогенной конверсии у Pseudomonas pseudomallei.
Результаты проведенных исследований подтверждают отсутствие спонтанной фагопродукции у предлагаемого штамма в отличие от исходного штамма
P.pseudomallei С-141, наличие чувствительности штамма P.pseudomallei
С-ВБДО-141 к гомологичному фагу.
Различия вирулентных свойств этих же штаммов P pseudomallei для белых мышей и золотистых хомячков представлены в табл. 2.
Использование штамма благодаря его ализогенцости дает возможность использовать его для изучения феномена лизогенной конверсии у s. pseudomallei.
1 11715
Изобретение относится к микробиоФ логии, в частности к генетике микроорганизмов.
Известен штамм Pseudomonas pseudoma1lei С-141, типичный по культуральным, биохимическим и другим характеристикам для возбудителя мелиоидоза и используемый в качестве референтного (1 1.
Однако штамм С-142 не может быть t0 использован для изучения лизогенной конверсии, а .так@В в качестве реципиента при трансдукции на модели возбудителя мелиоидоза,поскольку, ° i существенным его йризнаком является 15 спонтанная продукция бактериофага.
Цель изобретения — создание ализогенного штамма.
Цель достигается с помощью создания штамма Рseudomonas pseudomallei у0
СВ БДО-14 1 .
Штамм получают методом селекции из музейного штамма Ps pseudomollei
С-141.
Штамм Pseudomonas pseudomallei p5
СВБДО-141 хранится в коллекции
Саратовского научно-исследовательского противочумного института "Иикроб" и характеризуется слеДующими свойствами.
Культурально-морфологические признаки. Клетки палочковидные. Величина бактерий 2-суточной культуры мелиоидоза, выросйих на ИПГА, (0,50,8) (3,0-5,0) мкм. Клетки подвижные, 35 лофотрихи, спор и капсул не образуют, грамотрицательные.
На ИПГА на 2-3 сут вырастают колонии с гладкой поверхностью, ровными круглыми краями, серовато-кремневого цвета, 3-4 мм в диаметре. В ИПБ че40 рез 1-2 сут дает диффузный рост и формирует нежную пленку на поверхности, .образуя придонный осадок.
Физиолого-биохимические признаки.
Факультативный анаэроб. Оптимум росо та наблюдается при 32-34 С. На средах с глюкозой, лактозой, мальтозой и ксилозой осуществляет окисление без ферментации со сдвигом рН в кис50 лую сторону. Лизин не декарбоксилирует. Аргинин декарбоксилирует через
24 ч со сдвигом рН в щелочную сторону. Гидролизует желатин. Индол и сероводород не образует. Гемолизирует
55 эритроциты барана.
Ализогенен. Це дает стоптанной фагопродукции и чувствителен к гомо24 2 логичному бактериофагу исходного штамма С-141.
Штамм СВБДО-141 используют следующим образом.
П р н м е р 1. Получение искусственно лизогенного варианта.
Штамм P.pseudomallei СВБДО-141ализогенный обрабатывают фагом 1, выделенным из известного P.pseudoma1 1åi С-142 " ", Б (Ф 1, Ф 2), в соотношении О, 1:1 (фаговые корпускулы:микробные клетки) . Смесь фаг/бактерии инкубируют в течение 2 ч при о
32 С, а затем после обработки антифаговой сывороткой (АФС) для нейтрализации фаговых частиц высевают на плотную питательную среду (L агар) с целью получения изолированных колоний. В последующем отбирают клон, дающий спонтанную фагопродукцию, и обозначают Р. pseudomallei СВБДО-14 1 (Ф1) .
Пример 2. Проверка ализогенных свойств штамма СВБДО-141.
После предварительного выращивания культур Ps. pseudomallei СВБДО-14 1 и исходного С-14 1 в мясо-пептонном бульоне в течение 48 ч при 34 С и получения из них хлороформных лизатов проведена проверка спонтанной фагопродукции культур P. pseudomallei
СВБДО-141 и С-141 и чувствительности их к гомологичному фагу. Для этого используют двуслойный метод Gratia, В качестве индикаторных культур используют Ps. mallei "Иванович",Р.pseudoma1 I e i C-1 41 и С-ВБДО-14 1 .
Спонтанная фагопродукция штаммов
P.pseudomallei и чувствительность их к гомологичному фагу представлены в табл. 1.
1171524
Таблиц
Индикаторные культуры бактерий
Хлороформные лизаты
Количество негативных колоний
P.mallei Иванович"
0 р, pseudonallei С-141
p.pseudomallei С вЂ” ВБДО-14 1, 102
Таблица?
LD 0 (в микробных клетках), для
Штамм p.pseudomallei белых мьшк Й золотистых хомячков 10 (10
:!О (10
102 с. 10
+Ф1 и Ф2 — резидентные профаги в исходной лизогенной культуре штамма Р. Рзсц.
dorna l l e i С-141
Редактор H.Ãóíüêo
Закал 4819/27
С 141 "k, S (Ф1, Ф2)"
СВБДО-141-ализогенный
СВБДО-14 1 (Ф1) С-141
С-ВБДО-141
С-141
С-ВБДО-14 1
С- 14 i
С-В БДО-14 1
Составитель И. Красильников
Техред С.йовжий Корректор В.Гирпяк
Тираж 525 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, 7(-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент, r . Ужгород, ул . Проектная, 4
