Аппарат для культивирования клеток на микроносителях

 

.АППАРАТ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК НА МИКРОНОСИТЕЛЯХ, содер .жащий вертикально установленную емкость , снабженную аэратором и устройством для перемешивания культурной жидкости с микроносителями, отлича1 щийс я тем, что, с целью повышения выхода клеток, устройство для перемешивания содержит пневмогенератор и стакан, установленный неподвижно днищем вверх в емкости и с зазором относительно днища последней, при этом верхняя часть стакана соединена трубопроводом , снабженным влагоуловителем и фильтром, с пневмогенератором для i создания пульсаций в культуральной жидкости, причем указанный трубопро (Л С вод подключен через дроссель к верхней части емкости.

COOS СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

3(5D С12М 3 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3426357/28-13 (22), 19.04.82 (46) 30.03.84. Бюл. Р 12 (72) В.П.Казаков (71) Институт биологической физики

AH СССР (53) 663 . 038 (088 . 8) (56) 1. Van Wesel А. Z. Microcarr ier

Cultures of Animal Се1ев.-"Tissue

Cul .ure Methods В.пй Applications".

Ed Paul Kruse, Academik Press, 1973.

2..Dauson P.S.S.,Kur s W.L.W., А .derson M.,Jork,À. Е. "Canadian

of Microbiology,1971 v 17, 9 2, р. 229-233.

3. Dynesius R., Lange R.,Eraslan А. Snyder Ч. New suspension:

Culter system (Mini-AR).-"Biot echnology and Bioengineering,, 1975, ч.ХУТУ, р. 1467-1471.

„„80„„3 О828О7 А (54)(57) АППАРАТ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК HA МИКРОНОСИТЕЛЯХ, содер..жащий вертикально установленную емкость, снабженную азратором и устройством для перемешивания культурной жидкости с минроносителями, о т л и ч а и шийся тем, что, с целью повышения выхода клеток, устройство для перемешивания содержит пневмогенератор и стакан, установленный неподвижно днищем вверх в емкости и с зазором относительно днища последней, при этом верхняя часть стакана соединена трубопроводом, снабженным влагоуловителем и фильтром, с пневмогенератором для создания пульсаций в культуральной В жидкости, причем указанный трубопровод подключен через дроссель к верх- Ц / ней части емкости.

1082807

Для достижения поставленной цели в аппарате для культивирования клеток на микранасителях, содержащем вертикально установленную емкость, снабженную азраторам и устройством для перемешинания культуральнай жидкости с микраносителями, устройство для перемешивания содержит пненмогенератор и стакан, установленный неподвих;на днищем вверх н емкости и с зазором относительна днища последней, при этом верхняя часть стакана соединена трубопроводом, снаб- женным влагаулонителем и фильтром, с пневмогенератарам для сазцания пульсаций в культуральной жидкости, причем указанный трубопранад подключен через драссель к,верхней части емкости, 60

Изобретение относится к аппаратам для культивирования клеток на м икроносителях и предназначено для . использования в медицине, вирусологии и ветеринарии.

Известен аппарат для культивирования клеток на микранасителях, содержащий корпус, устройство для перемешивания и устрайстна контроля и стабилизации параметрон процесса 31). 10

Недостаток аппарата заключается в том, что из-за интенсивного перемешивания затруднена ацгезия клеток к микроносителям. Поэтому в качестве микроносителей могут использоваться лишь некоторые биополимеры типа декстранав, плотность которых близка к плотности клеток.

Известен- также аппарат для культивирования клеток на микроносителях, содержащий корпус, мембранный насос, расположенный н нижней части корпуса, и диспергатар (23.

В этом аппарате достигаются щадящие условия перемещения. Однако работа насоса затруднена, так как микроносителк, проникая ва внутренние полости насоса и оседая на их по верхностях, подвергаются разрушению, при этом разрушаются также и клетки.

Наиболее близок к предлагаемому аппарат для культивирования клеток

<,а микроносителях, содержащий вертикально установленную емкость, снабженную аэратарам и устройством для перемешивания культуральной жидкости с микронасителями, представляю,щим собой насос (3 ).

Недостатком аппарата является пониженный выход клеток при культивировании, так как часть клеток асе- 40 дает во внутренней полости устройства для перемешипания и не участвуют н процессе культивирования, а часть клеток разруаается.

Цель изобретения — повышение выхода клеток.

На чертеже изображен аппарат для культивирования клеток на микраносителях, разрез.

Аппарат для культивиронания клеток на микроносителях содержит вертикально установленную емкость 1 диаметром 7, снабженную аэратором 2 и устройством для перемешивания культуральной с жидкости с микроносителями, состоящим из пневмогенератора 3 и стакана 4 диаметром установленного неподвижно днищем вверх в емкости 1 и с зазором d"относительно днища последней. При этом верхняя часть стакана 4 соединена трубопроводом 5, снабженным влагоуловителем .б и фильтром 7, с пневмогенераторам 3 для ссздания пульсаций в культуральнай жидкости, причем указанный трубопрвод 5 подключен через дроссель 8 к верхней части емкости 1.

На крышке емкости 1 имеются патрубок 9,цля подачи культуральной жицкости и патрубок 10 для отбора проб.

Отношение диаметра 3 емкости 1 к диаметру д стакана 4 составляет

2:1,25. Стакан 4 установлен таким образом в емкости 1, что его перемеще нием вверх или вниз можно изменять величину зазора о .

Предлагаемый аппарат работает сле дуюшим образом.

Емкость 1 примерно да половины через патрубок 9 заполняется культуральной жидкостью, состоящей, например, из среды "Игла" с 10о-ной добавкой бычьей сыворотки и 0,1% метилцеллюлазы н объеме 300 мл, микроносителей из сопалимера стирала с дининилбензалом н количестве б 5 10

6 и клеток ВНК-21 в количестве 150 ° 10

С помощью пневмогенератора 3 создают попеременно разрежение или избыток давления н стакане 4. Воздух пневмагенератара 3 подается по трубопроводу 5 через фильтр 7, где он подвергается биологической очистке, и влагаулавитель б, улавливающий пары влаги при разрежении. При осуществлении попеременно разрежения или избытка давления происходит интенсивное перемешивание культуральной жидкости н емкости 1.

Амплитуда колебаний культуральной жидкости регулируется таким образом, чтобы не происходило ее полного выталкивания или полного вталкинания в стакан 4.

Интенсиннасть перемешивания регулируется частотой и амплитудой колебаний, задаваемой пневмагенератором 3 и зазором Ф"между стаканом 4 и днищем емкости 1.

Рабочая часть колебаний уровня культуральной жидкости составляет

0,5-2,0 Гц. Величина зазора с "зави1082807

Сставитель И,Дербенев

Редактор Л.Пчелинская Техред Л.Коцюбняк Корректор Г.Решетник

Заказ 1677/24 Тираж 52? Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 сит от диаметра партии микроносителей (80-350 мкм!.

Под действием постоянного перемешивания, обеспечивающего гомогенность среды, создаются благоприятные условия прикрепления клеток к микроносителям и их роста.

При необходимости прекращения перемешивания выравнивание уровня культуральной жидкости в емкости 1 и стакане 4 осуществляется через дрос- 10 ,сель 8.

В процессе культивирования осуществляется контроль за ростом клеток

15 путем отбора проб через патрубок 10.

Наличие в аппарате для культивирования клеток на микроносителях устройства для перемешивания, состоящего из пневмогенератора и стакана, установленного неподвижно днищем вверх в емкости и с зазором относительно ее днища, соединение стаканатрубопроводом с пневмогенератором через влагоуловитель и фильтр и подключение трубопровода через дроссель к верхней части емкости позволяет увеличть выход клеток примерно в 5 раз по сравнению с прототипом.