@ , @ -дисукцинимидилсульфит в качестве реагента для синтеза @ -оксисукцинимидных эфиров @ -защищенных аминокислот и пептидов

 

Ы,Ы-Дисукцинимидилсульфит формулы Qa-o-s-OHip 6 в качестве реагента для синтеза N-оксисукцинимидных эфиров М-защищенных аминокислот и пептидов. (Л да ас кэ 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

II5II С 07 0 207/404

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

-0-ъО-И

О 0 (21) 3457553/23-04 (22) 16.04.82 (46) 23.01.84. Бюл. 9 3 (72) A.Â.Ильина, Ю.А.Давидович и С.В.Рогожин (71) Ордена Ленина институт элементоорганических соединений им. A.Н.Несмеянова (53) 547.461.4(088.8) (56) 1. Шредер,3, Любке К., Пептиды. Й., . Мир, 1967, т.1, с.144.

2. Anderson G.W. Zimmerman У.Е. и СайаЬап F.М. The Use of Esters of

N-Hydroxysuccinimide in Peptide

Synthesis. — J.Amer. Chem.Soc.,86, l1964, р.1839.

3 . Anderson G.Ë., СаИа?iап F.È. и K immerman 7. Е. Synthesis of, N Hydroxysuccinimide Esters .of

Асуп Peptides by Mixed Anhydride

Метод -J Amer. Chem.Soc., 89,.1967, р. 178.

4. Ogura Н., Kobayashi T., Shimizu K., Kawabe К. и Takeda K.

A почеФ Active ester Synthesis

reagent (N,N --й1еисс1п1т1йу8 carbonate), Tetrahedron Lett., 1979, р.4745.

5. Fletcher G. u Jones J. A Ые1

of Amino acid Derivatives which hre

Useful in Peptide Synthesis. — Int.

J.Peptide Protein Res., 4, 1972, р. 347. б. Fletcher G u Jones У. А Sup»

plewentary List of Amino-acid Derivatives which are Useful in Peptide Synthesis. — Int.J.Peptide

and Protein Res., 7, 1975, р.91.

ÄÄSUÄÄ 42 A (54) Н, Н(-ДИСУКЦИНИМИДИЛСУЛЬФИТ В КАЧЕСТВЕ РЕАГЕНТА ДЛЯ СИНТЕЗА Н-ОКСИСУКЦИНИМИДНЫХ ЭФИРОВ N-ЗАЩИЩЕННЫХ

ANHHOKHCPOT И ПЕПТИДОВ. (57) N,N-Дисукцинимидилсульфит формулы в качестве реагента для синтеэа

N-оксисукцинимидных эфиров й-защищенных аминокислот и пептидов °

1068428

Изобретение относится к новому соединению N,Nt-дисукцинимидилсуль-

Фиту, который может найти применение для синтеза Ноксисукцинимидных эфиров N-.защищенных аминокислот и пептидов, используемых в качестве промежуточных соединений в синтезе биологически активных пептидов.

В настоящее время широкое применение в синтезе биологически акт.явных пептидов получили N-оксисукцини- 10 мидные эфиры N-защищенных аминокислот ° При использовании этих соединений практически не наблюдается рацемизация конечных продуктов, а выделяющийся в процессе реакции по- 15 бочнцй продукт — N oêñèñóêöèíèìèä хорошо растворим в воде, что значи-. тельно облегчает выделение конечных продуктов f l ).

Известен ряд способов получения 20

N-оксисукцинимидных эфиров N-защищенных аминокислот и пептидов, среди которых наиболее широкое распро странение получил карбодиимидный метод. 25

Согла с но этому способу N-з ащи.щенную аминокислоту или пептид вводят в конденсацию с N-оксисукцинимидом в присутствии дициклогексилкарбодиимида при пониженной тем" пературе (2 3.

Однако при использовании йарбодиимидного метода довольно часто наблюдается нежелательное образование ацилмочевины, что приводит к снижению выхода целевого продукта.

Кроме того, дициклогексилкарбоциимид обладает высокой токсичностью н является сильным аллергеном.

Известен способ получения N-оксисукцинимидных эфиров и-защищенных 40 аминокислот и пептидов методом смешанных ангидридов I,3)..

Этот способ позволяет получать активированные эфиры И-защищенных аминокислот и пептидов с хорошим 45 выходом, но для его реализации используют такие легкогидролизующиеся вещества, как алкилхлорформиаты при пониженных температурах (0-20ОС), что делает способ малотехнологичным, 50 особенно в промышленных условиях.

Известен способ получения N-оксисукцинимидных эфиров Н-защищенных аминокислот и пептидов, основанный на использовании в качестве реагента для синтеза N-оксисукцинимидных эфиров N,N -дисукцинимидилкарбона

1 та (4) - (б!

К недостаткам этого способа следует отнести труднодоступность 60

N,N-дисукцинимидилкарбоната, который получают иэ высокотоксичных соединений. - трихлорметилхлорформиата или фосгена, что существенно ограничивает перспективы,получе.- 65 ния и применения N,N -дисукцинимидилкарбон та. Цель изобретения - новый реагент для синтеза N-оксисукцинимидных эфиров N-защищенных аминокислот и пептидов, который может быть получен из доступного сырья с высоким выходом.

Поставленная цель достигается

N,NLäHñóêöèíèìèäèëñóëüôèòoì формукоторый используют в качестве реагента для синтеза Н-оксисукцинимидных эфиров N-защищенных аминокислот и пептидов.

Синтез N,N-дисукцинимидилсульфита ( осуществляют путем взаимодействия триметилсилилового эфира N-оксисукцинимида с хлористым тионилом в присутствии органического растворителя

О о -о-мД+ z es-si()a

tI

О

N-Оксисукцинимидные эфиры N-защищенных аминокислот и пептидов получают путем взаимодействия 1 моль

И-защищенной аминокислоты или пептида с 1 моль N,N-дисукцинимидилсульфита в среде органического растворителя в присутствии 1 моль пиридина.

Пример 1. Получение N N-дисукцинимидилсульфита. . К охлажденному до 0 С раствору

ll,l r (0,94.моль) хлористого тионила в 30 мл диэтилового эфира прибавляют по каплям при перемешивании раствор 35,0 r (1,88 моль) триметилсилилового эфира N-оксисукцинимида в 30 мл тетрагидрофурана, поддерживая температуру реакционной смеси от 2 до +" C. Затем реакционную смесь выдерживают

30 мин при 0-5 С, выпавший осадок отфильтровывают, промывают холодным тетрагидрофураном (2 25 мл), диэтиловым эфиром (2 25 мл), сушат в вакууме.

1068428

В итоге получают 41,0 г (80%)

Н,Б-дисукцинимиднлсульфита в виде

1 булого мелкокристаллического вещества с т.пл. 134-136 С.

Элементный анализ

Найдено, Ъ: С 35,05; H 2,79;

N 10,56; S 11,41.

Вычислено,. Ъ: С 34,79; Н 2,92;

N 10,14; S 11,61.

ИК-спектр (см-"): 1785, 1720, 1230s 1090, 1050, 1010.

Пример 2 ° Получение N-оксисукцинимидного эфира N-едет-бутилоксикарбонил- .-аланина.

К раствору 1,0 г (5,29 ммоль)

N->peò -бутилоксикарбонил-i,-аланина в 5 мл ацетонитрила прибавляют

0.,42 r (5.,29 ммоль) пиридина и

1,46 г (5,29 ммэль) N,N-дисукцинимидилсульФита. Реакционную смесь перемешивают до образования раство22

ВыхОду T пл у .1 д

Соединение в В С (С,дис лсан

Литературные данные

Пример

Т. пл. 168-169 С Г21

1 Вос-ОРу-ОНЯц 84 167-168

Вос-Pro -ОБЯп 80 135-136 -55 (C=2,1) Т.пл. 135-136ОС 12 ) . jaL)2 = -55 (C=O 5) 2 в Т.пл. 112-113 (51

Вос-Яег-ONSu 82 110-111 +6,2 (C=0,6) (сЦ2О = +6,5 (C=0,5) 4 Вас-ТЬг-ОИЯИ 84 135-136 -34 (С=2,0) Т.пл. 134-136ОC (б 1 (2о «33 о

5 Вос-Туг-.ОНЯц 75 181-182 -12 о (С =1,0) Т. пл. 180-182ОС 5 g (1ео -12,5 . (С=1) Ю

55 уме, остаток растворяют в этилацетате, раствор промывают 5%-ным раствором- бикарбоната натрия, насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и ynag) ривают. В итоге получают 3,40 г (87%) N-оксисукцинимидного эАира

N-карбобензокси- -аланил-(,-аланина в виде твердого кристаллического вещества с т.пл. 155-1560С; . bL3 2 = -56 4 (C=4, диоксан). Лите- р

Пример 3. Получение N-оксисукцинимидного эфира N-карбобензок- си-(,-аланил-1.-аланина.

К раствору 2,94 г (10,0 ммоль)

И-карбобензокси-Ь-аланил-g-аланина в:10 мл ацетонитрила прибавляют

0,79 r (10,0 ммоль). пиридина и

2,76 г (10,0 ммоль) N,N-pmcyxgaamam дилсульфита. Реакционную смесь перемешивают,до образования раствора.

Через .1 ч раствор упаривают в ваку ра и оставляют на 1 ч при 22-23e:С

Затем раствор упаривают в вакууме, остаток .растворяют в этилацетате, раствор промывают 5%-ным раствором бикарбоната натрия (5 10 мл), насыщенным раствором хлористого.: натрия, сушат над сульфатом натрия и упарйвают. Остаток сушат в вакууме.

В итоге получают 1,32 г (87%) )0 N-оксисукцинимидного эфира N-трет— бутилоксикарбонил-(=-аланина с т. пл. 166-167 С; (а(2 л — -50s9 (C=2, диоксан). Литературные данные: т.пл. 1.67 С Г21 Го(I D = 51 0

15 (с 2, диоксан) (47.

По методике, описанной в примере 2, получают N-оксисукцинимидные эфиры ряда N-защищенных аминокислот. физико-химические константы полученных соединений приведены в таблице.

1068428

Составитель О.Галкин

Техред Ж.Кастелевич Корректор O,Тигор

Редактор Г.Волкова

Эаказ 11388/19 Тираж 414, Подписное.

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, X-35, Раушская наб., д. 4/5:

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ратурные данные::ЯЗ >= -62,5 "tC=4,1, диоксан 4 g s

N И фисукцннимидилсульфит Получаат с высоким выходом (80%) без допол» нительной очистки из дешевого и доступного сырья.

Использование Й,N"-дисукцинимндилсульфита в синтезе N-оксисукцинимидных эфиров"N-зашищенных аминокислот и пептидов позволяет получать целевые соединения с. выходом

75-87% без дополнительной очистки.