Питательная среда для выращивания @ @ @ -28-продуцента лизоцима
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ BACILLUS SUBTIL IS g-28 ПРОДУЦЕНТА ЛИЗОЦИМА, содержащая источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний и воду; о тличающаяся тем, что, с целью повышения лизоцимной активности , в качестве источника азота она содержит гидролизат дрожжей, в качестве источника углерода осахаренный крахмал при следующем количественном соотношении компонентов , г/л воды: Гидролизат дрожжей 60-80 , Осахаренный крахмал 20-40 Сернокислый аммоний 10-12 g
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
3©}) С 12 Р 1/04
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHOlVIV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3408795/28-13 (22) 12 ° 03.82 (46) 15.12.83. Вюл.Р 46 (72) Т.Ю. Падегимас, В.Ю. Авиженис
Г.И. Мицкуте, П.Д. Валанчюс и A Ï. Ужкуренас (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной энзимологии ,(53) 615.779.94 (088.8) (56) 1Лепзеп Н., KIeppe К. - "Furopeum QornaI Biochemistry, 1972, 26, р. 305-312.
2. Okada S., Kitakatas. — " JornaI
Fermentafive TechnoIogy", 1973, 10, р. 705-712 (прототип).
„„SU;„,1060679 А (54) (57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ BACILLUS SUBTILIS g-28—
ПРОДУЦЕНТА ЛИЗОЦИМА, содержацая источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний и воду; о тл и ч а ю.щ а я с я тем, что, с целью повышения лизоцимной активности, в качестве источника азота она содержит гидролизат дрожжей, в качестве источника углерода— осахаренный крахмал при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:
Гидролизат дрожжей 60-80, Осахаренный крахмал 20-40
Сернокислый аммоний 10-12
1060679
Повышение активности, l
Лизоцимйая актив- ность в культуральной жидкости, ед./мл
Среда
100
159 известная
Предлагаемая
113
190
Составитель Г. Смирнова
Рецактор H. Киштулинец Техред Т.Фанта Корректор О. Била
Тираж 523 Подписное
ВНИИПП Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035,. Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Заказ 9971/28 г
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород; ул. Проектная, 4
Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к получению лизоцима.
Известна питательная среда для выращивания продуцента лизоцима
Escherichia coIi, содержащая бактопептон, минеральные соли, глюкозу и казаминовые кислоты 1 .
Известна также питательная среда для выращивания BaciIIus subtiIis д-28-продуцента лизоцима,содержащая источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний и водуГ2 7.
Однако известные среды не обеспечивают высокой лизоцимной активности °
Цель изобретения — повышение лизоцимной активности.
Поставленная цель достигается тем, что в питательной среде для выращивания BaciIEus subtiIis g-28-про дуцента лизоцима, содержащей источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний и воду, в качестве источника азота она содержит гидролизат дрожжей, В качестве источника углерода — осахаренный крахмал при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:
Гидролизат дрожжей 60-80
Осахаренный крахмал 20-40
Сернокислый аммоний 10-12
Среду готовят следующим образом.
Пример 1. Крахмал осахаривают при помощи бактериальной 6L --амилазы до образования эритродекстри. нов ° После этого доводя рН до
4,7-5,0 с помощью ортофосфорной кислоты, поднимают температуру до
60 С и добавляют глюкоамилазу из расчета 4-5 ед. активности на 1 г крахмала. Осахаривание проводят в течение б ч. Получают 0,9 r. глюкозы из 1 r сухих веществ суспензии крахмала.
Другие компоненты питательной среды растворяют в воде, объединяют с осахаренным крахмалом, общий
1О объем доводят водой до 1000 мл.устанавливают рН 6,8-, 7,2 с помощью
Na0H. Среду разливают по 100 мл в . колбы емкостью 750 мл и стеризизуют 20 мин при 120 С.
15 Пример 2. Для выращивания продуцента используют питательную среду при следующем соотношении компонентов (орС), г/л воды:
Гидролизат дрожжей 60
Осахаренный крахмал 20
Сернокислый .аммоний 10
Стерильную питательную среду засевают культурой BaciIIus subtiIis
g-28, выращенной на ломтиках картофеля. Культивирование проводят на качалках (90 качаний/мин) при 30 С.
Лиэоцимная активность 181 ед/мл куль туральной жидкости.
Сравнительные данные по-лизоцимной активности приведены в таблице (в биолафитах).
Использование питательной среды позволяет повысить лизоцимную активность на ЗЪ и удешевить среду (годовой экономический эффект составляет 100-120 тыс.руб). !
