Способ определения количества уробилинов в моче
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик!
11998952
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-вуР М.g> 3
G 0l N 33/48 (22) Заявлено 090180 (21) 2866173/28-13 с присоединением заявки ¹â€” (23) ПриоритетГосударственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий
Опубликовано 2302.83. Бюллетень Мо 7
Дата опубликования описания 230283 (53) УДК 616. 633. 937 (088.8) ) . -..
В.A.Ëþëüåâà
1 «")
Всесоюзный научно-исследователь кий жйДурруу
Ы! "" хозяйстве "«=ю:1,л (72) Автор изобретения (7! ) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА
УРОБИЛИНОВ В МОЧЕ че(1 ).
Недостатком известного устройства является то, что реактив Эрли са, . 2p ввиду наличия в нем соляной кислоты, способен вступать в реакцию не только с уробилином, но и с другими компонентами мочи, и образовывать с последними хромоген розового цвета, аналогичной хромогену, образующемуся за счет реакции с уробилином. Образование неспецифического хромогена обуславливает завышение получаемых величин, ввиду чего спо"об является неточным
Изобретение относится к биохимии, а именно анализу материалов химическими способами.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ определения количества уробилинов в моче, включающий смешивание мочи с реактивом Эрлиха, который представляет со- 0 бой раствор и-диметиламинобензальдегида (n-ДМАБА) в 20Ъ-ном растворе соляной кислоты, спектрофотометрическое определение интенсивности окраски образующего хромогена, по которой судят о количестве уробилинов в моЦель изобретения — поэышение точности определения.
Поставленная цель до"тигается тем, что согласно способу определения количества уробилинов в моче,включающему добавление к пробе раствора и-диметиламинобензальдегида (и-ДИАБА) с последующей спектрофотометрией полученного окрашенного комплекса, (и-диметиламинобензальдегид растворяют в этиловом спирте.
Пример . К 1 мл мочи приливают 0,1 мл 2%-ного раствора п-диметиламинобензальдегида в этиловом спирте, смешивают и через 10-15 мин после возникновения розового хромогена измеряют оптическую плотность окраски с помощью спектрофотометра СФ-44 на волне 355 нм. Количество уробилинов рассчитывают по калибровочному графику.
Калибровочный график строят следующим образом.
После трехкратной очистки фракции уробилиновых тел, полученной иэ мочи больного инфекционным гепатитом, на колонке из сефадекса G-25,йine получают кристаллы уробилиновых тел лиофилизации маточного раствора. Из кристаллов готовят основной 100.мгЪ водный раствор: 10,0 мг кристаллов
998952
Формула изобретения
Составитель Ю.Разаренова
Редактор С. Патрушева Техред A.Áàáèíåö Корректор Е.Рошко
Заказ 1146/67 Тираж 871
ВНИИПИ Государственного, комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Подписное
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 растворяют в 10 0 мл воды при комнат ной температуре. После этого в ряд пробирок вносят по 0,1-0,2-0,3 мл основного раствора и доводят в каждой пробирке объем водой до 1,0 мл.
Получают рабочие растворы с содержанием в каждой пробирке 100,0-200,0-.
300.>0 мкг уробилиновых тел. В каждую пробирку, содержащую 1,0 мл рабочего раствора, добавляют 0,1 мл 2%-ного раствора и-ДМАБА в этиловом спирте.
Интенсивность поглощения образующегося хромогена розового цвета измеряют с помощью спектрофотометра СФ-44 на волне 355 нм против контроля, в котором вместо раствора уробилинов взя- та вода.
В результате замены растворителясоляной кислоты на этиловый спирт— исключается образование неспецифического розового хромогена . Раство- 20 рение и-ДМАБА в этиловом спирте обеспечивает образование розового хромогена за счет реакции и-ДМАБА только с уробилинами, что ведет к повышению точности способа.
Способ определения количества уробилинов в моче,. включающий добавление к пробе раствора п-диметиламинобейзальдегида с последующей спектрофотометрией полученного окрашенного . комплекса, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения,п-диметиламинобензальдегид растворяют в этиловом спирте.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Справочник по функциональной диагностике. М., Медицина, 1970, с. 648.