Способ получения сложных эфиров полимерных спиртов

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

<>979369 (61) Дополнительное к авт. сеид-ву— (22) Заявлено 060481 (21) 3269606/23-05 с присоединением заявки ¹(23) Приоритет—

Опубликовано 07Л 282 Бюллетень ¹4 5

Дата опубликования описания 101282

{51) М Кл з

С 08 1 8/14

Государственный комитет

СССР по делам изобретений н открытнй

)53) УДК678.028 (088 ° 81 (72) Автор.. изобретения

В ° ф. Позднев (71) Заявитель

Институт биологической и медицинской химии АМН СССР (5 4 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛОЖНЫХ ЭФИРОВ ПОЛ ИМЕР НЫХ

СПИРТОВ

Изобретение относится к химии по лимеров, а именно к способу получения сложных эфиров полимерных спиртов, которые применяют в качестве промежуточных продуктов в пептидном синтезе.

Известен способ получения сложных эфиров полимерных спиртов путем вза имодействия карбоновых кислот с полимерными спиртами в присутствии кон- денсирующего агента, в качестве которого используют дициклогексилкарбодиимид. Реакцию проводят при 20 С в течение 168 ч. В качестве полимерных спиртов используют оксиметилированный сопдлимер стирола с дивинилбензолом и полиэтиленгликоли (1).

Недостатком этого способа является длительность процесса и невысокий вьюсод конечного продукта. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемым результатам является способ получения сложных эфиров полимерных спиртов путем взаимодействия карбоновых кислот с полимерными спиртами в среде 25 безводного апротонного растворителя в присутствии конденсирующего агента.

В качестве конденсирующего агента используют карбонилдиимидазол. Реакцию проводят при 20 С в течение 40 ч 30

Н качестве полимерного спирта используют сефадекс 1Л-20 (2).

Недостатками этого способа являются длительность процесса н низкий выход конечного продукта, величина которого составляет 20-304.

Белью изобретения является ускорение процесса и увеличение выхода конечного продукта.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения сложных эфиров полимерных спиртов путем взаимодействия карбоновых кислот с полимерными спиртами в среде безводного апротонного растворителя в присутствии конденсирующего агента в качестве конденсирукхцего агента используют ди-трет.-бутилпирокарбонат и взаимодействие проводят в присутствии третичного амина.

Реакцию проводят при комнатной температуре в течение 16-20 ч при перемешивании. Ди"тре -бутнлпирокарбонат (Boc О) используют в количестве 1,5-2 моля на 1 моль реагирующих веществ. При этерификацни первичных гидроксильных групп в качестве третичного амина используют пириднн, а для этерификации вторичных гидроксильных групп 4-диметн.иа11нноиири979369 дин. В качестве полимерных спиртов используют оксиметилированный сополимер стирола с дивинилбензолом, полиэтиленгликоль, сефадекс, сшитые сополимеры оксиэтилметакрИлата — сфероны. В качестве карбоновых кислот используют любые карбоновые кислоты, в т.ч. N-защищенные аминокислоты.

Пример 1. К суспензии 9 r сополимера стирола с 1Ъ дивинилбензола, содержащего 1м-экв.оксиметильных групп на 1 r геля, в 30 мл бензола добавляют раствор 10 мМ Вос-Lфенилаланина в 20 мл ацетонитрила, 3 мл Вос10 и 1 мл пиридина. Суспензию перемешивают 3 ч и оставляют на 16 ч при комнатной температуре (" 17 С). Затем добавляют-0,5 мл

Вос„О и перемешивают еще 6 ч, полимер промывают этилацетатом (3 раза по 20 мл ), эфиром и высушивают.

Пробу смолы гидролизуют в смеси концентрированной соляной и пропионовой кислот (1 1,16 ч 110 С ) и н гидролизате определяют содержание фенилаланина реакцией с нингидрином.

Находят 0,53 мМ фенилаланина на 1 г полимера. Выход 47,7%, 9,5 г синтезированного Doc-L — фенилаланин-поли мера промывают смесью хлороформа с уксусной кислотой, 30 мл 1N раство- Çp ра соляной кислоты в уксусной кислоте, смешивают с 30 мл 1 М соляной кислоты в уксусной кислоте и смесь перемешивают 1 ч. Полимер отфильтровывают, промывают уксусной кислотой, 35 хлороформом, 10%-ным раствором триэтиламина в хлороформе (днажды по

25 мл), хлороформом, смешивают с 3 г Boc-D-фелилаланина в 30 мл хлористого метилена, добавляют раст-„ gp вор 2 г дициклогексилкарбодиимида в 5 мл хлористого метилена и смесь перемешивают 3 ч. Полимер отфильтровывают, промывают хлористым метиленом, хлороформом, спиртом (трижды по 25 мл45 и эфиром и высушивают.

2 г пептидилополимера(1 мИ пепти а) суспендируют в 10.мл метилоного спирта, добавляют 0,4 мл триэтиламина и смесь перемешивают 16 ч. Полимер отфильтровывают, промывают метанолом, фильтрат упаривают и в остатке получают неочищенный кристаллический метиловый эфир Boc-D-фенилаланин-t -феилаланина(0,5 r). Сырой продукт раст оряют в этилацетате, промывают водой 1ИК СО водой,10%-ной лимонной кис. лотой, водой, раствором NaC1 и нысушивают Иа $04 . Этилацетат упаривают в вакууме, кристаллический остаток растирают в смеси эфира с петролейным эфиром, отфильровывают, промыва- ют гексаном, высушивают и получают

0,35 r 0,82 мМ метнлового эфира

Вос-D-фенилаланил-Ь-фенилаланина. 65

Пример 2. 7,5 г полиэтилен гликоля (ПЭГ) с молекулярной массой

3000 (5 r-экв гидроксильных групп ) растворяют в 30 мл теплого диметилформамида (ДМФЛ) и часть растворителя (10 мл) отгоняют в вакууме при

40 С. К остатку, охлажденному до

15 С, добавляют раствор 2,5 r (8,2 мМ)

Вос-D-триптофана в 10 мп ДМФА, 0,4 мл пиридина и 2,5 мл Вос О и смесь перемешивают до прекращения выделения газа 48 ч) Затем большую часть растворителя отгоняют в вакууме при 40, вязкий остаток растирают в 75 мл эфира, смесь выдерживают в холодильнике до полной кристаллизации осадка, кристаллическую массу отфильтровывают, многократно промывают эфиром и высушивают. Получают 8,0 r полимера с содержанием триптофана 0,5 мМ/г.

Выход 45,7Ъ.

Пример 3, 10 г сефадекса

)Н-20 промывают на фильтре изопропиловым спиртом, хлороформом, бензолом, эфиром и высушивают.

Раствор 2,5 г (10мМ) гидрата Nтрет;бутилоксикарбонил-li-лейцина в

30 мл этилацетата высушивают Мд$04 и упаривают в вакууме.. Остаток растворяют в 20 мл бензола и смешивают с 10 г промытого сефадекса. К смеси добавляют 3,0 мл (13мМ) Вос О; 0,8 м пиридина и 50 мг 4-диметилайинопиридина и умеренно встряхивают 5 ч. Добавляют 10 мл бензола и встряхивают еще 16 ч. Затем полимер отфильтровывают, промывают бензолом и эфиром (трижды по 20 мл) и высушивают в вакууме. Навеску сухого геля (50мг) выдерживают в 3 мл 1М раствора толуолсульфокислоты н уксусной кислоте

1,5 ч, гель отфильтровывают, промывают спиртом, хлороформом, 10%-ным раствором триэтиламина в хлороформе, хлороформом, 5%-ным раствором пикриновой кислоты в смеси хлороформа с диоксаном (1:1), отмывают избыток пикриновой кислоты спиртом, пикрат разрушают раствором триэтиламина и спектрофотометрически определяют содержание пикриновой кислоты н фильтрате, которое соответствует содержанию аминокислоты на Полимере. Находят содержание лейцина 0,6 мМ на грамм полимера. Выход 60%.

Пример 4. К суспензии 5 г сферона Р«300 н 10 мл бенэола добавляют 0,6 г (2,6мМ) Вос-g-аминокапроионой кислоты, 0,3 мл пиридина и

0,7 мл Вос О и смесь встряхивают 3 ч„ добавляют еще 0,4 мл Вос О и встрякивают 5 ч. Полимер отделяют, промывают бензолом, спиртом, эфиром и нысушивают. Получают 5,6 г Вос-Е-амино-, капроил-сферона с содержанием аминокислоты 0,3 мМ/г. Выход 57,7%

979369 конечного продукта, в качестве конденсирующего агента используют дитрет-бутилпирокарбонат и взаимодействие проводят в присутствии третичного амина.

Формула изобретения

Способ получения сложных эфиРов полимерных спиртов путем взаимодействия карбоновых кислот с полимерными спиртами в среде безводного апротонного растворителя в присутствии конденсирукщего агента, о т л и ч а юц и и с я тем, что, с целью ускорения процесса и увеличения выхода t5

Составитель Л. Валуев

Редактор М. Петрова Техред IA.A÷ Корректор В. Прохненко

Заказ 9271/2 Тираж 514

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Xl-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, Таким образом, изобретение позволяет ускорить процесс получения сложных эфиров полимерных спиртов и увеличить выход конечного продукта.

Источники информации принятые во внимание при экспертизе

1. Патент ФРГ 9 2360794, кл. С 07 С 103/52, опублик. 1973.

2. Билибин A.D., Власов Г.П. Получение аминоацетил-сефадексов и использование п-толуолсульфокислоты для определения их емкостей. ")журнал обцей химии", 1973, т.43, Р 8,Ic.1844 (прототип) .