Способ получения липидного экстракта из биологического материала

ОП ИСАНИ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскин

Социалистические

Республик

1940068 (6I ) Дополнительное к авт. свил-ву— (22) Заявлено 04. 07. 80 (21) 2950708/28-13

l ) M. Кл.

С 01 Н 33/48 с присоединением заявки РЙ—

9куднрстеевй квмнтет

СССР (23) Приоритет—

) УД 616-07 (088.8) нв аеиеи нэобретеннн н открытнй

Опубликовано 30 ° 06 ° 82 ° Бюллетень №

Дата опубликования описания 30.06.8

А. Ф. Блюгер, Б. P. Гедулина, В. А. С уголь, Л. А. Максимова и Н. А. Ноздрунова (72) Авторы изобретения

Рижский медицинский институт (7I ) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПИДНОГО ЭКСТРАКТА

ИЗ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

Изобретение относится к медицине, в частности к биологической химии, и может быть использовано для диагностики заболеваний печени.

Известен способ получения липидного экстракта из биологического материала путем гомогенизации и экстракции ткани в смеси органических растворителей (1 ).

Выход липидов, полученных. известным способом, составляет 65-75 что не позволяет получить липидный экстракт из микроколичеств материала(0,1-0,001 г и 0,1-0,001 мл).

Цель изобретения — получение липидного экстракта из микроколичеств материала.

Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа получения липидного экстракта из биологического материала путем гомогенизации и экстракции ткани в смеси органических растворителей проводят гомогенизацию и экстракцию трихлорэтаном и этанолом, инкубируют с сь при 50-60 С в течение

15-20 мин.

Способ осуществляют следующим образом.

П р и и е р.К сыворотке крови объемом в пределах от 0,001 до 0,1 мл прибавляют 3 мл смеси 96 -ного этанолФтрихлорэтан в соотношении 1:l. Биоптат ткани печени весом в пределах 0,001 и 0,1 г (заранее взвешенный на аналитических весах ) помещают в стеклянный гомогенизатор, приливают

0,5 мл смеси 96 -ного этанол+трихо лорэтан в соотношении 1:1, гомогенизируют, добавляют к полученному гомогенату 2,5 мл той we смеси. Далее все этапы экстракции соответствуют экстракции из сыворотки крови.

20 Смесь инкубируют в течение 15-20 иин при 55 С..Экстракицию можно проводить при 50-60 С. При снижении ниже 50 С уменьшается выход липидов,при выше 60 С происходит разрушени липидов. П сл, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Кейтс М., Техника липидологии, М,, "Мир", 1975, с. 74-75.

Составитель P. Катосова

Редактор С. Юско Техрвд М.Гергель Корректор Л. Бокшан

Заказ 4659/66 Тираж 887 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, W-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 940068 4 инкубации смесь встряхивают в тече- Формула изобретения ние 1 мин и фильтруют. В качестве фильтра можно использовать быстро- Способ получения липидного экстфильтрующие бумажные фильтры. Фильтр ракта из биологического материала промывают 1 мл смеси 96» -ного эта- > путем гомогенизации и экстракции нол+трихлорэтан. К полученному раст- ткани в смеси органических растворивору добавляют 0,6 мл дистиллирован- телей, о т л и ч à ю шийся тем, ной воды. Смесь встряхивают и остав- что, с целью получения липидного ляют на 20-30 мин до получения проз- экстракта из микроколичеств матерачного раствора, состоящего из двух >в риала, проводят гомогенизацию и фаз. Верхнюю фазу удаляют, нижняя экстракцию трихлорэтаном и этанофаза содержит липидный очищенный лом, инкубируют смеь при 50-60 С экстракт. в:течение 15-20 мин

Предлагаемый способ позволяет получить липидный экстракт из микроколичеств биологического материала с SblcoKHM выходом 192,8Ô):хорошо очищенных нейтральных и кислых липидов,