Среда для разбавления и замораживания спермы быков

 

Союз Соввтскик

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свил-ву— (22)Заявлено 070579 (21) 2770451/30-15 с присоединением заявки,рв.— (23) Приоритет (51)N. Кл.

А 61 0 7/02

3Ьеударствеиый комитет

СССР ио делаи изобретений и открытий

Опубликовано 150432 Бюллетень Лй 14 (53) Щ3(636. 082в .453.5(088.о) Дата опубликования описанкя 1504о2 (72) Автор изобретения

В.М. Зорин

Украинский науино-исследовательский институт разведения и искусственного осеменения крупного рогатого скота

1 (7I) Заявитель (54) СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И ЗАМОРАЖИВАНИЯ

СПЕРМЫ БЫКОВ

0,2-0,26

3,0-4,2

0,1-.0,22

0,1-0, 14

Изобретение относится к рецептуре сред для разбавления и замораживания спермы быков и может быть использовано в сельском хозяйстве на станциях искусственного осеменения животных.

В связи с массовым искусственным осеменением животных существует необходимость в длительном хранении спермы. Для этого сперму разбавляют в специальных средах и заморажи"

10 вают в виде гранул, в облицованных гранулах или в соломинках. Форма замораживания определяется свойствами среды. Перед употреблением сперму размораживают. Качество разморо1$ женной спермы оценивают по ее оплодотворяющей способности, определяю" щейся активностью спермы (балл) и ее выживаемостью (ч) и зависит прежде всего от свойств среды, выбранной для разбавления и замораживания.

В связи с этим необходимо разрабаты" вать новые и совершенствовать извест. ные составы сред, позволяющие хранить сперму длительное время с сохранением ее качества.

Известна среда для разбавления и замораживания спермы быков включающая, вес.3:

Центрифугат водной суспензии куриного желтка 15 0-16,0

Цитрат натрия 1,78- 1,88

Аминазин (2,53"ный водный раствор)

Глюкоза

Трилон Б

Гликокол

Двузамещенный .Фосфат натрия 0,02-0,08

Глицерин 4 5 4,6

Дистиллированная вода Остальное

Среда для разбавления замораживания спермы быков представляет собой прозрачный коллоидный раствор

3 91 с рН 6,9-7,2 и осмотрическим давлением, равным 7,0 атм. Среда позволяет определить качество спермы сразу после разбавления и пригодна для разбавления в соотношении от 1:1 до 1:3. Такое разбавление позволяет оплодотворить в год около 1000 коров спермой одного быка. Срок хранения среды около двух лет.

Однако среда не пригодна для значительного разбавления, так как может нарушить протекающие в сперме ферментативные процессы. Вместе с тем разбавленная сперма, содержащая

30 млн., ед. в спермодозе, характеризуется оплодотворяющей способностью около 6А. Кроме того, сперма, разбавленная известной средой, пригодна для замораживания только в виде гранул.

Целью изобретения является повышение оплодотворяющей способности спермы быков после размораживания.

Поставленная цель достигается тем, что среда для разбавления и замораживания спермы быков дополнитель. но содержит лимонную кислоту при следующем соотношении компонентов, вес.3:

Центрифугат водной суспензии куриного желтка

Цитрат натрия

9675

Аминазин (2,5i-ный водный раствор)

Глюкоза

Трилон Б

Гли кокол

Дву за меще нный фосфат натрия

Глиц ери н

Лимонная кислота

Дистиллированная вода

0,08-0,24

3,00-4,20

0,06-0,22 о,o8-о,14

0,02-0,08

5,00-8,00

0,002"0,004

15,0"16,0

1,-72-1,85

Таблица 1

Компоненты

Гост ТУ

Центрифугат водной суспенэии куриного желтка

15,0 16,0 16,0

15 o 15 5

5- 13-14 1,75 1,72 1,80 1,80 1,85

Цитрат натрия

Ами наэи н (2,54-ный водный раствор) 0,10

Глюкоза

6038-74

30652-73

5860-75

4,00

0,006 0,21 0,08 0,10 0,22

Трилон Б

0i10

Гликокол о,08 0,08

5,00 8,00 о,оа о,о6 о,о4

6,00 е 7,00 б,вО

6259-75

Глицерин

Двузамещейный фосфат натрия 4172-66

Остальное до 1004

1 Предлагаемая среда представляет собой прозрачный коллоидный раствор с рН 6,2-6,65 с осмотическим давлением, равным 1О- 12 атм. Среда позволяет разбавить сперму быков в соотношении от 1:1 до 1:128 раз. Такое разбавление позволяет оплодотворить спермой одного быка около 5-6 тыс. коров в год. Кроме того, среда позволяет заморозить сперму быков у в виде гранул, в облицованных гранулах и соломинках.

Срок хранения предлагаемой среды

5 лет при 2-45 L .

Приготовление среды для разбавлезв ния и замораживания спермы проводят в соответствии с рабочими рецепту рами, примеры которых представлены в табл. 1.

0,06 0,22 0,20 0,24

4)50 4 10 3 00 4 20

0,08 0,12 0,14 0,14

919675

Продолжение табли ы 1 ц .а й

Содержание, вес.3

1 (1

I ОСТ ТУ

Компоненты

0,002 0,002 0,003 0,0035 0,004

Вода дистиллированная до .100 до 100 до 100 до 100 до 100

ll р и и е р. 1. Среду для разбавления и замораживания спермы готовят следующим образом.

В колбу наливают 75 мл кипяченой дистиллированной воды при 40-50 С и прибавляют 20-25 мл свежеотделенных куриных желтков. Смесь взбалты. вают до гомогенного состояния, отстаивают 10 мин и центрифугируют

3 мин при 500 об/мин. Полученный центрифугат сливают, отбирают из него аликтовую часть и прибавляют к ней остальные компоненты. При необходимости в состав среды вводят антибиотики.. Объем смеси доводят до 100 мп дистиллированной водой.

Полученную среду для разбавления и замораживания стерилиэуют по методу тиндализации при 60 С в течение

1 ч. После этого среда пригодна дпя разбавления спермы и замораживания ег в виде гранул,, в облицо ванных гранулах и соломинках.

Пример 2. Сперму быков разбавляют при 35-38 С в предлагаемой среде, приготовленной по рецепту 1 (табл. 1). Разбавление проводят в различных соотношениях от 1:l до

1:128 в зависимости от исходной ако

Таблица 2

Разбавление

8 16

Показатели качества

-а4,45 4,50 4,50

4,45

4,50

Выживаемость спермы, ч при 38 С

10,3 9,1

9,1

10,0

9,2

9,5

9,3

Лимонная кислота 6-09-584-75

Активность спермы, балл 4,35 4,45

1 2 3 " 5 тивности и концентрации спермы. tloлученный раствор выдерживают в холо-. дильнике при 25 С в течение ч-8 ч для зквилибрации. Затем разбавлен-. ную сперму замораживают жидким азотом по общепринятой методике в гранулах, облицованных гранулах и соломинках.

Замороженную сперму хранят

30 дней в среде жидкого азота в сосу" де Дюара.

По истечении этого времени сперму, .замороженную в виде гранул, раэмораживают в среде, содержащей, г: пятиводный цитрат натрия 1,75-1,85, глюкоза 4-6 и трилон Б 0,06-0,15 на 100 мл дистиллированной воды, при 38 С. Сперму, замороженную в соО поминках или облицованных гранулах, размораживают без разбавителя. Затем по стандартной методике определяют

3S активность и выдерживаемость спермы.

В табл. 2 представлены результаты определения этих величин для размороженной спермы, полученной or

10 быков, разбавленной в различном соотношении и замораживаемой в виде гранул.

7 919675

Из табл. 2 следует, что разбавление спермы даже в 128 раз не вызывает снижения ее активности и выживаемости.

15,0-16,0

1,72-1,85

0,08-0,24

3,00-4,20

0,06-0,22

0,08-0, 14

Формула изобретения

0,02-,0,08

5)00-8,00

0,002-0,004

Остальное до 1004

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

20 1. Авторское свидетельство СССР

У 536824, кл. А 61 D 7/02, Составитель Т. Тулякова

Техред И. Гайду Корректор Л. Бокшан

Редактор Т. Веселова

Тираж 717 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, И-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 2205/4 филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, Среда для разбавления и замора! живания спермы быков, включающая центрифугат водной суспензии куриного желтка, цитрат натрия, аминазин, глюкозу, трилон Б, гликокол, глицерин, двузамещенный фосфат натрия и дистиллированную воду, о т л и оч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения оплодотворяющей способности спермы, среда дополнительно содержит лимонную кислоту при следующем соотношении компонентов, вес.Ф:

Центрифугат водной суспензии куриного, желтка .

Цитрат натрия

Аминазина 2,5i-ный водный раствор

Глюкоза

Трилон Б

Гликокол

Двузамещенный фосфат натрия

Глицерин

Лимонная кислота .

Вода дистиллированная