Способ определения жизнеспособности яиц насекомых
Союз Советских
Сюциапистических
Республик
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИ ИТИЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 080780 (23) 2954558/30-15 (51) + с присоединением заявки Ио—
A 01 К 67/00 (23) ПриоритетГосударственный комитет
СССР но делам изобретений и открытий (53) УДК 638 262 2 (088. 8) Опубликовано 30.11.81.Бюллетень 89 44
Дата опубликования описания 301181 (72) Автор изобретения.И.М.Нагорная (71) Заявитель
Институт зоологии AH Украинской CCP (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ
ЯИЦ НАСЕКОМЫХ
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности, к защите растений, и может быть использовано при определении овицидного действия различных агентов в токсикологической практике, например при выборе доз пестицидов.
Известен способ определения смертности яиц насекомых, состоящий в том, что яйца инкубируют в строго определенных условиях температуры и влажности, характерных для данного вида насекоьих. После завершения инкубации подсчитывают число отродившихся личинок и вычисляют процент оживления яиц от общего числа их, заложенного на инкубацию (1).
Недостатком известного способа является большая продолжительность определения смертности яиц, а также необходимость поддержания определенных условий температуры и влажности в течение всего периода инкубации.
Длительность периода инкубации небдинакова для кажцого конкретного вида насекомых и достигает 10-30 дн.
Кроме того, специфика развития эмбриона в яйце требует нередко обязательного прохождения холодного периода (длительностьЬ 1,5-,2 мес), предшествующего инкубации яиц для выхода личинок.
Цель изобретения — сокращение срока и повышение точности определения жизнеспособности яиц насекомых.
Поставленная цель достигается тем, что яйца раздавливают и инкубируют в течение 30-60 мин, затем при
20-30 С в суспензии крахмала на них воздействуют раствором иода в йодис-, том калии и по желтой окраске определяют наличие живых яиц.
П р .и м е р. Готовят 0,1%-ную суспензию крахмала на О, 9%-ном раст1з воре хлорида натрия и доводят до кипения при постоянном помешивании.
Готовят 0,3%-ный раствор металлического йода на 3%-ном растворе йодистого калия. В чашке Петри или на часовом стекле раздавливают яйцо насе- комого так, чтобы не утратить его содержимого, затем наносят на него
0,03 мл суспензии крахмала. Чашку (или стекло) накрывают крышкой и инкубируют при 25оС 30 мин., После инкубации добавляют в смесь
0,01 мл раствора йода в йодистом калии (перед этим основной раствор йода разводят водой в соотношении
30 1:3 объема). В течение 1-2 мин в ин884644
Та блиц а 1
Объект
Длительность воздействия, ч
Определение смертности после воздействия через
Окраска в опыте
Окраска в контроле
Прогрев при 80 С
Одиночные яйца непарного шелкопряда
15 мин фиолетовосиняя желтая
1 ч
J фиолетовосиняя желтая
Пары хлороформа
15 мин
15 мин желт ая желтая фиолетовосиняя
30 желтая
Прогрев при 80 С
По 5 яиц .червеца
Комстока фиолетовосиняя желтая
Пары хлороформа
15 мин фиолетовосиняя
30 желтая кубационной смеси развивается окраска. При наличии живого яйца смесь приобретает желтую окраску, тогда . как смесь, содержащая мертвое яйцо, окрашивается в фиолетово-синий цвет, Способ освован на изменении окраски среды, в которой инкубируются яйца, обусловленной деятельностью амилазы. Амилаза живых яиц гидролизует крахмал среды, после чего добавление раствора йода в йодистом калии вызывает образование желтой окраски. В погибших яйцах деятельность амилаэы прекращается, крахмал не подвергается.гидролиэу, поэтому после добавления йода образуется фиолетово-синяя окраска среды.
Результаты определения жизнеспособ.ности представлены в табл. 1.
Кроме того, проводят испытания способа определения жизнеспособности яиц после фумигации их бромистым ме- тилом и смесью его с углекислотой.
Фумигации подвергают зимующие яйца червеца Комстока, расположенные под корой деревьев, в почве прикорневой зоны, а также в плодах граната. Контролем служат нефумигированные яйца червеца, взятые из указанных образцов до фумигации. РезУльтаты определения представлены в табл. 2
Из данных таблицы видно, .что яйца червеца, расположенные в почве, не погибают при действии доз в 200 и
300 ч/r, а погибают лишь при дозе в
3867 ч/г, тогда как менее защищенные от действия фумиганта (на коре и в плодах), погибают даже при дозе в
200 ч/r.
Одиночные яйца непарного шелкопряда и червеца Комстока прогревают 3 ч во влажной камере при 80 С или выдерживают 24, 30 ч в парах хлороформа для умерщвления. яйца раздавливают по одному или группой, затем помеща20 ют на агар и инкубируют 3 ч при 20 С.
Результаты испытаний представлены в табл. 3.
884644 Габлица 2
Яйца червеца
Комст ока в почве желтая фиолетово-синяя фиолетово-синяя на коре в плодах контроль желтая
"- проиэведение средней концентрации на время экспоэиции.
Таблица 3 ъект
100 С
T-=80
14х15
14х13
14х14
14х15
15 мин
20 мин
12х12
11х12
13х13
12х13
15 мин
20 мин
1,5х2
1 ч
3 ч
2 ч
2х2
2х2
3 ч
2х1 5
1,5х1,5
24 ч . 15 мин 1,5х2
30 ч 15 мин 1,5х1,5
1,2х1,5
15 мин 2х2
По 5 яиц 24 ч червеца
Комстока
Яйца тутового шелкопряда (гомогенат ) Яйца червеца
Комсто к а (гомогенат) Одиночные яйца непарного шелкопряда длительость оэдейтвия желтая фиолетово-синяя фиолетово-синяя желтая аметр эоны осветления, мм фиолетово-синяя фиолетово-синяя фиолетово-синяя желтая.
1,5х1 5
1,2х1,2
1,5х1,5
884644
Формула изобретения
Составитель В.Косовец
Редактор Н.шешеля Техред С.Мигунова Корректор С.@оман
Заказ 10304/3 Тираж 703 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Способ определения жизнеспособности яиц насекомых, включающий инкубациюяиц, отличающийся .тем, что, с целью сокращения срока и повыаения точности определения, яйца раздавливают и инкубируют при
20-30 С в суспензии крахмала в течение 30-60 мин, затем на них воздейст.вуют раствором йода в йодистом калии и по желтой окраске определяют наличие живых яиц. источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Михайлов Е.Н. Грена. Ташкен1, 1953, с. 11-112.
