Способ получения липидов

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПИДОВ,, предусматривающий культивирование дрожжей.на питательной среде, содержащей источники азота, фосфора,.минеральные ооли и смесь углеводородов, включающую н-алканы в качестве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим . выделением липидов заданного состава, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода отдельных липидных фракций, в процессе культивирования изменяют соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода, при этом для получения липидной фракции, обогащенной фосфолипидами и жирными кислотами или глицеридами и стеринами, соотнсмиение составляет 1:10 - 1:60 или 1:0,5-1:12,5 соответственно.§

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) 5 А

3151) С 12 P 7 64

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 2739138/28-13 (22) 22.03.79 (46) 07.08;83. Бюл. Р 29" (72) Л.И. Козлова, P.В. Катруш, Е.С. Алентьева, О.И. Великославинская и И.И. Бахметьева (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ и Нефтехимический комбинат, г. 1Нведт (ГДР) (53) 663.143(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР

Р 270663, кл. С 12 )) 13/00, 1969. (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПИДОВ,, предусматривающий культивирование дрожжей.на питательной среде, содержащей источники азота, фосфора, минеральные соли и смесь углеводородов, включающую н-алканы в качестве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим . выделением липидов заданного состава, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода отдельных липидных фракций, в процессе культивирования изменяют соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода, при этом для полу" чения липидной фракции, обогащенной . фосфолипидами и жирными кислотами или глицеридами и стеринами, cooT" ношение составляет 1:10 - 1:60 или

1:0,5-1:12,5 соответственно.

839258

50

Способ осуществляют следующим образом.

Дрожжи культивируют при аэрации на питательной среде, содержащей источники азота, фосфора, калия и маг- 55 ния в количествах, оптимальных для активного роста микроорганизма продуцента. В качестве источника углерода используют нефтяные дистилляты. При этом подачу воздуха регулируют в зависимости от концентрации в среде нефтяного дистиллята и содержания в нем н-алканов таким образом„ чтобы соблюдалось соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода. Ферментацию ведут при 65

Изобретение относится к микро-, биологической промышленности, а именно к способу получения липидов путем выращивания дрожжей на углеводородсодержащих средах.

Известен способ получения липидов, предусматривающий культивирование дрожжей на питательной среде, содержащей источники азота, фосфора, минеральные соли н смесь углеводородов, включающую н-алканы в . 10 качестве источника углерода, в усло. виях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим выделением липидов заданного состава (Ц . Согласно известному >5 способу, изменяя в питательной среде. соотношение С:И, C:Р 0>, концентрацию источника углерода и скорость потока среды, получают липиды, в составе которых в зависимости от заданного соотношения источников питания преобладают либо триглицериды и свободные жирные кислоты, либо фосфолипиды.

Недостатком способа является невысокий выход биомассы и отдельных липидных фракций.

Цель изобретения — увеличение выхода биомассы и отдельных липидных фракций.

Цель достигается тем, что при 30 осуществлении способа получения липидов, предусматривающего культивирование дрожжей на питательной сре де, содержащей источники азота, фосфора, минеральные соли и смесь угле- 35 водородов, включающую н-алканы в качестве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим выделением липидов заданного состава, в процессе культивирования изменяют соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода, при этом для получения липидной фракции, обогащенной фосфолипидами и жирными кислотами или глицеридами и стеринами, соотношение составляет

1:10 — 1:60 или 1:0,5 — 1:12,5 соответственно.

28,$

2,6

25,0

2,3 темпеРатуре 30-39 С, рН 3,8-5 0, коэффициенте разбавления 0,35-0,07 ч, По окончании культивирования биомассу отделяют и экстрагируют липиды органическими растворителями.

Пример 1. Дрожжи Candida

guiiiiermondii культивировали в ферментере с рабочим заполнением M-15 кг на питательной среде следующего состава, мг/л: 70%-ная фосфорная кислота 930,0

Хлорид калия 990,0

Сульфат магния 330,0

Хлорид железа 9,0

Сульфат цинка 31,0

Сульфат марганца 25,5

Сульфат меди 7,2

Источником азота служил титрующий агент — 6%-ный раствор гидроокиси аммония. В качестве источника углерола использовали нефтяной дистиллят (фракции 240-360%) в концентрации 10%, содержащий 20% н-алканов.

Концентрация н-алканов в среде

2%. Скорость разбавления 0,25 ч ., Интенсивность аэрации среды воздухом 200 л/кг. ч.

Заданные параметры культивирования давали соотношение углерод н-алканов:кислород, равное 1:14., Культивирование проводили при рН 4-4,5 и температуре 30-32 С.

Дрожжевую суспенэию из ферментера сгущали декантацией и сепариро.— ванием. Биомассу сушили на распылительной сушилке и экстрагировали липиды смесью бензин — зтанол — вода в соотношении 80:19:1. После отгонки экстрагента анализировали состав липидов.

Содержание липидов в биомассе до экстракции было 12,7%.

Состав липидов,%:

Фосфолипиды 28,9

Глицериды 36,0

Свободные жирные кислоты

Стерины

Стериновые эфиры воска 4,0

Пример 2. Способ осуществляли согласно примеру 1, но скорость разбавления составляла 0,1 ч, а интенсивность аэрации воздухом

250 л/кг. ч. При этом соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода составляет 1:44.

После культивирования содержание липидов в биомассе до экстракции быпо 15,2%. Состав липидов,%:

Фосфолипиды 32,6

Глицериды 27,8

Свободные жирные кислоты

Стерины

Стериновые эфиры воска 2,3

839258

67,6

9,9

5,7

1,8

Составитель Т. Мелентьева

Редактор 3. Бородкина Техред N.Tenep Корректор A.Tÿñêî

Заказ 8128/4 Тираж 523

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. д. 4/5

Подп и си ое

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Пример 3. Дрожжи .a.:dida

salmoni cola культивировали согласно примеру 1, ко концентрация нефтяного дистнллята в среде была 20%, содержание н-алканов в дистилляте

35%, что составляло концентрацию н-алканов 7%. Скорость разбавления среды 0,3 ч, интенсивность аэрации 360 л/кг ч. При этом соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода составляет 1:6.

Содержание липидов в биомассе

/ до экстракции было 11,3В.

Состав липидов, Ъ:

Фо с фол ип иды

Глицериды.

Свободные жирные кислоты

Стерины

Стериновые эфиры воска

Таким образом, предлагаемы спо" !

О соб позволяет увеличить выход биОмассы с высоким содержанием липидов определенной фракции.