Способ приготовления гистологическогопрепарата костной ткани

Союз Советсккк

Социаинстическкк

Рестгублик

ОП ИСАНИНА

ИЗЬ6РЕТЕ Н ИЯ

Х АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ю 834439 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 25.07.79 (21) 2816383/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (51) М, Кл.

G 01 N 1/28

Гееударстеенлый кенитет (53) УДК 615.475 (088.8) Опубликовано 30.05.81. Бюллетень №20

Дата опубликования описания 05.06.81 до делан изобретений

N етернтий (72) Автор изобретеиия

А. А. Коробкова

:}

}

Молдавский научно-исследовательский институт»

} 1

ОНКОЛОГИИ ;". .,f. т :.. } . <**ra (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО

ПРЕПАРАТА КОСТНОЛ ТКАНИ

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии.

Известен способ приготовления гистологического препарата костноЙ ткани путем фиксации с последующей обработкой спиртом, декальцинацией и промывкой в проточной воде (1).

Однако приготовление препарата известным способом длится до 52. сут и полученный препарат недостаточно высокого качества, что затрудняет точность диагноза заболевания.

Цель изобретения — ускорение процесса обработки и. улучшение качества препаратов.

Указанная цель достигается тем, что приготавливают гистологический препарат костной ткани путем его фиксации с последующей обработкой спиртом, декальцинацией и промывкой в проточной воде, при этом костную ткань после обработки спиртом последовательно дважды фиксируют хлороформом в течение 2,5 — 3 ч,а декальцинацию ведут в 16 — 20%-ой азотной кислоте на водном растворе глицерина в течение 24-65 ч.

Пример. Для обработки берут образцы биопсии костной ткани следующих видов:

2 губчатая костная ткань с проросшей мяккостью и трубчатая кость. Обработку образцов проводят по предлагаемому способу и параллельно по известному для сравнения полученных результатов.

Доставленные для анализа образцы костной ткани вышеперечисленных видов предварительно обмывают 96 спиртом 7 мин.

Обмытые спиртом образцы костной ткани погружают в 50 мл хлороформа и выдерживают в термостате 1 ч при 45 С. Затем сливают первую порцию хлороформа и заливают образцы 50 мл свежей порцией хлороформа, снова помещают в термостат на

2 ч, выдерживая при 45 С. Обработанные образцы обмывают 10 мин спиртом и 5 мин проточной водой, промытые образцы погружают в декальцинирующий раствор.

Для декальцинации готовят следующие растворы.

Состав № для губчатых костных тканей с проросшей мякотью — 16% азотной кислоты на водном растворе глицерина, предварительно приготовленного смешиванием

50 мл глицерина и 50 мл дистиллированной воды.

834439

Таблиц а 1

Известный способ обработки костной

Фиксация в 15Х ном р ас тв ор е ф ор малина

120

120

148

То же в 10Х-ом

1008

48

388

Итого:

1296

Состав № 2 для трубчатой костной ткани — 200/р азотной кислоты на водном растворе глицерина, предварительно приготовленного смешиванием 50 мл глицерина и

50 мл дистиллированной воды.

Образцы губчатой костной ткани декальцинируют в составе ¹ 1 24 ч, образцы трубчатых костей в составе № 2 65 ч. Окончание процесса декальцинации проверяют лезвием бритвы, путем среза ткани, затем обработанные образцы промывают проточной водой 3 ч. Из обработанного материала изготавливают гистопрепараты для диагностики.

Результаты обработки костной ткани по предлагаемому и известному способам приведены в табл. и 2.

Из приведенных в таблицах данных видно, что скорость обработки костной ткани

Обезжиривание в 96 -ом о спирте

Декальцинация в 7Х-ом растворе азотной кислоты

Промывка в проточной воде

4 по предлагаемому способу увеличивается в

10 — 20 раз.

Предлагаемый способ высокоэффективный, позволяет сократить сроки постановки диагноза в 10 — 20 раз в зависимости от вида обрабатываемого материала. Время нахождения в больнице исследуемого больного сокращается на 2 недели, что позволяет экономить расход средств на медицинское обслуживание больных. Кроме того, ускорение постановки диагноза позволяет рань10 ше начать лечение и предупредить развитие заболевания операционного вмешательства.

Предлагаемый способ позволяет получить гистосрезы хорошого качества, так как они позволяют сохранить структуру даже мягкой ткани и кровяных телец, что очень важно в постановке точного диагноза.

834439

Таблица 2

Предлагаемый способ обработки костной ткани

Пр едв ари тельная

O обмывка 96 -ым спиртом

0,16

0,09

Промывка в 96о- ом спирте

0,16

0,16

Промывка проточной водой

0,1

0,1

Декальцинация в смеси азотной кислоты и водном растворе глицерина состав N - 1 состав Ф 2

Промывка проточной водой

Итого:

30,35

71,42

Формула изобретения.

Составитель С. Малютина

Техред А. Бойкас Корректор Г. Назарова

Тираж 907 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор Е. Кинив

Заказ 4000/63

Одновременная фиксация и обезжиривание в 2-х порциях хлороформа при температуре 45оС

Способ приготовления гистологического препарата костной ткани путем его фиксации с последующей обработкой спиртом, декальцинацией и промывкой в проточной воде, отлича/ощийся тем, что, с целью ускорения процесса обработки и улучшения качества препаратов, костную ткань после обработки спиртом последовательно дважды фиксируют хлороформом в течение 2,5 — 3 ч, а декальцинацию ведут в 16 — 20%-ой азотной кислоте на водном растворе глицерина

40 в течение 24-65 ч.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Меркулов Г. А. Курс патогистологической техники. Л., «Медицина», 1969, 45 с. 29 — 31.