Штамм микромицета 237-продуцент -галактозидазы

Союз Соаетскик

Социалистическик

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ >798173

-© (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 010379 (21) 2750339/28-13 (51)М. Кл.з с присоединением заявки ¹

С 12 и 15/00

С 12 0 13/10 (23) Приоритет

Государственный коинтет

СССР но аелаи нзобретеннй н открытн fi

Опубликовано 230181Бюллетень Н9 3

Дата опубликования описания 230181 (53) УДК 577. 15 (088. 8) (72) Авторы изобретения

A.Ì.Áåçáîðîäîâ, И.В.Улезло и О.М.Эапрометова

Ордена Ленина институт биохимии им. A.Н.Баха

AH СССР (71) Заявитель (54) ШТАММ ИИКРОМИЦЕТА CEP HALOSPOR i UM ACREMON!UÌ

ПРОДУЦЕНТ ф, -ГАЛАКТОЗИДАЗЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к получению нового штамма — продуцентас -галактоэидазы, используемого для увеличения выхода .сахарозы при переработке свекольной патоки.

Известны продуценты о,-галактозидазы из микроскопических грибов, относящихся к родам Mortierella Ciгс1пе11а, Absidia, Penicil\ium 1 .

Известен также Mortierel 1а vinaceae - представитель класса несовершенных микроскопических грибов Fungi

imperfecti.

Культивирование продуцента осуще- 15 ствляется при 30ОС 72 ч. В состав питательной среды входят пептон и мясной экстракт. Активность ннвертазы невелика по сравнению соб-галактозидазой.с,-галактозидаза накапли- 20 вается в мицелии, который затем отделяют, высушивают и подвергают дальнейшей обработке 2 .

Недостаток состоит в том, что изученные культуры образуют внутриклеточный фермент, что осложняет процесс получения ферментного пре- парата. Одним иэ основных требований к продуценту, помимо высокой активности cx .-галактозидаэы, являет- 30

2 .:Ъ ся отсутствие у продуцента инвертаэной активности, поскольку последняя, расщепляя сахарозу, может вносить дополнительные сложности в процесс производства.

Целью изобретения является получение штамма микромицета продуцента оС галактоэидазы с высокой способностью к внеклеточному синтезуса-галактозидазы, при отсутствии инвертазы.

Согласно изобретению в качестве продуцента Сб -галактозидаэы впервые используется штамм Cephalosporium

acremon1um. Для получения данного штамма были исследованы культуры микроскопических грибов, выделенных из лесных и луговых почв РСФСР. В результате исследований бып выделен штамм Cephalosporium acremonium 237 и отнесен к виду Cephalosporium

acremonium (Определители:Н.П.Пидопличко, Киев, 1953, М.A.Ëèòâèíîâ, Ленинград, 1967). Культура хранится в коллекции лаборатории ферментных препаратов ин-та Биохимии им. A.Н.Баха под номером 237

Данный штамм имеет следующие признаки.

798173

Формула изобретения

1,4

0,3

0,3

0,3

0,15

К НР04

Мочевйна

Ca C12

М95 04

Глюкоза

Дрожжевой экстракт

Соевая мука рН

0 05

2,5

5,5

Составитель И. Привалова

Техред А.Савка КорректорВ.Синицкая

Редактор Т.Киселева

Заказ 9950/31 Тираж 539 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Морфология: стерильные гифы ползучие, иногда образующие дерновинки.

Конидиеносцы простые, в виде коротких ответвленных гиф, прямостоящие, на верхушке не вздутые, а лишь слегка, расширенные. Конидии, большей частью яйцевидные, эллиптические или продолговатые, бесцветные или слабоокрашенные, одноклеточные (3-4 к 1,5-1м ) . Конидии образуются на верхушке конидиеносца последовательно по одной, но не отпадают составляя головку до 16м в диаметре, склеенную слизью.

На среде Чапека колонии округлые, довольно плотные, пушистые, белые, затем слегка розоватые.

Кул- туру выращивали при 26-28ОС, на среде следующего состава, г/л:

Данная среда обеспечивает высокий уровень биосинтеэа сб -галактозидазы в культуре. Для сходных целей в сос таве питательной среды используют пептон и мясной экстракт.

Посевным материалом служила трехсуточная культура микромицета в количестве 4ф. Дальнейшее глубинное я б ». кульщвйрЬвание осуществляли в течение 48. ч, Культуральную жидкость отфильтровывали и определяли в ней активность ос-галактоэидазы, используя в качест- щ ве субстрата п-нитрофенил-о(,-галактопиранозид. Активность достигала

1,15 ед/мп.мин. Единица активности рассчитывалась на молекулу обраэующегося п-нитрофенола при 37ОС за

1 мин.

Культивирование выделенного иэ лесной подстилки штамма Cephalosporium acremonium 237 на среде более доступного состава с соевой мукой дает возможность получить высокоактивнуюсб,-галактозидазу эа 48 ч и при отсутствии инвертазы.

Препарат, полученный с помощью данного штамма, может быть использован в пищевой промышленности для увеличения выхода сахарозы при обработке сахарной свеклы.

Штамм микромицета Cephalosðorium

acremonium 237 — яродуцент ос-галактозидазы.

Хранится в коллекции лаборатории ферментных препаратов ин-та биохимии им. А.H.Áàõà АН СССР под номером 237.

Морфология: стерильные гифы ползучие, иногда образующие дерновинки.

Конидиеносцы простые, в виде коротких ответвленных гиф, прямостоящие, на верхушке не вздутые, а лишь слегка расширенные. Конидии, большей частью яйцевидные, эллиптические или продолговатые, бесцветные или слабо-. окрашенные, одноклеточные 3-4 1,51 м . Конидии образуются на верхушке конидиеносца последовательно по одной, но не отпадают, составляя головку до 16у в диаметре, склеенную слизью.

На среде Чапека колонии округлые, довольно плотные, пушистые, белые.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Suzuki et аl. Agr. Вiо1 Chem.

1966, 30, 1039 °

2. Патент США Р 3647625, кл. 195-11, опублик. 1972 (прототип).