Способ повышения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб

 

Союз Советских

Социалистнчеснмх

Республнк

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

,7S9063 (61) Донолннтельное к авт. свил-ву (22) Заявлено 09.01.78 (21) 2568164/28-13 (51)М. КЛ.

A Ol К 61/00 с прнсоелнненнем заявки ¹

Государственный комитет (23) Приоритет до делан изооретений н открытий

Опубликовано 23. 12.80. Бюллетень ¹ 47

Дата опубликования описания 30.12.80 (53) УДК639.3. . 034.2(088.8) - - Мгфсо г (72) Авторы изобретения

В. И. Чернышов и А. Х. Тамбов ! г г

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Краснгса сгЗнайейи государственный университет им. М. В. ЛоМонооогвга-:,, . (71) Заявитель г (54) СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЖИЗНЕСТОЙКОСТИ

ОПЛОДОГВОРЕННОЙ ИКРЫ РЫБ

Данное изобретение относится к ры-. боразведению, в частности к способу пс»вышения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб.

Известен способ, заключающийся в выдерживании оплодотворенной икры в водном растворе биологически активных соединений. В качестве соединения используют молоко fl).

Недостатки известного споссба заключаются в невысоком выходе личинок из икры и высокой смертности выклюнувшихся личинок в постнатальный период.

Цель изобретения — повышение выхода личинок путем снижения смертности последних в постнатальный период.

Для достижения этой цели в качестве биологически активных веществ, исполь- . зуют смесь Р -каротина, aL -токоферола, убихинонаО„ пирогаллола, пропилгаллата

Ы и аскорбиновой кислоты соответственно при концентрации их в растворе 10

10 моля и в соотношении (0,2-2):

14

:(0,4-5):(0,5-2,5):(0,8-3):(0,6-1,5):

:(0,75-5,5), при . этом выдерживание икры осуществляют в течение 10-60 мин.

Способ основан на том, что антиоксиданты и их синергисты предотвращают последующее развитие в липидах икры и эмбриона свободно радикальных реакций, приводящих к накоплению плазматических ядов (липидных перекисей и продуктов их распада), например у вьюновых и осетровых рыб в период эмбрионального развития при недостаточном запасе в яйцеклетке биоантиоксидантов возникает к развивается свободно-радикальная патология, для которой характерно несвойственное нормальным физиологическим про цессам повышение концентрации продуктов свободно-радикальных реакций. Эти продукты обладают активностью плазматических ядов, в повышенных концентрациях нарушают активную и пассивную проницаемость клеточных мембран и оболочек икры, угнетают энергетический и пластический обмен в клетках эмбриональ ных тканей, индуцируют уродства и вызы063 4

3 789 ваки гибель эмбрионов. При обогащении воды антиоксидантами и синергистами антиоксидантного действия икра сорбирует эти вещества и таким образом оптимизируется эмбриогенез.

Способ осуществляют, следующим образом.

Икру вьюновых либо осетровых рыб непосредственно после оплодотворения и обесклеивания выдерживают в течение

1О-60 мин в смеси водных растворов антиоксидантов и синергистов антиоксидантногодействия, например р -каротИна, (, -токоферола, убихинона Я, пирогал<о лола, пропилгаллата, аскорбиновой кислоты в соотношении 0,2:0,4: 0,5:0,8:

:0,6;0,75 — 2:5:2,5:3:1,5:5,5, Действующие агенты берут в виде двухкомпонентных либо трехкомпонентных смесей, тогда преимущественным соотношением для тех и других смесей является соотношение соответственно 1;1 и 1:1:1.

Концентрацию для отдельных компонентов

-14 берут 10 — 10 моля/литр, что составляет в г/л для всех веществ 10 — 10 умноженное, соответственно, на -каро- тин — 468, д, — токоферол — 416, убихинон GL< — 754, пирогаллол — 126, пропилгаллат - 196, аскорбиновая кислота—

17 6.

После этого икру переносят в инкубационный аппарат и инкубируют обычным образом.

Пример 1. Готовят смесь антиоксидантов Ы. -токоферола и убихинона

Я„эв соотношении 1:1 при концентрации

-т каждого 10 моля (соответственно

416 т 10 и 754 10 г/л), после чего ,смешивают ее с Твином 80 в соотношении 1:10. Затем к 100 мл полученной смеси добавляют 900 мл отстойной водопроводной воды, получив таким образом

-8 раствор, содержащий 10 антиоксидантов.

Оплодотворенную и обесклеенную икру вьюна помещают на 30. мин в эксикатор с полученным водным раствором антиок-, сидантов, после чего икру переносят в эксикатор с отстойной водопроводной водой, где инкубируют икру при темпео ратуре 18 С. Каждые 8 часов воду меняют:и удаляют погибшие личинки, На

2-3 сутки получают выклев личинок.

Пример 2. Берут производителей вьюна одинакового размера и состояния и инициируют созревание половых продуктов общепринятым методом путем внутримышечной инъекции хориогонина.

При температуре 21 С получают через

i24 часа "текучую" самку. Самку завора чивают в марлю и выдавливают икру в сухую чашку Петри. Забивают самца, извлекают семенники, помешают их в ту же чашку Петри, не приводя в соприкосновение с икрой и мелко измельчают ножницами. В чашку с половыми продуктами приливают немного воды и осторожными покачиваниями чашки приводят икру и сперму в контакт. Такое покачивание проводят 3-5 мин для того, чтобы икра, которая в первый момент осеменения (активации) становится клейкой, не прилипала ко дну чашки и не склеивалась в комки

15 Активированную икру делят на 2 равные части и одну помещают на 30 мин в эксикатор с водным раствором антиоксидантов и: из сийергистов одной из указанных ниже концентраций. Сбработан2О ную таким образом икру партиями по

500 штук помещают в 3 эксикатора, в которых находится по 1 литру отстоянной водопроводной воды. В контрольные эксикаторы, идентичные экспериментальным, помещают по 500 активированных икринок из части, необработанной водными растворами антиоксидантов. Через каждые

8 часов во всех эксикаторах меняют воду и удаляют погибшие икринки. ТемпеЗО ратура воды в эксикаторах комнатная (15-20 С).

Смесь антиксидантов (A гокоферола и убихинона Я1О) готовят в соотношении

-7

1:1 при концентрации каждого 10 моля.

Берут навеску А-токоферола и убихинона ф и в любой последовательности смешивают с полиоксиэтиленсорбитан моноолеатом (Твином 80) в соотношении

1:10. Берут 100 мл полученной смеси и добавляют 900 мл отстойной водопроводной воды. Полученный раствор содержит 10 моля антиоксидантов. Аналогичным приемом получают растворы с концентрациями анти ксидантов 10, 10, 10, 10, 10 моля.

В результате на 2 — 3-и сутки получают выклев личинок и на 3-и сутки имеют в контроле в 1 — 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к момен50 ту выклева) 178, 231, 287 икринок и вышедших из оболочки личинок 50, 33, 20 штук. На 6-е сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 160, 138, 102 штук и нормально развивающихся 162, 131, 111 штук. В партии обработанной антиоксидантами, например

-1 концентрациями 10 4/литр, на 3-и сутки имеют в 1 — 3-ем эксикаторах соответ ственно мертвых (к моменту выклева) 789063 6

4, в равных соотношениях при концентра ции каждого 1(5 М, например севрюги, и дальнейшем выдерживании икры в экспериментальных условиях выход личинок на 4-е сутки больше, чем в контроле, а, начиная с 9-х суток, процент выживших личинок значительно превышает контроль ный, где на 12-е сутки не остается живых особей, в то время как при ис о пользовании предлагаемого сопсоба сохраняется около 70% личинок севрюги.

131, 138, 167 икринок, вышедших из оболочки 108, 130, 139 личинок. На

:6-е сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 66, 35, 28 штук и нормально развивающихся 303, 327, 305 штук.

При обработке после оплодотворения икры осетровых рыб согласно предлагаемому способу двухкомпонентной смесью аы.иокидантов А -токоферол и убихинон

Таблица 1

Время (сутки) оличество икры и личинок

Контроль (%) Опыт (%) 100 .100

98+0,6

96х2,5

2

Икра

Личинки

Нормально развивающи- Минимальный и максимальеся личинки на 30-й ный размер личинок (мм) день (%) 8-12

8-12

80х10

9-+6

3-10

Контроль

Из таблицы 2 видно,.что при сбрааотке после оплодотворения икры в течение 30 мин водными: растворами антиоксидантов и, их синергистов всех компонентов выживаемость личинок на

30-й день равна 80-85% при контроле, равном 9%. Длина личинок на 30-й день колебалась в контроле от 3 до 10 мм, при обработке икры антиоксидантами и их синергистами была 8-12 мм при большей однородности особей.

Пример 3. Берутсмесьантиоксидантов (пирогаллола, cL -токоферола и убихинона Ц ) в соотношениях 1:1:1 при в -7 концентраци .и к ждого 10 моля. Дал нейшие операции проводят согласно способу.

В результате получают в течение 2-3 сутоквыклевличинок и на 3-и суткиимеютв контроле в 1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева)

180, 200, 296 икринок и вышедших из оболочки личинок 54, 38, 18. На 6-е сут ки от начала инкубации имеют уродливых личинок 164, 121, 94 штуки и нормально развиваюшихся 156, 179, 110 штук. Выклев личинок в контроле наблюдают от 60 до 75 часа эмбриогенеза, при основной массе выклюнувшихся особей на 72-75 час.

7

9

11

12

I А нтиоксиданты (равные соотношения при концентрации 1д "" p) В-каротина;токоферол+убихинонЯ +

1О пирогаллол+пропилгаллат+аскорб иновая кислота

Пропилгаллат+А-токоферол+убихинон 0

94+3,8

94 1,6

93+-4

22х4,3

12 1

10-1

93 2,6

93+ +1,6

90 2,3

86х2,8

77-1,3

7 1-3

7 1-+1,5

69-4

Составитель Е. Лебедюк

Техред М. Рейвес

Корректор Г. Решетняк

Редактор А. Судын

Заказ 8915/1 Тираж 723

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

7 78

В партии, обработанной антиоксидантами, например концентрациями 10 моля, на 3-и сутки имеют в 1 — 3-ем экси. каторах соответственно мертвых (к моменту выклева) 44, 23, 6 икринок и вышедших иэ оболочки 456, 477, 494 личинок. На 6-е сутки от начала инкубацил имеют уродливых личинок 21, 31, 42 штуки ..н нормально развивающихся

435, 446, 452. Выклев в партии, обработанной антиоксидантами, наблюдают от 46 до 52 часов инкубации при основЪ . ной массе выклюнувшихся особей на 4852 час.. Технико-экономический эффект способа заключается в том, что способ позволяет

:увеличить выход личинок из икры в 3 раза, уменьшить их смертность в постнатальнйй период в 8 раэ и получать однородные популяции развивающихся личинок по скорости роста и приросту биомассы и размерам.

9063 8 формула изобретения

Способ повышения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб, заключающийся в выдерживании оплодотворенной икры в водном растворе биологически активныхсоединений, отлич ающи йс я тем, что, с целью повышения выхода личинок путем снижения смертности последних в постнатальный период, в качестве биологически активных веществ . используют смесь ф -каротина,d, -токофе-рола, убихинона ©,д пирогаллола, пропилгаллата и аскорбиновой кислоты соответственно при концентрации их в растворе

1 10 - 10 моля и в соотношении (0,2-2): (0,4-5): (0,5-2,5): (0,8-3): (0,6-1,5); (0,75-5,5), при этом выдерживание икры осуществляют в течение 1060 минут.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1, Авторское свидетельство СССР

¹554848, кл. А 01 К 61/00, 1976.