Способ получения аминокислотного препарата для парентерального питания

 

ое -о . тент-ио.. тека р ;

<>777903

О П

Союз Советских

Сациалнотическик

Ресиублик

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 26.12.78 (21) 2702198/28-13 с присоединением заявки— (23) Приоритет— (43) Опубликовано 15.12.81. Бюллетень № 46 (45) Дата опубликования описания 15.12.81 (51)М.Кл з А61 К 17/ОО

Хасудлрственный комитет

СССР ие делам изобретений и открытий (53) УДК 615.361 J018. .51/55 (088.8) (72) Авторы изобретения

3. А. Чаплыгина, Н. А. Горская, Н. П. Сивакова, 3. С. Тхоржевская, Н. И. Лысаиов, Л. И. Сорина и А. А. Котлярова

Ленинградский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови и 3-я Ленинградская городская станция переливания крови (71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТНОГО

ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНОГО ПИТАНИЯ

1 2

Изобретение относится к медицине.

Известен способ получения аминокислотного препарата для парентерального

--.-"питания путем кислотного гидролиза белка с последующей очисткой образовавшегося гидролизата, коррекции рН до 6 — 7, термической обработки целевого -продукта, его стерилизующей фильтрации и розлива (11.

Однако известный способ не позволяет получить аминокислотный препарат с высоким выходом и свободный от пептидов, очищенный от побочных продуктов гидролизина, стабильный при хранении и сбалансированный по аминокислотному составу.

Целью изобретения является повышение выхода и качества препарата.

Эта цель достигается тем, что гидролиз белка ведут при 125 — 135 С в течение

6 — 7 ч, очистку осуществляют последова-. тельным пропусканием гидролизата через анионит и катионит при одновременной коррекции рН на катионите, далее к полученному продукту добавляют L-триптофан и L-изолейцин в концентрации 0,6 — 2,2 г на

1 л препарата, а термическую обработку и розлив целевого продукта ведут в атмосфе-. ре инертного газа.

Пример 1. К 200 мл цельной крови, эритромассы или сгустков крови прибавляют 200 мл 2 н. соляной кислоты. Гидролиз проводят в запаянных стеклянных ампулах при 125 — 135 С в течение 6 — 7 ч.

После гидролиза ампулы охлаждают, и гидролизную смесь отфильтровывают.

Очистку кислого гидролизата от ионов хлора, гумминовых веществ и аммиака проводят путем последовательного пропускания раствора через анионит и катионит. Для

10 этого в колонку, заполненную 500 г анионита ЭДЭ-10П, подают 1800 мл кислого гидролизата с общим азотом 1,2 — 1,3%.

Скорость заполнения смолы гидролизатом

40 мл/мин. Первые порции фильтрата от15 брасывают. При содержании азота в вытекающей из колонки жидкости 0,2 — 0,4% (рефракция 1,337 — 1,338) уменьшают скорость потока до 25 мл/мин и подсоединяют колонку с катионитом КРС-20П. При рефракции вытекающей из колонки с катионитом жидкости 1,337 — 1,338 фильтрат начинают собирать в приемник. Азотистые про-. дукты элюируют 0,3 н. раствором едкого натра. Конец процесса ионного обмена устанавливают по показателям рН и общего азота в приемнике (рН 6 — 7, общий азот

0,7 — 0,8%, что соответствует рефракции раствора 1,3435). Объем полученного раствора 1980 мл. В полученный очищенный раствор добавляют аминокислоты L-трип777903

Таблица

Аминокислотный препарат

Единицы измерения полученный по предложенному способу известный т

Средние данные 10 серий

Общий азот, % .

Аминный азот, о/о

Глубина расщепления, % рН

Аммиак, мг

Цветность, ед. экст.

Натрий, мэкв/л

Калий, мэкв/л

Хлор, мэка/л

L-триптофан, г/л

Lг-изолейцин, г/л . Выход азотистых продуктов (по общему азоту), %

0,76

0,42

56,0

7;08

26,9

0,08

134,1

18,9

193,4

0,015

0,3

0,78

0,62

78,3

6,91

4,7

0,04

32,1

10,0

33,6

0,7

2,0

3 тофан и L-изолейцин из расчета 0,6 и 2,2 г на 1 л р аствора соответственно.

Препарат стерилизуют путем автоклавирования в атмосфере азота и последующего фильтрования через фильтр «Миллипор».

Пример 2. К 20,0 л цельной крови,, эритромассы или сгустков крови прибавляют 20,0 л 2 н. соляной кислоты. Гидролиз проводят в реакторе при 125 — 135 С в течение 6 — 7 ч. После гидролиза смесь охлаждают и фильтруют. Очистку кислого гидролизата от ионов хлора, гуминовых веществ и аммиака проводят путем последовательного пропускания раствора через анионит и катионит. Для этого в колонку, заполненную 7 кг анионита ЭДЭ-10П, подают 25 — 26 л

" кислого гидролизата с общим азотом 1,2—

1,3 Скорость заполнения смолы гидролизатом 500 — 600 мл/мин. Первые порции фильтрата отбрасывают. При содержании азота в вытекающей из колонки жидкости

0,2 — 0,4% (рефракция 1,337 — 1,338) уменьшают скорость потока до 200 — 250 мл/мин и подсоединяют колонку с катионитом

КРС-20П.

При рефракции вытекающей из колонки с катионитом жидкости 1,337 — 1,338 филь грат начинают собирать в приемник. Азотистые продукты элюируют 0,3 н. раствором едкого натра. Конец процесса ионного обмена устанавливают по показателям рН и общего азота в приемнике (рН 6 — 7, общий азот 0,7 — 0,8%, что соответствует рефракции раствора 1,3435). Объем полученного раствора 28,05 л. В полученный очищенный раствор добавляют аминокислоты L-триптофан и L-изолейцин из расчета 0,8 и 2,5 г, на 1 л раствора соответственно.

Препарат стерилизуют путем автоклавирования в атмосфере азота и последующего фильтрования через фильтр «Мил липор».

4 !

Пример 3, К 20,0 л цельной крови, эрнтромассы или сгустков крови прибавляют 20,0 л 2 н. соляной кислоты. Гидролиз проводят в реакторе при 125 †1 С в те5 чение 6 — 7 ч. После гидролиза смесь охлаждают и фильтруют. Для очистки кислого гидролизата от ионов хлора, гуминовых веществ и аммиака раствор сначала пропускают через анионит ЭДЭ-10П, и собирают фильтрат в приемник. После очистки

" на анйоните фильтрат пропускают через катионит КРС-20П.

В колонку, заполненную 7 кг анионита, подают 25 — 26 л кислого гидролизата с общим азотом 1,2 — 1,3%. Скорость заполнения смолы гидролизатом 500 — 600 мл/мин.

Первые порции фильтрата отбрасывают, При содержании азота в вытекающей из колонки жидкости 0,2 — 0,4% (рефракция

1,337 — 1,338) уменьшают скорость потока до 200 — 250 мл/мин и начинают сбор фильтрата в . приемник. Азотистые продукты элюируют 0,3 н. раствором едкого натра.

Конец процесса ионного обмена устанавли25 вают по показателю общего азота в приемнике (0,7 — 0,8%, что соответствует рефракции раствора 1,344). Объем полученного раствора 28,05 л.

Полученный щелочной раствор, очищен30 ный от избытка ионов хлора и гуминовых веществ, подают на колонку с катионитом (объем раствора 28,05 л). Скорость потока через катионит 200 — 250 мл/мин. При рефракции вытекающей из колонки с катиони35 том жидкости 1,337 — 1,338 фильтрат начи-нают собирать в приемник. Азотистые продукты элюируют дистиллированной водой. Конец процесса ионного обмена устанавливают по показателям рН и общего азота в

40 приемнике (рН 6 — 7, общий азот 0,7 — 0,8%, ., что соответствует рефракции раствора

1,3435). Объем полученного раствора 28,0 л.

777903

Формула изобретения

Составитель С. МалютинаТехред Л. Куклина

Редактор Б. Федотов

Корректор И. Осииовская

Заказ 20/35 Изд. № 650 Тираж 694 Подписное

НПО сПонскъ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, 5К-35, Раушская наб., д. 4/5

3 на. Хврьк. фил. пред. «Патент»

В очищенный раствор добавляют аминокислоты L-триптофан и L-изолейцин из расчета 0,7 и 2,0 r соответственно на 1 л рас. твора.

Препарат стерилизуют путем автоклави -рования в атмосфере азота и последующего фильтрования через фильтр «Миллипор»., Результаты сравнительного анализа состава препаратов, полученных с применением предложенного способа и известного, 10 приведены в таблице.

Из таблицы видно, что предложенный способ позволяет получить раствор с глубиной расщепления белка не менее 75%, т. е. практически смесь свободных амина- 16 кислот. При этом возрастает выход азотис- тых продуктов (свободных аминокислот) с

53% в известном способе, до 72% — в пред-, лагаемом, Более чем в 5 снижается со,держание аммиака, значительно умень- 20 шается содержание натрия и хлора, кон-. центрация которых в новом препарате не превышает их концентрации в плазме крови. Содержание изолейцина и триптофана в новом препарате увеличено в 6,5 и 2 раза 25 соответственно.

Препарат стабилен при хранении. Имею щиеся данные свидетельствуют о том;-что"й течение трех лет хранения препарат полностью сохраняет свои физико-химические 30 и биологические свойства, Таким образом, полученный по предложенному способу аминокислотный препа6 рат практически не содержит пептидов, побочных продуктов гидролиза белка — гуминовых веществ, аммиака, сбалансирован по аминокислотному и минеральному составам, стабилвн при хранении.

Способ получения аминокислотного пре-. парата для парентерального питания путем кислотного гидролиза белка с последующей очисткой образовавшегося гидролизата, коррекции рН до 6 — 7, термической обработки целевого продукта, его стерилизующей фильтрации и розлива, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения выхода и качества препарата, гидролиз белка ведут при 125 — 135 С в течение 6 — 7 ч„ очистку осуществляют последовательным пропусканием гидролизата через анионит и катионит при одновременной коррекции рН на катионите, далее к полученному продукту добавляют L-триптофан и L-изолейцин в концентрации 0,6 — 2,22 г на 1 л препарата, а термическую обработку и розлив целевого продукта ведут в атмосфере инертного газа.

Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:

1. Чаплыгина 3. А., Тхоржевская 3. С., Сенчило Е. А, Проблемы гематологии, 1973, 18, 7, 15.