Штамм @ @ всб-874-продуцент биомассы

 

ШТАММ METHYLOCOCCUS CAPSULATUS ВСБ-874-ПРОДУЦЕНТ БИОМАССЫ. Хранится в музее культур института , ВНИИгенетика под коллекционным номером ЦМПМ В-1743. Морфологические признаки. Клетки в оптимальных условиях-роста имеют форму кокка или диплоккока, диаметром 1 мкм, неподвижны, окружены микрокапсулой, грамотрицательны. Б старой культуре

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) (51)4 С 12 М 15 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

llO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 2764923/28-13 (22) 15.05.79 (46) 07,03.87. Бюл, Р 9 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеэа белковых веществ и Институт технической химии (oo) (72) Л.A. Горская, З.С.Смирнова, Н.Б.Градова, В.П.Дибцов, Л.В.Силантьев, Н.В.Осокина, А.Н,Григорян и К.И.Битрих (OO) (53) 663.11 (088.8) (56) Патент Великобритании Ф 1397735, кл. С 6 F опублик. 1975.,(54)(57) ШТАММ METHYLOCOCCUS CAPSULATUS ВСБ-874-ПРОДУЦЕНТ БИОМАССЫ.

Хранится в музее культур института

"ВНИИгенетика" под коллекционным номером ЦМПМ В-1743.

Морфологические признаки.

Клетки в оптимальных условиях-роста имеют форму кокка или диплоккока, диаметром 1 мкм, неподвижны, окружены микрокапсулой, грамотрицательны.

В старой культуре (10 сут) образуют макрокапсулу. В зависимости от условий роста размер клеток варьирует от

0,7 до 1,4 мкм. При неблагоприятных условиях роста клетки имеют форму тетракокка диаметром 2 мкм, темные в фазовом контрасте.

Культуральные признаки.

Колонии на минеральном агаре выпуклые, блестящие, гладкие, плотные, кремовые, округлые с ровным краем, диамеТром 1 мм на вторые сутки и

2,5 мм на пятые сутки. Водорастворимый пигмент не выделяют.

Физиологические признаки.

Аэроб, способен развиваться в ин-о тервале температур 30-50 С и рН 4-8.

Оптимальные при непрерывном культио вировании температура 42-45 С и рН

5-5, б.

Используют в качестве источника углерода метан как чистый, так и в составе природного газа, и метанол в концентрации 0,01-0,025Х не рас- С" тет на органических средах (мясопентонном, картофельном и сусло- Я агаре) .

Метан асимилирует гексулоэофосфатным путем.

Отношение к источникам азота.

Используют аммонийную, нитратную, аминную и амидную формы источника . Ю азота, фиксирует азот атмосферы. Рас- („) тет при малых дозах азота в среде. (, Продуцирует биомассу с содержанием . белка 77Х.

0200

20

1 77

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к метанассимилирующему штамму бактерий Methylococcus capsulatus ВСБ-874проценту биомассы.

Известен штамм вида Nethylococcus

capsulatus. При оптимальных условиях о роста, а именно при температуре 45 С, рН 6,1, скорости протока 0,18 ч выход биомассы составляет 14 г/л, продуктивность 2,5 г/л ч, содержание белка в биомассе менее 707.

Недостатками известного штамма являются небольшая скорость роста в условиях протока, низкая продуктивность, невысокое содержание белка в биомассе.

Цель изобретения — штамм микроорганизмов, способный расти с высокой продуктивностью, в условиях протока, производящий биомассу с большим содержанием белка.

Штамм Methylococcus capsulatus

ВСБ-874 выделен ступенчатой автоселекцией в непрерывном процессе иэ сточных вод нефтяной скважины.

Штамм обладает способностью расти при кислых значениях рН среды (4,45,6) и температуре 42-49 при большей скорости протока (D = 0,2-0,3 ч ).

Штамм растет при повышенном давлении (7-12 атм), выдерживает перепады давления. Штамм устойчив к примесям гомологов метана и сернистых соединений в природном газе. Выход биомассы при оптимальных условиях роста в зависимости от давления составляет

30-60 г/л, продуктивность 8-10 г/л ч, при этом содержание сырого протеина в биомассе 77Х.

Штамм МейЬу1ососспа capsulatus

ВСБ-874 хранится в музее культур института ВНИИгенетика под коллекционным номером ЦМПМ В-1743 и имеет следующую характеристику.

Морфологические признаки.

Клетки в оптимальных условиях роста имеют форму кокка или дипло.— кокка диаметром 1 мкм, неподвижны, окружены микрокапсулой» грамотрицательны, В старой кульутре (10 сут) образуют микрокапсулу, В зависимости от условий роста диаметр кокков варьирует от 0,7 до

1,4 мкм. При неблагоприятных условиях роста клетки имеют форму тетракокка диаметром 2 мкм, темные в фа.зовом контрасте.

2

Культуральные признаки.

Колонии на минеральном arape выпуклые, блестящие, гладкие, плотные, кремовые, округлые с ровном краем, диаметром 1 мм на вторые сутки и

2,5 мм на пятые сутки, Водорастворимый пигмент не выделяют, Физиологические признаки.

Аэроб способен развиваться в ино тервале температур 30-50 С и рН 4-8.

Оптимальные при непрерывном культио вировании температура 42-45 С и рН

5-5,6.

Используют в качестве источника углерода метан чистый или в составе природного газа и метанол в концентрации 0,01-0»0257.» не растет на органических средах (мясопентонном, картофельном и сусло-агаре), т.е. является облигатным метилотрофом.

Метан ассимилирует гексулозафосфатным путем, Отношение к источникам азота.

Используют аммонийную, нитратную, аминную и амидную формы источника азота, фиксирует азот атмосферы. Растет при малых дозах азота в среде;

Штамм не нуждается в витаминах и других стимуляторах роста. Он непатогенен и конкурентоспособен по отношению к метанокисляющим микроорганизмам других видов. . Особенности штамма обеспечивают стабильный рост его в непрерывном процессе с высокой скоростью и продуктивностью, а также конкурентоспособность, устойчивость к инфицированию, высокое качество биомассы, и повышение экономичности процесса.

П р и м е. р 1. Выращивание культуры Nethylococcus capsulatus штамм

ВСБ-874 проводили в ферментере турбоэжекционного типа объемом 40 л (рабочий объем 20 л) с использованием минеральной питательной среды следующего состава, г/л . Н РО (80X) 0,05 °

MgS0q 7Н, О О, 02; КС1 О, 025; микроэлементы, мг/л: ZnSO 7Н О О, 3;

NnS0g 4Н О 1,9; Cu$04 5Н О 1, 0;

Со$0 7Н О О, 048; Ni$0< 7Н О О, 10;

А1 (S04) 4Н О 0,20» Сг Сlg 2Н О 0,085

Н,ВОЗ 1,25 Ре$04 7Н20 2,1 иа2МО04х

«2Н О 0,045 °

В качестве источника азота и для регулирования величины рН применяли аммиачную воду.

Расходы природного газа и воздуха на 1 л культуральной среды составляли 15 и 45 л/ч соответственно.

Корректор М.Шароши

Редактор С.Титова

Техред М.Ходанич

Заказ 633/1

Тираж 500ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, r,Óæãoðîä, ул. Проектная, 4

Выращивание осуществляли при атмосферном давлении, температуре 45 С, о величине рН 5,0 и скорости протока

0,25 ч, При этом концентрация биомассы составляла 11 г/л абсолютно сухого вещества (АСВ), содержание сырого протеина 777..

В нестерильных условиях инфицирование посторонней микрофлорой составляло 8 об.X.

Пример 2. Выращивание штамма осуществляли,на питательной среде, укаэанной в примере 1, при температуре 45 С и рН 5,5-5,6. Расход природного газа и воздуха составляет

25 и 100 м /ч на 1 м среды соответственно.

Выращивание штамма осуществляли под давлением 7 ата, При этом была

0200 4 получена продуктивность 6,2 кг/м ч при скорости протока 0,27 ч и концентрации биомассы 23 кг/м АСВ, Степень инфицированности посторонней микрофлорой 1ОЖ. Содержание сырого протеина 777.

Пример 3. Выращивание бактерий проводили в периодическом процессе на питательной среде, указанной в примере 1, при температуре 42 и рН 5,5, под давлением 5 ата. Расход природного газа и воздуха составляет

30 и 120 м /ч на 1 м среды соответственно.

Давление повышали после достижения концентрации биомассы 10 кг/м

АСВ. При этом концентрация биомассы—

100 кг/м АСВ за 40 ч.