Способ консервирования спермы рыб

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (11) 591164 (61) Дополнительное к авт. свид-ву(51) М. Кл.

А 01 К 61/00 (22) Заявлено 02.02,76 (21)2320119/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет(43) Опубликовано 05.02.78гБюллетень,№ 5 (45) Дата опубликования описания Z),O1.78

Гооударстввиии1й комитет

Совета Миииотров СССР по делам изоорвтвиий и открытий (53) УДК 639.3, .034, 2(088.8) Н, С, Пушкарь, Ю, А. Иткин, Е, Ф. Копейка, Е. А, Гордиенко, В, Л. Бронштейн и Т. А. Глушко (72) Авторы изобретения

Институт проблем криобиологии и криомедицнны

AH Украинской ССР с (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ РЫБ

Изобретение относится к воспроизведению ценных пород рыб, а именно к способам консер; вирования спермы рыб, преимущественно осетровых, и может найти применение на рыбозаводах.

Известен способ консервирования спермы рыб, предусматривающий охлаждения спермы и смешивание ее с защитным раствором в соотношении 1:2 с последующим замораживанием.

В состав защитного раствора входят следующие компоненты, г/л: NaCI — О, 125, KCI — 0,00509, СаСI z. 2Не0 — 0,00157, NaHCO

0,00119, NaHgPO4 — 0,00297, NlgSO4 7Н20

0,000933, фруктоза — 0,00555, лецитин — 5,00.

Замораживание смеси спермы с защитным раствором ведут в парах азота в присутствии криопротектора до температуры -196 С.

Этим способом консервировали сперму стальноголового лосося. В случае консервирования спермы осетровых рыб данным способом сохранность оплодотворяющей способности реконсервированной спермы небольшая. 2Р

Цель предлагаемого способа — наиболее полное сохранение оплодотворяющей способности спермы рыб после ее восстановления.

Для этого перед смешиванием спермы с защитным раствором в последний вводят трисHCl-буфер, количество защитного раствора берут из расчета обеспечения соотношения его и, спермы 1:1; замораживание ведут вначале со скоростью снижения температуры 0,5 — 5 С в минуту до -12 — -14 С, а затем со скоростью снижения температуры 20 — 30 С в минуту до

-196 С, В качестве криопротектора применяют диметилсульфоксид.

Предлагаемый способ заключается в,следующем.

Сперму разбавляют в соотношении 1:1 раствором, содержащим трис-HCI-буфер, куриный желток и криопротектор-диметилсульфоксид.

Разбавленную сперму разливают в ампулы и помещают в установку для замораживания, . которое ведут вначале со скоростью снижения температуры 0 5 — 5 С в минуту до -12 — -14 . С; а затем со скоростью снижения температуры

20 — 30 С в минуту до -196 С.

Пример. Сперму осетра или севрюги (не содержащую примесей воды, грязи и других веществ и имеющую активность 80 — 100%) в количестве 20 мл смешивают с 20 мл раствора, содержащего 6,5 мл 0,2М трисбуфера (24,33 г оксиметил-аминометана в 1000 мл НеО),6,5 мл

0„l NHCI, 2 мл желтка куриного яйца и 5 мл диметилсульфоксида. После размешиваиия полученную смесь разливают в ампулы по 1 мл.

591164

Формула изобретения

Составитель М. Андреева

Техред О. Луговая

Тираж тЧЗ

Редактор О. Иванова

Заказ 473/4

Корректор В. Сердюк

Подписное

1 НИИПИ Государ«твенного омит«та Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж 35, Раушская иаб., л. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Ампулы помешают в замораживающую установку и охлаждают до -196 С, причем замораживание ведут с переменной скоростью охлаждения: до -12 — - 14 С. Скорость снижения температуры равна от 0,5 до 5 С в минуту, а дальнейшее охлаждение до конечной температуры ведут со скоростью снижения температуры, равной -20 — -30 С в минуту.

Эффективность предлагаемого способа подтверждена исследованиями, показавшими, что активность размножения реконсервированной спермы составляет в среднем 60о/о.

1. Способ консервирования спермы рыб, заключающийся в смешивании ее с защитным раствором и в последующем замораживании в парах азота в присутствии криопротектора до температуры -196 С, отличающийся тем, что, с целью наиболее полного сохранения оплодотворяющей способности реконсервированной спермы осетровых рыб, предварительно перед смешиванием спермы с защитным раствором в последний вводят трис- НС 1-буфер, смешивание осуществляют в соотношении 1:1, а замораживание ведут вначале со скоростью снижения температуры 0,5 — 5 С в минуту до -12 — -14 С, а затем — со скоростью снижения температуры

20 — 30 С в минуту до -196 С.

1р 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве криопротектора применяют диметилсул ьфоксид.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Шевцова Е. «Оплодотворение икры стальиоголового лосося спермой, хранящейся при низкой температуре».— Текущая информация

ЦНИИТЭИРХ, «Рыбохозяйственное использование внутренних водоемов». М., серия 8, вып. 6, 1970.