Способ получения эндо - -1,3 -глюканазы

1щ 574469

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Соцналнстнчвских

Реслублнк (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 06.05.76 (21) 2359510/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (51) М. Кл.2 С 12Р 13/10

Государственный комитет

Совета Министров СССР оа делам изобретений Опубликовано 30.09.77. Бюллетень № 36 (53) УДК 577.15.663.1 (088.8) н открытий

Дата опубликования описания 29.09.77 (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

Л. А. Елякова и H. М. Привалова

Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного научного центра АН СССР (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНДО-13-1,3-! Л!ОКАНЛЗЪ|

Формула изобретения

Изобретение относится к области технической микробиологии, а именно к способам получения эндо+1,3-глюканазы, используемой при исследовании и переработке полисахаридов.

Известен способ получения эндо+1,3-глюканазы, предусматривающий гомогенизацию кристаллического стебелька морского моллюска, центрифугирование и гельфильтрацию.

Однако при использовании известного способа очистку фермента необходимо осуществлять в две стадии. Кроме того, для него характерны длительность процесса и применение дорогостоящих реактивов.

Цель изобретения — расширить сырьевую базу и упростить технологический процесс.

Для этого из морских моллюсков используют моллюск Chlamys abbidus, а гельфильтрацию осуществляют на акрилексе П-30 в

0,1 М ацетатном буфере рН 5,0.

Пример. Берут 50 г замороженных кристаллических стебельков морского моллюска

Chlamys abbidus, измельчают в гомогенизаторе в течение 5 мин при 5000 об/мин в 200 FIJI охлажденного 0,1 M ацетатного буфера. Полученную после гомогенизации массу центрифугируют в течение 20 мин при 8000 об/мин.

Часть гомогената, содержащую 550 мг белка (количество которого определяют методом Лоури), наносят на колонку размером 3><98 см с акрилексом П-30. После гельфильтрации в

0,1 М ацетатном буфере рН 5 0 получают

28,5 г белка, содержащего Р-1,3-глюканазную активность. Затем буферный раствор фермента лиофильно сушат. Выделенный фермент обладает следующими свойствами: оптимум рН в области 4,2 — 6 5; область рН-стабильности 3,5 — 7,5, температурный оптимум 35 С.

Лиофильный порошок фермента хорошо хранится в течение 3 месяцев.

Фермент эндо+1,3-глюканазы расщепляет субстрат-ламинарин, добавляемый в корм для свиней, овец и домашней птицы, внутри моле15 кулы на крупные части.

Выход эндо-р-1,3-глюканазы составляст

79 2%

Способ получения эндо+1,3-глюканазы, предусматривающий гомогенпзацшо кристаллическОГО стебелька морскоГО моллIоска, цептрпфугированпс и гсльфильтрацшо, о тл и ч а25 ю шийся тем, что, с целью расширения сырьевой базы и упрощения технологическоIo процесса, из морских моллюсков используют моллюск Chlamvs abbidus, а гельфпльтрацию осуществляют на акрилексе П-30 в 0,1 М з0 ацетатном буфере рН 5,0.